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姜黄素通过清除小胶质细胞内活性氧类物质保护多巴胺能细胞
目的 探讨小胶质细胞在多巴胺能细胞损伤中的作用,以及姜黄素通过抑制小胶质细胞反应保护多巴胺能细胞的机制.方法 选用大鼠嗜铬细胞瘤株PC12细胞,利用鱼藤酮诱导其损伤建立帕金森病细胞模型,用姜黄素预处理4h的小胶质细胞(BV-2)再经鱼藤酮处理4h后的细胞上清作为条件培养液(microglia conditioned medium with curcumin,MCMC)处理PC12细胞,并设空白对照组.应用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞活力；DCFH-DA染色检测BV-2细胞内活性氧类物质(ROS)水平；磷脂结合蛋白(annexinⅤ)-碘化丙啶(PI)双染色流式细胞仪检测PC12细胞凋亡.结果 5nM鱼藤酮单独作用于PC12细胞,其存活率及凋亡率与空白组相比无明显差别(P＞0.05)；与对照组相比,姜黄素预处理的BV-2细胞,其ROS水平降低(P＜0.01)；受MCMC处理的PC12细胞,与对照组比较,细胞活力增加,细胞凋亡率降低(P＜0.01).结论 鱼藤酮通过激活小胶质细胞产生ROS,损伤多巴胺能细胞.姜黄素通过抑制小胶质细胞反应,清除小胶质细胞内ROS,从而保护多巴胺能细胞.
关键词： PC12细胞 条件培养液 小胶质细胞 活性氧类物质(ROS) -
精子过量残留胞质的特性研究
目的 观察精子过量残留胞质(ERC)结构在体外的稳定性,探讨ERC的适宜检测方法 及其临床意义.方法监测精子在干、湿片检测状态下精子ERC率与精液离体时间、精子活动力、活性氧类物质(ROS)以及精子成熟度指标的关系.结果 ①精液射出体外0～120 min时间段内,无论精子处于干、湿状态,其ERC率均随精液标本离体时间延长而持续下降(P<0.001);各时间段内湿片活动精子ERC率均明显高于不活动精子(P<0.001),且ERC保有率明显高于干片(P<0.001).②精液标本经上泳分离后,上泳精子湿片ERC率显著高于底层精子(P<0.001),而干片ERC水平则明显低于底层精子(P<0.001),同层精子湿片法ERC率明显高于干片法(P<0.001).③湿片状态下精子ERC率与精子前向运动率、活动率无相关性(P均>0.05),但干片状态下呈显著负相关(r=-0.472、r=-0.430,P=0.009、P=0.018);④湿片状态下精子ERC率与ROS、核蛋白不成熟度(湿染法)、DNA碎片率(湿染法)、精子-透明质酸结合率(HBA)均无显著相关性(P>0.05);干片状态下精子ERC率与ROS(r=0.784,P<0.001)、DNA碎片(干片法)(r=0.574,P=0.001)、HBA(r=-0.336,P=0.036)显著相关,与核蛋白不成熟度(干片法)无显著相关性(P>0.05),但标本内部ERC精子较非ERC精子的核蛋白不成熟率更高(P<0.001).结论 精子ERC结构随精液离体时间延长呈进行性崩解趋势,精子在经历自然干燥后(干片法)其ERC保有率更具临床意义,干片法ERC水平与精子活动能力、ROS水平及成熟度显著相关,ERC结构是不良质量精子的标志物.
关键词： 精子 过量残留胞质(ERC) 稳定性 成熟度 活性氧类物质(ROS)
