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氟对雄性大鼠下丘脑-垂体-性腺轴内分泌干扰作用的实验研究
目的 探讨氟对雄性大鼠下丘脑-垂体-性腺轴生殖内分泌干扰作用.方法 选用4～5周龄雄性Wister大鼠36只,体重60～70g.随机分为Ⅰ高氟组(水氟100mg/L)、Ⅱ低氟组(水氟30mg/l)、Ⅲ对照组(纯净水).8周后处死动物.做精子质量分析,并用放免法测定血清下丘脑、垂体、性腺三个层面生殖激素水平.结果 与对照组比较,高氟组动物体重、睾丸及附睾重量均明显下降(P＜0.05),低氟组动物体重、睾丸及附睾重量均明显升高(P＜0.05);高氟组、低氟组动物右侧睾丸、附睾脏器系数均呈现下降趋势,但差别无统计学意义(P＞0.05).高氟组和低氟组与对照组比较精子密度、精子活率明显下降(P＜0.05);高氟组亦明显低于低氟组(P＜0.05).与对照组比较,高氟组精子畸形率明显升高(P＜0.05);低氟组精子畸形率有上升趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).对畸形精子进行分析,发现三组动物精子畸形类型有所不同,高氟组体部及混合畸形比例明显升高(P＜0.05).畸形指数高氟组为1.56,低氟组为1.42.大鼠血清促性腺激素释放激素(GnRH)浓度均值高氟组、低氟组均明显高于对照组(P＜0.05);高氟组亦明显高于低氟组(P＜0.05).卵泡刺激素(FSH)浓度均值高氟组、低氟组均明显高于对照组(P＜0.05);高氟组亦明显高于低氟组(P＜0.05).间质细胞刺激素(ICSH)浓度均值高氟组、低氟组分别低于对照组,但差异无显著性(P＞0.05).ICSH/FSH比值高氟组、低氟组均明显低于对照组(P＜0.05);高氟组亦明显低于低氟组(P＜0.05).血清睾酮(T)均值高氟组明显低于对照组(P＜0.05);亦明显低于低氟组(P＜0.05).血清雌二醇(E2)高氟组、低氟组均高于对照组(P＜0.05);高氟组亦明显高于低氟组(P＜0.05).T/ICSH比值高氟组、低氟组均明显低于对熙组(P＜0.05);高氟组亦低于低氟组(P＜0.05).结论 氟对雄性大鼠生殖系统的影响作用部位可能不在下丘脑;氟可能影响垂体分泌ICSH功能;T/ICSH更能反映睾丸间质细胞功能的早期变化.氟能影响下丘脑-垂体-性腺轴各层面血清生殖激素水平,因而具有生殖内分泌干扰作用.
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P,P'-DDE对睾丸支持细胞雄激素结合蛋白表达的影响
[目的]研究雄激素结合蛋白在p,p'-DDE致雄性大鼠生殖内分泌干扰过程中的作用机制.[方法]对大鼠睾丸支持细胞离体原代培养4～5 d;设溶剂(DMSO)及阴性对照,以终浓度为30、50、80、100μmol/L的p,p'-DDE作用于支持细胞24h,计数200个细胞,计算支持细胞存活率;分别以浓度为10、30、50μmol/Lp,p'-DDE作用于支持细胞24h,运用一步法RT-PCR检测支持细胞内雄激素结合蛋白基因mRNA水平.[结果]p,p-DDE在50 μmol/L及以下浓度作用24 h后,支持细胞存活率＞90%,而80 μmol/L组仅45%;染毒24 h后,对照组及10、30、50 μmol/L的p,p-DDE组支持细胞内雄激素结合蛋白mRNA灰度比值分别为0.3140±0.102 0、0.392 0±0.094 9、0.583 7±0.122 1、0.649 0±0.171 8,随p,p'-DDE所给浓度的增高而逐渐升高,且30、50 μmol/L组与对照组差异存在显著性(P＜0.05),呈剂量依赖关系.[结论]p,p-DDE作用于睾丸支持细胞后,雄激素结合蛋白基因转录水平可明显升高,从而表达增强,促进雄激素结合蛋白的生成,代偿性地维持生精过程.
