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三氯乙烯致敏豚鼠皮肤及血清中IL-17的测定
目的 比较三氯乙烯(TCE)致敏豚鼠和未致敏豚鼠皮肤和血清中IL-17表达水平,探讨ICE药疹样皮炎新的发病机制.方法 将豚鼠随机分为空白对照组,溶剂(橄榄油)对照组,ICE处理组.根据豚鼠大值试验方法(Guinea Pig Maximization Test,GPMT)处理豚鼠.按照《化学品毒性鉴定技术规范》的评分标准对动物的皮肤反应进行评分,评分≥1的判为致敏.在末次激发后24h,72 h,1周和2周分四批采血和皮肤组织,用ELISA试剂盒测定血清中IL-17的含量；将皮肤组织制成蜡块,采用Elivison二步法免疫组织化学法检测其IL-17的表达情况.结果 根据皮肤反应评分判断致敏阳性,TCE处理组致敏率为70％.TCE处理组血清中IL-17的水平及皮肤组织免疫组化评分明显高于溶剂对照组,且差异有统计学意义(P＜0.05)；ICE处理组的不同时间段相比,IL-17的表达差异有统计学意义(P＜0.05)；在ICE处理组72h和I周两个时点,TCE致敏鼠IL-17的表达比相应的未致敏鼠高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TCE可以诱导豚鼠致敏,IL-17在豚鼠致敏的过程中有重要意义.
关键词： 三氯乙烯 酶联免疫标记 免疫组化技术 白细胞介素-17 (IL-17) 豚鼠 -
三氯乙烯致敏小鼠皮肤及血清中白细胞介素-6表达水平研究
目的 研究三氯乙烯(TCE)致敏小鼠皮肤和血清中细胞因子白细胞介素(IL)-6的表达水平,探讨TCE药疹样皮炎的可能发病机制.方法 无特定病原体级6～8周龄雌性BALB/c小鼠85只,随机分成空白对照组(5只)、溶剂对照组(5只)和TCE处理组(75只),TCE处理组于末次激发24 h后依据小鼠皮肤致敏情况,分为致敏1、2、3、7、14 d亚组和未致敏1、2、3、7、14 d亚组,建立小鼠致敏模型;分别在末次激发后1、2、3、7、14 d采血,并取皮肤组织.采用酶联免疫吸附测定法和免疫组化法分别测定血清和皮肤中IL-6表达结果.数据分析采用2x5析因设计方差分析,2个因素分别为TCE致敏效应(包括TCE致敏和未致敏2种效应)和致敏时间(包括1、2、3、7和14 d5个时点).结果 小鼠致敏率为36.0％.致敏1、2、3、7d亚组血清中IL-6水平均高于空白对照组和溶剂对照组(P＜0.01).TCE致敏效应和致敏时间存在交互效应(P＜0.01);致敏3d亚组血清中IL-6表达水平分别高于致敏1、2、7和14 d亚组[(86.55±2.73)vs(55.34±3.48)、(86.55 ±2.73)vs(68.63 ±3.69)、(86.55 ±2.73) vs(58.13 ±3.56)、(86.55 ±2.73) vs (49.73 ±3.52),P＜0.01];未致敏3d亚组血清中IL-6表达水平分别高于未致敏1、2、7及14 d亚组[(67.58 ±1.78)vs(49.04 ±3.24)、(67.58±1.78) vs (58.78±3.39)、(67.58±1.78) vs(49.46±4.33)、(67.58 ±1.78) vs (45.73 ±3.44),P＜0.01].致敏3d亚组皮肤中IL-6表达评分高于溶剂对照组[(2.60±0.55) vs (0.95 ±0.67),P＜0.01];皮肤中IL-6表达评分在TCE致敏效应与TCE处理时间的交互效应有统计学意义(P＜0.05).致敏3d亚组皮肤中IL-6表达评分分别高于致敏1及14 d亚组[(2.60±0.55) vs(1.70±0.55)、(2.60 ±0.55) vs(1.17±0.75),P＜0.05,P＜0.01];未致敏1及3d亚组皮肤中IL-6表达评分分别高于未致敏14 d亚组[(1.50±0.53) vs (0.79±0.73)、(1.50±0.53) vs (0.79±0.73),P＜0.01].结论 细胞因子IL-6可能在TCE皮肤致敏反应中具有重要意义.
