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细胞接触抑制文献资料
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抗坏血酸作用下兔骨髓间充质干细胞外基质分泌与结构改变
背景:细胞外基质对干细胞的影响是目前组织工程学的研究热点,而关于自身细胞外基质的合成、分泌及对细胞的影响却少有研究报道.目的:体外培养兔骨髓间充质干细胞,观察抗坏血酸对其细胞外基质与整体结构改变的影响.方法:通过差速贴壁法分离获取兔骨髓间充质干细胞,流式细胞技术检测CD44、CD45、CD31的表达.将兔骨髓间充质干细胞用含抗坏血酸(20 mg/L)的培养基进行干预,观察细胞形态、大体结构、超微结构及组织学改变,RT-PCR检测细胞外基质相关基因的表达.结果与结论:①经流式细胞学分析,第2代骨髓间充质干细胞中95%以上的细胞表达CD44,而CD45与CD31的表达极低;②抗坏血酸干预后,骨髓间充质干细胞增殖良好,细胞间界限难以分辨,干预10-14 d后,形成了"膜片状"结构;③苏木精-伊红染色后可见细胞分层排列,Masson 染色后可见大量细胞外基质成分,透射电镜下可见胞内含大量内质网与"囊泡样"结构;④与未经抗坏血酸干预的对照组相比较,经抗坏血酸干预的实验组纤维连接蛋白的mRNA表达显著升高(P < 0.05),而Ⅰ型胶原的mRNA表达虽稍提高,但两组间差异无显著性意义;⑤结果表明,抗坏血酸促进了兔骨髓间充质干细胞的增殖转化、细胞外基质的合成分泌、膜片状结构的形成,在组织工程应用中具有巨大潜能.
