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  • 丙烯酰胺对NB-1细胞钙稳态的影响

    作者:李冲;王茜;曹燕花;刘楠;关维俊;王学生;肖经纬;李斌;李忠生

    目的 研究丙烯酰胺(AM)对神经细胞钙稳态的影响,探讨AM致神经损伤的可能机制.方法 将人神经母细胞瘤(NB-1)细胞诱导分化成熟后,以不同浓度AM进行体外染毒,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测神经元损伤程度,并应用ATP酶检测试剂盒测定不同损伤程度的细胞Ca2 -ATP酶和Na+ -K+ -ATP酶活力的变化.以Fluo-3/AM为荧光指示剂,用激光共聚焦方法检测细胞内游离钙离子浓度的瞬时变化情况.结果 AM染毒组成熟NB-1细胞存活率有明显下降,提示AM对神经细胞有毒性作用;AM染毒组Ca2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活力值也均下降,差异具有统计学意义(P<0.05);AM作用于成熟NB-1细胞可立即引起细胞内钙离子浓度升高.结论 AM可能通过影响神经细胞钙稳态产生毒性作用.

  • db-cAMP对胚胎干细胞来源的神经细胞酪氨酸羟化酶mRNA水平的影响

    作者:周欣;王振宁;王太一

    目的体外诱导胚胎干细胞(ES细胞)定向分化为多巴胺能神经元并促进其长期存活和特性维持.方法以全反式维甲酸(ATRA)诱导ES细胞定向分化为神经细胞,培养液中加入双丁酰基环腺苷磷酸(db-cAMP)继续培养,RT-PCR方法检测酪氨酸羟化酶基因(TH基因)和survivin基因的mRNA水平变化.结果db-cAMP可上调ES细胞来源的神经细胞中TH基因的mRNA水平,在实验早期还可上调survivin基因的mRNA水平.结论db-cAMP可以促进ES细胞来源的多巴胺能神经元的存活和特性维持,抗凋亡可能是其作用机制之一.

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