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延龄草诱导人结肠癌RKO细胞凋亡的作用机制研究
目的:探讨延龄草诱导结肠癌RKO细胞凋亡的作用机制.方法:以人结肠癌RKO细胞株为模型,通过MTT实验检测延龄草不同提取部位对RKO细胞的细胞毒性;以流式细胞术及光比色法检测延龄草乙酸乙酯部位对RKO细胞线粒体膜电位及Caspase9和Caspase3活性的影响.结果:延龄草乙酸乙酯部位(EE-TM)对RKO细胞增殖抑制作用显著(P＜0.01),干预24、48及72 h后的IC50值依次为52.64、22.56及18.39 μg/mL;EE-TM干预12h后可以导致RKO细胞线粒体膜电位下降(P＜0.01),干预24h及48 h后可以导致RKO细胞内Caspase9及Caspase3的活性增强(P＜0.01).结论:延龄草具有体外抗结肠癌活性,作用机制可能是通过线粒体通路介导细胞走向凋亡.
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CCK-8法与Alamar blue法对RKO细胞株增殖活力测试条件的对比分析
目的 以RKO细胞株为增殖活力测试的研究对象,比较CCK-8法与Alamar blue法在检测中波长、孵育时间、细胞密度等方面的差异性.方法 取体外培养对数生长期的RKO细胞株,分别比较两者在不同检测波长(380、430、480、530、580、630 nm)、不同孵育时间(1、2、3、4、5、6 h)、不同细胞密度(2×104、5×103、1.25×103 CUF·mL-1)下所测的光密度值(OD值),并比较两者在相同条件下同一标本重复检测时的平衡性.结果 ALamar blue法在不同细胞密度中的佳检测波长皆为580 nm,而CCK-8法的佳检测波长会随着细胞密度的变化而有所改变;1～6 h时,CCK-8法适合的孵育时间在1h以后Alamar blue为2h以后,且CCK-8法的灵敏度、平衡性都强于Alamar blue法.结论 CCK-8法在细胞增殖活力检测中的灵敏性、平衡性、快捷性等都略强于ALamar blue法.
