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核内不均一核糖核蛋白A2/B1及p53蛋白诊断肺癌的价值
目的 探讨检测支气管肺泡灌洗液(BALF)脱落细胞中核内不均一核糖核蛋白(hnRNP)A2/B1和血细胞中p53蛋白在肺癌诊断中的价值.方法 收集经病理确诊的肺癌患者30例BALF,以30例肺部良性疾病患者BALF为对照组,采用流式细胞术(FCM),检测两组患者BALF脱落细胞中hnRNPA2/B1表达率及血中p53蛋白表达率.结果 肺癌组hnRNPA2/B1为(74.04±22.34)%显著高于肺部良性疾病组(28.03±9.01)%(P＜0.01);hnRNPA2/B1水平与非小细胞肺癌临床TNM分期无关(P＞0.05).肺癌组p53蛋白水平为(2.16±1.88)%显著高于肺部良性疾病组(0.93±0.51)%(P＜0.01);hnRNPA2/B1和p53蛋白诊断肺癌的敏感性分别为86.7%、70.0%,特异性为96.7%、83.3%;联合检测hnRNPA2/B1和p53的敏感性为93.3%,特异性为100%.结论 hnRNPA2/B1和血细胞中p53蛋白水平对肺癌有辅助诊断价值,尤其对早期肺癌的诊断有重要意义,两种指标联合检测可提高诊断敏感性.
关键词： 肺癌 核内不均一核糖核蛋白A2/B1 P53蛋白 支气管肺泡灌洗液 -
核内不均一核糖核蛋白A2/B1在子宫内膜异位症组织中的表达
目的:研究核内不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2/B1,hnRNP A2/B1)在正常子宫内膜、子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜、患者异位内膜间的表达差异.方法:用免疫组织化学法和Western blot分析,研究3例增生中晚期正常子宫内膜、3例增生中晚期EMs患者的在位内膜和异位内膜中,hnRNP A2/B1蛋白的表达差异.结果:hnRNP A2/B1主要表达于间质和腺上皮细胞的细胞核内,且EMs患者在位内膜和异位内膜中的表达强度,均低于正常内膜中的表达(P＜0.05);而患者在位内膜和异位内膜中的表达,无明显差异(P＞0.05).结论:hnRNP A2/B1可能参与EMs的发生和发展.
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痰液hnRNP A2/B1在肺癌临床诊断中的价值
目的 探讨痰液细胞核内不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2/B1)在肺癌临床诊断中的价值.方法 应用免疫组织化学SP法分别检测肺癌、吸烟及正常人群组痰液细胞hnRNPA2/B1阳性表达,并分析其在不同人群组中表达的特点.结果 肺癌组及吸烟组痰液细胞hnRNPA2/B1阳性表达率显著高于正常人组(P＜0.05),肺癌与吸烟组比较无显著性差异(P＞0.05).结论 痰液hnRNP A2/B1的过量表达伴随着肺癌的发生、发展、转移的全过程.因此检测痰液细胞(特别是吸烟者)hnRNP A2/B1阳性表达,有助于肺癌的早期诊断.
关键词： 痰液 核内不均一核糖核蛋白A2/B1 肺癌 -
抗人核内不均一核糖核蛋白A2/B1抗体可变区基因克隆、串联和表达
目的克隆抗人核内不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2/B1,HnRNPA2/B1)单克隆抗体的重链可变区(variable region of heavy chain, VH)和轻链可变区(variable region of light chain, VL)基因,构建抗HnRNPA2/B1单链抗体(single chain Fv,ScFv)基因,并在大肠杆菌表达.方法采用斑点ELISA、Western印迹和免疫组化检测抗HnRNPA2/B1单克隆抗体3E8的特异性,并通过逆转录-聚合酶链反应、重叠延伸PCR来克隆、串联VH和VL基因,构建抗HnRNPA2/B1 ScFv基因pET28(a+)表达载体,在大肠杆菌BL21中诱导表达,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳、竞争抑制ELISA检测表达产物.结果 3E8抗体能特异性地与HnRNPA2/B1合成肽以及3株人肺癌细胞内HnRNPA2/B1结合;克隆的VH基因为345 bp,VL基因为309 bp,符合小鼠抗体可变区特性;抗HnRNPA2/B1 ScFv蛋白以包涵体形式表达,分子量约28 000,并具有与抗原结合活性.结论成功构建了抗HnRNPA2/B1 ScFv基因克隆,并在大肠杆菌中获得了功能性表达,为阐明HnRNPA2/B1与肺癌相关性奠定了实验基础.
关键词： 核内不均一核糖核蛋白A2/B1 抗体可变区基因 单链抗体 肺癌 -
人肺癌细胞株中hnRNP A2/B1表达的研究
目的研究人肺癌细胞株中核内不均一核糖核蛋白(hnRNP)A2/B1及hnRNP B1的表达.方法采用特异性hnRNP A2/B1及hnRNP B1引物,应用RT-PCR方法研究肺癌细胞株hnRNP A2/B1 mRNA的表达,以抗hnRNP B1单克隆抗体免疫细胞化学染色方法研究肺癌细胞hnRNP A2/B1蛋白的亚细胞定位.结果 RT-PCR显示人肺腺癌细胞株SPC-A1及Y-90,小细胞肺癌细胞株NCI-H446及鳞癌细胞株A431均表达hnRNP A2/B2及hnRNP B1,其PCR产物分子量分别在661及1 039 bp左右,与预期大小的hnRNP A2/B1 cDNA片断相符.免疫细胞化学研究发现,肺腺癌细胞株SPC-A1及Y-90,小细胞肺癌细胞株NCI-H446及鳞癌A431的细胞浆及细胞核内均可见特异的hnRNP B1染色,鳞癌A431及小细胞肺癌NCI-H446 hnRNP B1染色较肺腺癌细胞株SPC-A1及Y-90明显.结论肺癌细胞株hnRNP A2/B1及hnRNP B1表达明显增高.
关键词： 肺肿瘤 核内不均一核糖核蛋白A2/B1
