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内皮细胞中剪切型XBP1的过表达对动脉粥样硬化形成的影响
目的 探讨血管壁内皮细胞中剪切型XBP1的过表达对动脉粥样硬化形成的影响.方法 从产后的健康新生儿脐带获取脐静脉内皮细胞,脐静脉内皮细胞传代至第3代后,以不同浓度(10 mg/L,20 mg/L)的氧化胆固醇(7-酮基胆固醇,7-KC)温育脐静脉内皮细胞,应用Western Blot的方法,检测脐静脉内皮细胞中剪切型XBP1的蛋白表达水平,凋亡蛋白Caspase3的活性,应用流式细胞学的方法检测脐静脉内皮细胞的凋亡率和继发性细胞坏死阳性率.结果 随着7-KC温育浓度的增加,脐静脉内皮细胞中剪切型XBP1的蛋白表达水平增加,Caspase3的活性增加,脐静脉内皮细胞的凋亡率和继发性细胞坏死阳性率增加.结论 血管壁内皮细胞S-XBP1的表达可能会激活凋亡途径,使内皮细胞发生凋亡,启动AS的形成.
关键词： 动脉粥样硬化 剪切型x盒结合蛋白1 凋亡蛋白3 人脐静脉内皮细胞 氧化胆固醇 -
剪切型X盒结合蛋白1在单侧输尿管结扎小鼠肾间质纤维化中的作用
剪切型X盒结合蛋白1 (spliced X-box binding protein 1,XBP1S)是内质网应激关键信号分子.有研究表明XBPlS在肾脏系膜细胞具有抗氧化应激和抗凋亡作用,而氧化应激是肾纤维化发生发展重要因素.缬沙坦(valsartan)具有改善肾纤维化作用.本研究旨在探讨valsartan能否通过XBP1S进而影响肾间质纤维化发展.C57BL/6J小鼠行左侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)制作肾纤维化模型,valsartan组于造模前1d起每天给予valsartan (20 mg/kg)灌胃,UUO组和对照组给予等容积生理盐水灌胃,于手术后第7天处死动物,取左侧肾.HE、Masson和天狼星红(Sirius red)染色观察肾间质纤维化;免疫组化染色观察XBP1S在肾间质表达;Western blot检测XBP1S、纤维连接蛋白(fibronectin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,a-SMA)、BAX和BCL2蛋白水平;实时荧光定量PCR检测NADPH氧化酶亚基p47-phox与p67-phox mRNA水平.结果显示,与对照组相比,UUO组XBP1S蛋白水平明显降低,valsartan明显升高UUO小鼠XBP1S蛋白水平;HE、Masson和Sirius red染色结果显示valsartan明显改善UUO小鼠肾间质纤维化;Western blot结果显示valsartan明显降低UUO小鼠fibronectin、BAX/BCL2、a-SMA蛋白水平.实时荧光定量PCR结果显示:UUO组p47-phox与p67-phoxmRNA水平明显较对照组升高,相比较于UUO组,valsartan明显降低UUO小鼠p47-phox与p67-phox mRNA水平.以上结果提示,XBP1S蛋白水平下调与UUO模型的肾间质纤维化有关,其机制可能与XBP1S抗氧化应激相关.
关键词： 内质网应激 肾纤维化 剪切型x盒结合蛋白1 氧化应激
