首页 > 文献资料
-
2型糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化过程中相关蛋白及转化生长因子β1的变化
目的:观察2型糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化过程中的标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白、角蛋白18及转化生长因子β1表达变化,分析糖尿病肾病时肾小管病变、肾间质纤维化可能的发生、发展机制.方法:实验于2002-10/2003-05在河北医科大学第二医院完成.纳入二级8周龄雌性SD大鼠40只.随机分为正常对照组和糖尿病组,各20只.通过高糖、高脂饮食加腹腔注射小剂量链脲佐菌素的方法,制作2型糖尿病大鼠模型.分别动态观察12,24周时对照组,糖尿病组大鼠糖尿病肾病时,肾脏的病理改变及功能变化,并同时应用免疫组化技术及流式细胞学技术检测肾小管上皮细胞转分化过程中的标志蛋白:α-平滑肌肌动蛋白、角蛋白18及转化生长因子β1在肾小管上皮细胞中的表达. 结果:糖尿病组共成模16只,血糖没有升高的大鼠未纳入结果分析,两组共纳入结果分析36只.①糖尿病组大鼠12周时光镜下可见部分肾小管轻度萎缩或管腔扩张,上皮细胞水肿,胞浆内可见小脂肪空泡,肾小管损伤指数增高;24周时上述变化程度加深,管腔内可见破碎脱落的细胞.24周电镜下可见线粒体部分水肿,嵴大部分消失,微绒毛显著减少,部分肾小管基底膜明显增厚,小管间可见大量胶原纤维.②免疫组化显示:糖尿病组大鼠肾小管上皮细胞胞浆中α-平滑肌肌动蛋白、转化生长因子β1表达增强,角蛋白18表达则下降,它们均随病程进展而加重.③流式测α-平滑肌肌动蛋白及转化生长因子β1表达与免疫组化结果一致,并且与三酰甘油、胆固醇、24 h尿白蛋白排泄率明显正相关,与肌酐清除率负相关.结论:在2型糖尿病肾病的发展过程中确实存在小管上皮-肌成纤维细胞转分化,而且转化生长因子β1是其重要的促进因子.小管上皮-肌成纤维细胞转分化与肾功能下降的程度相平行.
-
EMT相关蛋白CK、Vimentin、α-SMA在肺癌组织中的表达及意义
【目的】探讨肺腺癌组织中上皮‐间叶转换（EMT）相关蛋白的表达及意义。【方法】采用免疫组化法检测100例肺腺癌及40例癌旁正常肺组织中的细胞角蛋白（CK）、波形蛋白（Vimentin）、α‐平滑肌肌动蛋白（α‐SMA）的表达，并分析其临床意义。【结果】肺腺癌组织中CK、Vimentin、α‐SMA阳性表达率分别为51．0％、60．0％、59．0％，与癌旁正常组织中各蛋白的表达率（分别为72．5％、25．0％、27．5％）比较均有显著性差异（P＜0．05），CK、Vimentin、α‐SMA与分化程度相关，与年龄、性别、浸润深度、临床分期及远处转移不相关。【结论】CK与a‐SMA、Vimentin呈现负相关，分化程度降低，CK含量降低，α‐SMA、Vimentin呈现逐渐上升的趋势，提示肺癌恶变程度与EMT有关。
-
CD10、SMA和P63在乳腺肌上皮细胞中的表达差异及意义
目的 研究普通急性淋巴母细胞性白血病抗原(CD10)、平滑肌肌动蛋白(SMA)、P63在乳腺良恶性病变肌上皮细胞中的表达差异及其临床意义.方法 采用SP免疫组化方法 检测CD10、SMA、P63在68例乳腺良恶性病变(乳腺纤维腺瘤或纤维腺病、上皮非典型增生、原位癌和浸润癌)肌上皮细胞中的表达情况.结果 在乳腺增生病变(10例乳腺纤维腺瘤和纤维腺病及13例乳腺导管上皮轻、中及重度非典型增生病例)中,三种抗体均显示病变导管周围肌上皮层完整阳性,呈花环状结构,染色强度均为2+～3+;在15例乳腺导管原位癌病例中,显示肌上皮细胞层3+完整阳性的导管数/病变导管总数的结果 分别是:CD10抗体为92/384(23.96%)、SMA抗体为185/384(48.18%)、P63为80/384(20.83%).三种抗体在肌上皮细胞中表达的阳性率有差别(P<0.05).另外,SMA抗体染色有6/15(40%)病例显示所有导管肌上皮层2+/3+完整阳性,CD10和P63抗体各为4/15(26.7%)病例阳性.抗体表达阴性率分别为CD10:170/384(44.27%),SMA:74/384(19.27%)、P63:127/384(33.07%);在30例乳腺浸润癌(浸润性导管癌和浸润性小叶癌)中,三种抗体染色肌上皮细胞均显示阴性结果 .结论 CD10可成为继SMA,P63后又一个肌上皮细胞标记抗体,对判断乳腺疾病中肌上皮细胞存在与否提供依据.
-
激光显微切割技术在肾脏学研究中的应用
目的 探讨应甩激光显微切割技术(LCM)切割肾小球和肾小管.方法 应用LCM采集肾小球和肾小管,real-timePCR(实时PCR,real-time polymerase chain reaction)检测肾小球特异性基因nephrin在肾小球和肾小管的表达.并采用LCM技术采集肾小球,蛋白质免疫印迹法(Western-blotting)检测Actin基因在肾小球的表达.结果 Nephrin在肾小球的表达明显高于肾小管(P<0.05);Western-blotting能清晰地检测Actin基因在肾小球的表达.结论 应用LCM能快速、单一、完整地采集肾小球,其采集的样品质量符合real-time PCR和Western-blotting的要求.
关键词： 激光 显微切割/方法 膜糖蛋白类/生物合成 肌动蛋白类/生物合成 肾小球 肾小管 基因表达
