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阿尔茨海默病患者血清中microRNAs表达谱的研究
目的 探讨阿尔茨海默病(AD)患者血清中microRNAs与阿尔茨海默病之间的关系,寻求一种可能作为辅助诊断AD的早期生物标志物.方法 研究对象分为AD组和对照组,分别取其血清并提取microRNAs,利用microRNA基因芯片检测出表达差异的microRNAs,并用实时荧光定量PCR (QT-PCR)的方法进行验证.结果 基因芯片筛选出43个与AD相关的差异表达microRNAs (P＜ 0.05),其中microRNA-107及microRNA-222的表达水平在AD患者中均显著低于对照组(P＜0.01),与QT-PCR验证结果一致.结论 MicroRNA-107及microRNA-222可能通过多种途径影响AD的发生发展,有望成为一种辅助诊断AD的早期生物标志物.
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microRNA-222通过Akt信号通路调控人外周血内皮祖细胞迁移
目的 探讨microRNA-222(miR-222)通过调控Akt信号通路对内皮祖细胞(EPCs)迁移功能的影响及对靶向调控转录因子ETS-1(ETS proto-oncogene 1,transcription factor)的影响.方法 从正常成人外周静脉血分离、体外培养后鉴定EPCs.分别向人内皮祖细胞(hEPCs)转染人工合成的miR-222的模拟物(mimic )、抑制物(inhibitor )和相应的阴性对照(NC).用荧光定量PCR法测miR-222及ETS-1 mRNA的表达.应用Western blot测量每组的 ETS-1、p-Akt和Akt的蛋白表达.各组EPCs用Transwell检测其迁移.结果 miR-222可以靶向影响ETS-1的mRNA和蛋白表达.与对照组比较,上调miR-222表达可致ETS-1的 mRNA和蛋白表达降低,同时抑制EPCs的迁移能力(均P ＜0.05).相反,下调miR-222表达可致ETS-1的mRNA和蛋白表达升高,同时增强EPCs的迁移能力(均P ＜0.05).Western blot检测显示,上调miR-222表达抑制p-Akt的蛋白水平;下调miR-222表达增强p-Akt的蛋白水平(均P＜0.05).结论 miR-222可通过调控Akt信号通路和靶向转录因子ETS-1影响EPCs的迁移功能.
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miR-222通过MMP1对增生性瘢痕成纤维细胞的调控机制研究
目的 观察成纤维胶原酶1(MMP1)和miR-222在增生性瘢痕(HS)成纤维细胞中的表达水平,探讨miR-222对HS发生、发展的调控机制.方法 选取36例HS患者的HS组织,并各留取HS旁正常组织作为对照.分离培养出HS组织与正常组织的成纤维细胞;采用RT-PCR法检测成纤维细胞MMP1 mRNA和miR-222表达水平;采用Western blot法检测成纤维细胞MMP1蛋白表达水平;采用MTT法检测成纤维细胞增殖情况;采用双荧光素酶报告实验检测miR-222是否可调控MMP1基因.结果 与正常组织比较,HS组织成纤维细胞MMP1 mRNA、蛋白表达水平均下调(均P＜0.05),miR-222表达水平上调(P＜0.05).与空白对照成纤维细胞比较,HS组织转染MMP1过表达质粒后的成纤维细胞MMP1 mRNA、蛋白表达水平均上调(均P＜0.05),增殖速度明显减慢(P＜0.05);转染antagomiR-222质粒后的成纤维细胞miR-222表达水平下调(P＜0.05),MMP1 mRNA表达水平上调(P＜0.05),增殖速度明显减慢(P＜0.05).双荧光素酶报告实验结果表明miR-222能与MMP1基因的3 ’-UTR区相结合,从而调控其表达.结论 miR-222在HS组织中存在过表达,miR-222或通过负调控其靶基因MMP1的表达而发挥其调控成纤维细胞增殖和凋亡的作用.
关键词： 增生性瘢痕 microRNA-222 基质金属蛋白酶1 -
MicroRNA-222对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
目的 探讨microRNA-222(miR-222)对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 将miR-222和对照分别转染入肺腺癌细胞系A549进行活细胞计数法试剂盒(CCK-8)增殖实验、Transwell迁移及Matrigel侵袭实验,观察miR-222对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.运用荧光素酶报告实验、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及Western blot验证miR-222靶向下调ETS1的过程.结果 CCK-8增殖实验,Transwell迁移及Matrigel侵袭实验发现,与对照组相比miR-222能够促进肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭.荧光素酶报告实验、qRT-PCR及Westem blot实验发现,miR-222可以靶向下调ETS1的表达,且ETS1参与调节上述过程.结论 miR-222通过靶向下调ETS1,促进肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭.
关键词： microRNA-222 ETS1 增殖 迁移 侵袭
