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深圳地区人群粮油食品中黄曲霉毒素膳食暴露评估
目的 开展深圳地区人群主要摄入的粮食及其制品和食用油中黄曲霉毒素B1和总黄曲霉毒素的暴露评估.方法 免疫亲和层析超高效液相法测定样本中黄曲霉毒素.通过深圳地区市售粮油食品中黄曲霉毒素污染水平和人群膳食消费量估算人群黄曲霉毒素B1和总黄曲霉毒素暴露量.结果 深圳地区人群2~6岁组、7~14岁组、15 ~50岁组、>50岁组平均消费水平黄曲霉毒素B1的每日膳食暴露量分别为男性0.320、0.385、0.401、0.398 ng/kg BW);女性0.282、0.222、0.367和0.470 ng/kg BW).高消费水平各年龄组黄曲霉毒素B1暴露水平分别为男性83.4、203、106、112 ng/kg BW);女性78.4、167、113和103 ng/kg BW).深圳地区粮油食品平均消费水平黄曲霉毒素B1危险度各年龄组男性依次为0.012、0.015、0.016和0.叭6癌症例/10万人;高消费水平依次为3.0、8.2、4.1和4.4癌症例/10万人.平均消费水平黄曲霉毒素B1危险度各年龄组女性为0.010、0.009、0.014和0.018癌症例/10万人;高消费水平依次为2.9、6.7、4.4和4.0癌症例/10万人.结论 深圳地区人群中7 ~14岁组少年儿童组黄曲霉暴露风险较成人组高.大米和花生油是深圳地区人群主要的粮油食品黄曲霉膳食暴露来源.
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抗总黄曲霉毒素单克隆抗体的制备及特性
目的 研制能够与黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2有较好交叉反应的抗总黄曲霉毒素单克隆抗体.方法 利用B细胞杂交瘤技术,建立分泌抗总黄曲霉毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株.结果 建立了1株稳定分泌抗总黄曲霉毒素抗体的杂交瘤细胞株,命名为2G2.该细胞株所分泌的单克隆抗体Ig亚类为IgG1,参考工作浓度为1:1.6×106,亲和力常数为8×10-8 mol/L.该抗体与黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的交叉反应分别为100.0%、57.5%、104.0%和19.0%,与其他真菌毒素无交叉反应.结论 制备出能分泌具有高特异性和亲和力的抗总黄曲霉毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株.
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总黄曲霉毒素ELISA定量检测试剂盒研制
目的 研究并建立敏感、特异和快速的针对食品中总黄曲霉毒素的ELISA检测方法,形成具有我国自主知识产权的快速定量检测试剂盒.方法 在生产抗总黄曲霉毒素单克隆抗体基础上,利用间接竞争ELISA方法,研制出食品中总黄曲霉毒素快速检测试剂盒,并对试剂盒的各项技术参数进行测定.结果 该试剂盒对黄曲霉毒素B+G标准品的低检出浓度为0.26 ng/ml,标准曲线的线性范围为0.26~20.00 ng/ml,线性方程y=-0.4463x+0.3532(R2=0.9915);对黄曲霉毒素B+G50%的抑制浓度为2.08 ng/ml;试剂盒的条内变异系数为4.18%,条间变异系数为5.21%,抗体亲和力常数为1.52×10-10 mol/L;对玉米3个加标水平的平均回收率分别为98.63%,94.56%和1 12.05%;对花生的3个加标水平的平均回收率分别为88.66%,87.50%和85.60%.试剂盒37℃可放置96 h以上;试剂盒对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的交叉反应率分别为100%,57.5%,104%和19%,与其他真菌毒素无交叉反应.结论 研制出的ELIS试剂盒能定量检测食品中总黄曲霉毒素.