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RNAi沉默cdc2基因对人卵巢癌顺铂耐药细胞株增殖与凋亡的影响
目的 探讨利用RNAi沉默cdc2基因对人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP增殖、凋亡的影响,为卵巢癌顺铂耐药逆转提供一个可选择的靶点.方法 针对cdc2基因的DNA设计具有特异性的SiRNA,经脂质体转染A2780/DDP,采用RT-PCR和免疫印迹法检测转染组cdc2基因表达是否抑制.用MTT法测定A2780/DDP细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期改变.结果 构建cdc2-SiRNA表达载体能够有效抑制A2780/DDP中cdc2基因的表达,差异有统计学意义(P＜0.05).RNAi沉默cdc2基因可抑制A2780/DDP细胞增殖,促进细胞凋亡,G2 /M期细胞比例明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 通过RNAi抑制cdc2基因的表达,可抑制A2780/DDP细胞增殖,促进A2780/DDP细胞凋亡,为研究卵巢癌顺铂耐药逆转奠定一定基础.
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基础研究cdc2基因在多种人类肿瘤细胞中的表达及意义
目的 通过检测人表皮细胞Hacat和不同组织来源的6种肿瘤细胞的增殖能力以及cdc2基因在这些细胞中的表达情况,探讨cdc2基因与肿瘤发生、发展、增殖能力之间的关系.方法 体外培养人表皮细胞Hacat和不同组织来源的6种肿瘤细胞(宫颈癌细胞Caski、神经胶质瘤细胞U87、肝癌细胞Hepg2、膀胱癌细胞T24、骨肉瘤细胞MG63、肺癌细胞A549).采用逆转录聚合酶链式反应 (RT-PCR)法和免疫印迹(Western blot)法测定细胞中cdc2在mRNA和蛋白质水平的表达情况;采用四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞增殖速度.结果 cdc2基因在Hacat中表达较低,在Caski、U87、Hepg2、T24、MG63和A549中表达较高.MTT法显示:Hepg2、U87、T24、A549、MG63增殖能力较强,Caski次之,Hacat差.结论 cdc2基因可能参与了肿瘤的发生过程,并与肿瘤的增殖有关.
