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检测血清中血红蛋白含量的邻-甲联苯胺法的建立
目的建立牛血清中微量血红蛋白含量的检测方法.方法血红蛋白中亚铁血红素可使邻-甲联苯胺氧化显蓝色,加酸后呈黄色,吸收峰在435 nm,检测不同浓度标准血红蛋白与邻-甲联苯胺反应后的吸光度,确定此法的线性范围.再取线性范围内的高、中、低和低4个血红蛋白浓度的样品各6份,测定回收率,确定定量限.结果邻-甲联苯胺法的线性范围为7.5～30.0 mg/dl,相关系数r＞0.99,定量限为10.0 mg/dl.当血红蛋白浓度为10 mg/dl时,回收率为98%～109%,变异系数为2.4%～3.5%.检测牛血清71批,68批血红蛋白含量为0.002%～0.02%,3批血红蛋白含量为0.03%.结论邻-甲联苯胺法简单、准确,可用于牛血清中血红蛋白含量检测.
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邻-甲联苯胺法测定血浆游离血红蛋白的基质效应及消除方法
目的：研究邻-甲联苯胺法（经典方法）测定血浆游离血红蛋白（Hb）的基质效应及消除方法。方法以用生理盐水1000倍稀释的 Hb 储存液（浓度为103.1 g/L）作为标准液，将此 Hb 标准液再用无 Hb 血浆分别稀释500、1000、2000、4000倍（游离 Hb 理论浓度分别为206.20、103.10、51.55、25.78 mg/L），然后用经典方法测定游离 Hb 浓度，比较与理论值的差异。将 Hb 储存液分别用生理盐水（经典方法）、无 Hb 血浆（消除方法1）、混合血浆（消除方法2）1000倍稀释作为标准液。经典方法和消除方法1的计算公式为血浆游离 Hb（mg/L）=测定管吸光度（A）值×标准液浓度÷标准管 A 值；消除方法2的计算公式为血浆游离 Hb（mg/L）=测定管 A 值×标准液浓度÷（标准管 A 值×混合血浆 A 值）；消除方法3操作同经典方法，计算公式为血浆游离 Hb（mg/L）=测定管 A 值×标准液浓度×2.35÷标准管 A 值。测定40份标本，比较各消除方法的结果。在血浆中分别加入206.20、103.10、51.55 mg/L Hb，测定各消除方法的回收率。分别取6.25、12.50、25.00、50.00μg/L 维生素 C 溶液4.5 mL，各加1.031 g/L Hb 标准液0.5 mL，用经典方法测定回收率。结果采用无 Hb 血浆500、1000、2000、4000倍稀释的 Hb 标准液的游离 Hb 测定结果分别为87.85、43.16、21.90、10.99 mg/L。40份标本采用经典方法、消除方法1、消除方法2、消除方法3测定的游离 Hb 浓度分别为（7.99±4.90）、（18.61±11.42）、（19.18±11.77）、（18.77±11.52）mg/L；消除方法1、消除方法2、消除方法3的结果均高于经典方法（P 均<0.01），但3种消除方法之间差异均无统计学意义（P 均>0.05）。经典方法、消除方法1、消除方法2、消除方法3的平均回收率分别为42.54%、98.33%、100.98%、97.56%。采用经典方法检测Hb 在6.25、12.50、25.00、50.00μg/L 维生素 C 溶液中的回收率分别为98.57%、98.17%、97.17%、95.16%。结论邻-甲联苯胺法测定血浆游离 Hb 存在基质效应，3种消除方法均可消除基质效应影响。
