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丙烯酰胺致周围神经损伤中施万细胞钙通道途径的变化
目的 探讨施万细胞对丙烯酰胺诱导的周围神经损伤的影响机制.方法 (1)丙烯酰胺周围神经损伤/修复动物模型:免疫组化法检测大鼠神经元钙通道的特异位点(Synapsin-I)和施万细胞特异标志蛋白(S-100β)的变化.(2)细胞模型(原代施万细胞、背根神经节神经元单独培养+插入式培养皿介导混合培养):噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度丙烯酰胺对神经细胞的损伤作用并探讨施万细胞的整体保护效应;Fura-2/AM负栽荧光分光光度法测定单独和混合培养条件下神经细胞内Ca~(2+)浓度的变化.结果 丙烯酰胺染毒大鼠表现明显的周围神经毒性症状,恢复4~5周症状缓解.染毒末S-100β的阳性信号明显减弱提示施万细胞损伤,随恢复期延长,S-100β阳性信号渐增强提示施万细胞损伤后的恢复性变,synapsin-I与S-100β的变化趋势基本一致.丙烯酰胺作用后混合培养组神经细胞的存活率(51.08%±3.24%)大于单独培养组(42.08%±5.42%),混合培养的神经细胞内钙离子浓度显著低于单独培养组.结论 施万细胞影响丙烯酰胺诱导的周围神经损伤后的修复过程,钙通道是其发挥该有益作用的途径之一,synapsinI是其关键的作用位点之一.