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粘附素5文献资料
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人可溶性粘附素5截短体的克隆、表达及生物活性测定
目的:克隆和转染人可溶性粘附素5截短体(sCadherin5△),并检测其生物活性.方法:RT-PCR扩增Cadherin5△cDNA,并克隆入pMSCV逆转录病毒载体,构建pMSCV/sCadherin5△,转化感受态大肠杆菌XL-blue菌株,提取、纯化和酶切质粒,测序分析sCadherin5△,转染NIH3T3细胞,mRNA和蛋白质水平检测NIH3T3细胞表达和分泌sCadherin5△,MTT方法检测sCadherin5△生物活性.结果:PCR产物约为1 128 bp,构建了pMSCV/sCadherin5△质粒载体,序列测定的结果与GeneBank中Cadherin5胞膜外区121 bp至1 248 bp之间的序列一致.pMSCV/sCadherin5△转染的NIH3T3细胞表达和分泌sCadherin5△,sCadherin5△抑制HUVEC细胞体外增殖.结论:克隆、表达和分泌了具有生物活性的人sCadherin5△.
