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重庆市主城区长江和嘉陵江水中有机污染物对H4IIE细胞CYP1A1表达的诱导
目的 以重庆市主城区大溪沟(嘉陵江)和寸滩(长江)两个点为代表,研究2004～2005年度重庆市水源水中有机污染物对H4IIE细胞细胞色素P450 1A1(CYP1A1)表达的诱导.方法 固相萃取法萃取水中有机污染物,将萃取的有机污染物溶于二甲基亚砜(DMSO)中,对H4IIE细胞进行染毒,用逆转录.聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增CYP1A1 mRNA,比较不同水样诱导H4IIE细胞CYP1A1mRNA表达的差异,用电泳迁移率实验(EMSA)检测CYP1A1启动子的激活情况.结果 CYP1A1引物则可以将4个水样12h和24h处理组细胞的cDNA扩增出条带,48h处理组只有2005年1月寸滩样和2005年1月大溪沟样处理的细胞能扩增出CYP1A1基因的条带,所有样品的72h处理组细胞都没有CYP1A1基因的扩增;4个水样处理H4IIE细胞24h后,均可在细胞核内形成可与标记的XRE探针结合的芳烃受体-芳烃受体核转移蛋白(AHR-ARNT)二聚体,从而在AHR-ARNT二聚体蛋白处呈现发光条带.结论 各水样均可激活CYP1A1基因的启动子XRE,也均可诱导H4IIE细胞CYP1A1 mRNA的表迭,CYP1A1 mRNA的表达量随处理时间的差异有所不同.
关键词： 有机污染物 水污染 H4IIE细胞 细胞色素P4501A1 -
重庆市江水中有机污染物细胞毒性分析
目的 了解重庆市主城区嘉陵江和长江水中有机物污染状况,评价水中有机污染物对人群健康的影响.方法 固相萃取法萃取水中有机污染物,将萃取的有机污染物溶于二甲基亚砜(DMSO)中,对H4IIE细胞进行染毒,用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)检测水中有机污染物对H4IIE细胞增殖的抑制作用,并用荧光比色法检测水中有机污染物对H4IIE细胞7-乙氧基-3-异吩嗯唑酮·脱乙基酶(EROD)的诱导作用.结果 各水样处理H4IIE细胞后,H4IIE细胞的增殖随染毒时间和剂量的增加而呈下降趋势.48和72h处理组200和250倍浓缩的水样对细胞增殖有显著抑制作用(P＜0.05,与溶剂对照组比较);2,3,7,8-四氯二苯并-对-二恶英(TCDD)对EROD诱导的半数有效剂量(EC50)值为4.4 pg/ml,各水样相对于2,3,7,8-TCDD的毒性当量值分别为(2004.08)大溪沟:2.2×10-4 pg/L;(2004.08)寸滩:0.9×10-4 pg/L;(2005.01)大溪沟:13.3×10-4 pg/L;(2005.01)寸滩:3.7×10-4 pg/L.结论 污染物对H4IIE细胞的毒性呈现出时间和剂量依赖性;各水样均可诱导H4IIE细胞EROD活性;同一采样点中,枯水期水样毒性大于丰水期水样.
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小鼠脂联素重组腺相关病毒载体转染对H4IIE细胞葡萄糖生成的影响
成功构建小鼠脂联素重组腺相关病毒载体(rAAV-Ad).rAAV-Ad转染增强低浓度胰岛素对H4IIE细胞葡萄糖生成的抑制,提示对肝细胞葡萄糖生成的抑制是脂联素降低血糖的主要机制之一.
