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天花粉蛋白对结肠癌SW-620细胞株增殖、黏附和迁移的实验研究
目的 研究天花粉蛋白对结肠癌SW-.620细胞株增殖、黏附和迁移的影响.方法 采用MTT比色法检测天花粉蛋白对SW-620细胞的增殖影响；Hochest33258观察天花粉蛋白诱导SW-620细胞凋亡；流式细胞术检测天花粉蛋白对细胞周期和细胞凋亡的影响；细胞黏附和划痕实验检测天花粉蛋白作用后细胞黏附和迁移的改变.结果 1.天花粉蛋白对SW-620细胞的生长具有明显的抑制作用,并呈时间和质量浓度依赖性；2.天花粉蛋白可将SW-620细胞阻滞于S期,并能诱导其凋亡；3.天花粉蛋白具有改变SW-620细胞与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的黏附作用,并使其迁移能力下降.结论 天花粉蛋白能抑制SW620细胞的增殖、诱导其凋亡,并能改变其黏附和迁移能力.
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曲妥珠单抗对SW-620人结肠癌细胞增殖凋亡的影响及其与奥沙利铂协同作用的研究
目的 观察不同浓度曲妥珠单抗单独或联合奥沙利铂对SW-620人结肠癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,并探讨其作用机制.方法 体外培养SW-620人结肠癌细胞.①细胞增殖实验:将细胞分为2个大组:曲妥珠单抗组和曲妥珠单抗+奥沙利铂组,每个大组内设8个浓度小组(每个小组设5个复孔),曲妥珠单抗组的浓度依次为0、0.001、0.01、0.1、1、10、100及1 000 μg/mL,对应的曲妥珠单抗+奥沙利铂组曲妥珠单抗的浓度与前相同,不同之处在于均加入了奥沙利铂(10 μmol/L).采用CCK-8法检测各组细胞的吸光度(A)值.②细胞凋亡实验:组别设置同增殖实验,只是曲妥珠单抗的浓度仅包括0、0.1、1及10 μg/mL.采用流式细胞仪检测各组细胞的细胞凋亡率及细胞周期分布.③人表皮生长因子受体2 (her-2)蛋白表达检测:分别以0、100及1 000 μg/mL曲妥珠单抗,以及0、1及10 μg/mL曲妥珠单抗联合奥沙利铂(10 μmol/L)处理SW-620细胞,采用Western blot法检测各组细胞中her-2蛋白的表达.结果 ①细胞增殖实验:同种浓度下曲妥珠单抗+奥沙利铂组的A值均低于曲妥珠单抗组(P＜0.05),且随着曲妥珠单抗浓度的增加,A值在逐渐降低.②细胞凋亡实验:同种曲妥珠单抗浓度下,曲妥珠单抗组+奥沙利铂组的细胞凋亡率均较曲妥珠单抗组高(P＜0.05).流式细胞检测:不同浓度曲妥珠单抗+奥沙利铂处理后,随浓度增加,G1期细胞比例呈下降趋势,S期细胞比例呈上升趋势,且呈剂量依赖性;至1 μg/mL和10 μg/mL时,与曲妥珠单抗组比较,曲妥珠单抗+奥沙利铂组的G1期细胞比例较低,S期细胞比例较高(P＜0.05);在0.1、1和10 μg/mL浓度的曲妥珠单抗条件下,曲妥珠单抗联合奥沙利铂组的G2期细胞比例较曲妥珠单抗组升高(P＜0.01).③her-2蛋白的表达水平:1、100及1 000 μg/mL曲妥珠单抗组细胞中her-2蛋白的表达水平逐渐降低,3组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05);0、1及10 μg/mL曲妥珠单抗+奥沙利铂组中her-2蛋白的表达水平也逐渐降低,3组间两两比较差异也有统计学意义(P＜0.05).结论 高浓度曲妥珠单抗可抑制SW-620人结肠癌细胞的增殖,诱导其凋亡.曲妥珠单抗和奥沙利铂具有协同抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用.
