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深低温冻储同种异体气管移植并骨髓间充质干细胞移植后气管上皮细胞血管内皮生长因子的表达
背景:深低温冷冻后的组织可以保持其原有的活力和组织完整性,并能消减抗原性.目的:静脉移植骨髓间充质干细胞合并深低温处理供体气管后进行同种异体气管移植,观察骨髓间充质干细胞在促进上皮再生和再血管化后的作用.方法:用深低温冻储2 周和6 周的气管进行Wistar 大鼠同种异体气管移植后,用PKH-26 标记的3～5 代骨髓间充质干细胞经鼠尾静脉移植入受体内,等量的磷酸盐缓冲液注射作为实验对照.观察供体气管的组织学和血管内皮生长因子蛋白表达.结果和结论:骨髓间充质干细胞移植合并深低温冻储后的移植气管结构完整,软骨无变性坏死;深低温6 周的移植气管上皮再生情况优于2 周.骨髓间充质干细胞移植组的上皮细胞表达血管内皮生长因子水平高于磷酸盐缓冲液对照组.结果提示,骨髓间充质干细胞移植合并深低温冻储6 周后移植气管存活期好于深低温冻储2 周;骨髓间充质干细胞能够促进移植物周围新生血管的增加,从而促进气管损伤的修复.
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深低温冻储对气管移植物树突状细胞的影响
目的探讨深低温冻储对气管移植物树突状细胞的影响.方法将50段Wister 大鼠气管(4个环)随机分为新鲜对照组和深低温冻储组,通过流式细胞技术、免疫组化技术和透射电镜技术,观察树突状细胞冻储前后变化.结果①深低温冻储后气管组织制备的单细胞悬液OX-62FITC标记率和表达量下降,显著低于新鲜对照组(P＜0.000 1).②免疫组化染色结果显示,冻储后气管树突状细胞肿胀、树突远端淡染、细胞分布稀疏.③透射电镜观察,树突状细胞经冻储1个月后出现空泡变性、溶酶体变性、酶活性减弱.结论树突状细胞主要分布于气管上皮及混合腺内,冻储过程损伤气管移植物树突状细胞,造成树突状细胞数量减少和功能下降,这可能是气管移植物冻储后,免疫原性下降的一个重要原因.
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深低温冻储在大鼠同种异体气管移植中免疫抑制作用
目的探讨深低温冻储在同种异体气管移植中的作用.方法选择近交系Lewis大鼠自体气管移植(L-L组),及F344和Lewis行未冻储(F-L组)、冻储(CF-L组)同种异体气管移植,分别在术后2、7、30天观察各组移植段光镜下免疫排斥反应变化.结果①CF-L组在移植术后各时间点与F-L组相比较,炎细胞浸润程度及上皮下组织增殖相比显著降低(P＜0.05).②CF-L组PBMC内γ-IFN表达量在术后2、7、30天均明显低于F-L组(P＜0.01).③F-L组在移植术后2、7、30天,凋亡细胞计数均较L-L组和CF-L组高(P＞0.05).结论深低温冻储可能通过调节同种异体气管移植术后Th型细胞因子的变化和移植物细胞凋亡,从而抑制了免疫排斥反应.
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大鼠深低温冻储同种异体气管移植的实验研究
目的 探讨深低温冻储对大鼠同种异体移植气管上皮再生的影响.方法 用深低温冻储2周和6周的大鼠气管进行同种异体气管移植,以自体和异体新鲜气管作为对照,通过观察供体气管的组织学、上皮爬行和再生情况,评价深低温冻储不同时长对移植气管的存活和新生上皮再生的作用.结果 深低温冻储6周后实验组的移植气管复层上皮比自体气管移植组厚度明显变薄或成单层,软骨无变性坏死,未见有单核细胞浸润,长存活达35 d,而深低温冻储2周气管移植大鼠为10 d.结论 深低温冷冻后的组织可以保持其原有的活力和组织完整性,并能消减供体气管的抗原性.冻储6周的移植气管上皮再生和受体的存活率要优于冻储2周组.
