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腺病毒介导的Wnt10b对HaCaT细胞迁移的作用及机制
目的:探讨Wnt 10b对HaCaT表皮细胞迁移的影响及机制.方法:分别用重组腺病毒Ad-GFP、Ad-GFP-Wnt 10b感染HaCaT表皮细胞,利用细胞免疫荧光技术检测腺病毒Ad-GFP-Wnt 10b感染细胞后的过表达情况;采用细胞划痕实验,于不同时间点观察并记录经Wnt10b处理后,HaCaT细胞体外迁移功能的改变;进一步采用Westen blot技术检测不同腺病毒处理后,HaCaT细胞中Wnt信号关键分子β-catenin、细胞粘附分子E-cadherin表达的改变情况.结果:①Ad-GFP-Wnt 10b感染HaCaT细胞48 h后,细胞内GFP表达上调,细胞免疫荧光染色显示Wnt 10b处理组高表达Wnt1 0b蛋白;②HaCaT细胞经Ad-GFP-Wnt 10b处理后,细胞创面愈合速度明显增快;③Wnt 10b处理组细胞β-catenin蛋白表达水平显著高于对照组,而E-cadherin蛋白表达水平显著低于对照组.结论:Wnt 10b能促进HaCaT细胞迁移,且该效应涉及经典Wnt/β-catenin信号的激活及由E-cadherin介导的细胞粘附性的减弱.
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桑黄多糖对类风湿性关节炎模型大鼠关节滑膜经典Wnt信号的影响
目的 研究中药桑黄中活性成分多糖(PPS)对类风湿性关节炎(RA)模型大鼠的治疗作用和对RA模型大鼠滑膜组织经典Wnt信号的影响.方法 将SD雄性大鼠随机分为3组:正常组、模型组和PPS组,每组10只.模型组和PPS组于每只大鼠右后足趾皮内注射0.1mL完全弗氏佐剂致炎制作RA模型,正常组于相同部位注射等量PBS;PPS组在造模后第8d给予50 mg/kg PPS灌胃治疗,每日1次,至第32 d,其余两组代之以等量生理盐水灌胃.造模后第16、20、24、28、32 d对各组大鼠进行关节炎评分和足爪肿胀评分,造模后第28 d采用real time qPCR检测各组大鼠滑膜中fibronectin表达,Wnt信号通路上游负调控基因SFRP1、2和通路关键基因β-catenin、C-myc、ccnd1的表达.结果 PPS灌胃治疗后,RA模型大鼠关节炎评分、足爪肿胀评分明显降低;与正常组相比,模型组大鼠滑膜中SFRP1、2表达明显降低,β-catenin、C-myc、ccnd1和fibronectin表达明显升高;但经PPS灌胃治疗后,PPS组滑膜中SFRP1、2表达明显升高,β-catenin、C-myc、ccnd1和fibronectin表达明显降低.结论 PPS对RA模型大鼠滑膜中Wnt信号具有抑制作用,对RA模型大鼠具有一定的治疗作用.
