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β-catenin基因在人骨肉瘤MG63细胞系的表达变化
目的:观察分析β-catenin基因在人骨肉瘤MG63细胞系的表达变化.方法:培养MG63细胞株,用不同浓度的Wnt3a蛋白或相同浓度、不同时间段的Wnt3a蛋白刺激液MG63细胞生长,用FQ-PCR在mRNA水平检测β-catenin在MG63细胞系的表达变化.培养MG63细胞株,用相同浓度的Wnt3a蛋白刺激,比较刺激组与空白对照组的细胞数目的差别.结果:在细胞生长的第0,1天两组的MG63细胞数量对比没有统计学差异(P＞0.05);而在第2,3,4天对照组细胞增殖速度较刺激组缓缓,经比较(t=4.109,3.892,5.215,均P＜0.05).β-catenin基因表达不会因为Wnt3a的浓度增加而增加.100 ng/mL的Wnt3a蛋白刺激β-catenin基因表达高,其他几个浓度的β-catenin基因表达对比没有统计学差异(P＞0.05).在100 ng/mL的Wnt3a蛋白刺激下,β-catenin基因表达会随时间延长而增加,6h时β-catenin基因表达高(P＜0.05),随后β-catenin基因表达则没有统计学差异(P＞0.005).结论:Wnt蛋白对MG63细胞有正向增加增殖作用.激活Wnt/β-catenin信号通路能促进MG63的细胞增殖.
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丹参酮ⅡA与阿霉素联合应用对人骨肉瘤MG63细胞增殖体外抑制作用
目的:研究丹参酮ⅡA(TanⅡA)与阿霉素(ADM)联合应用对人骨肉瘤MG63细胞增殖的抑制作用及机理.方法:不同浓度的TanⅡA与ADM联合处理MG63细胞后,MTT比色分析法检测细胞的增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞的凋亡率,蛋白质印记法(Western blot)检测细胞Bel-2,Bax和Caspase-3的蛋白表达水平改变.结果:处理48 h ADM+低浓度TanⅡA组与ADM+高浓度TanⅡA组的抑制率分别为62.35％±1.58％、76.38％±2.01％,明显高于ADM组(32.67％±1.65％)、低浓度TanⅡA组(18.55％±0.77％)和高浓度TanⅡA组(44.25％±1.01％);流式结果显示空白对照组、ADM组、低浓度TanⅡA组、高浓度TanⅡA组、ADM+低浓度TanⅡA组、ADM+高浓度TanⅡA组48 h细胞凋亡率分别为0.03％,10.24％,4.47％,13.06％,13.23％,21.36％;联合用药组Bcl-2蛋白表达明显较单一用药组下调,而Bax和Caspase-3的蛋白表达较单一用药组明显上调.结论:TanⅡA与ADM联合应用对人骨肉瘤MG63细胞有显著的抑制作用,其作用可能与干预Bcl-2,Bax和Caspase-3等癌基因表达从而诱导细胞凋亡有关.
关键词： 丹参酮ⅡA 阿霉素 人骨肉瘤MG63细胞 增殖抑制 -
黄芩苷对人骨肉瘤MG63细胞凋亡及MMPs表达的影响
目的：研究黄芩苷对人骨肉瘤MG63细胞凋亡及基质金属蛋白酶（MMPs）表达的影响。方法：以0（空白对照）、5、10、20、40、80、160、320μg/ml黄芩苷处理MG63细胞24 h后，检测细胞存活率和细胞中MMP-2、MMP-9的表达量，计算半数抑制浓度（IC50），观察细胞凋亡情况。结果：与空白对照比较，黄芩苷处理MG63细胞后细胞存活率降低，凋亡细胞数量增加，细胞中MMP-2和MMP-9表达量降低，并以320μg/ml黄芩苷处理时细胞中MMP-2和MMP-9表达量下降具有统计学意义（P＜0.05）；IC50为（40.21±9.20）μg/ml，各作用效应均呈浓度依赖性。结论：黄芩苷可抑制MG63细胞增殖，诱导其凋亡，较高质量浓度时可抑制细胞中MMP-2、MMP-9的表达。
关键词： 黄芩苷 人骨肉瘤MG63细胞 基质金属蛋白酶 细胞凋亡
