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hPPARγ2文献资料
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hPPARγ2单克隆抗体的制备与鉴定
目的:制备鼠源抗hPPARγ2单克隆抗体,并对其特异性进行鉴定.方法:利用已建立的pMD18-T/hPPARγ2亚克隆扩增出hPPARγ2前1 017 bp cDNA.利用pET原核表达系统表达了含有hPPARγ2前339个氨基酸(C-Histag)融合蛋白,并进行了纯化.其次利用原核表达的重组hPPARγ2蛋白制备了特异性抗hPPARγ2单克隆抗体1B4、3H2、3H10、10D6和10D8.通过ELISA和Western blot及细胞免疫化学的方法对抗体进行了特异性鉴定.结果:成功制备了鼠抗hPPARγ2单克隆抗体,并证明这5株单抗均为hPPARγ2的特异性抗体.结论:制备的杂交瘤细胞株能稳定分泌高特异性的hPPARγ2抗体.这些系统的建立和鼠抗hPPARγ2单克隆抗体的制备为后续的针对hPPARγ2作用及机制研究提供了良好的工具.
