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GⅡ-4型诺如病毒ORF2基因克隆及序列分析
目的 获得中国流行株GⅡ-4型诺如病毒(NoV)ORF2基因序列,为进一步研究诊断、疫苗提供基础依据.方法 从GⅡ-4型NoV粪便中提取病毒RNA,经逆转录后PCR并克隆到simple PMD18-T载体获得完整开放读码柜架(ORF2)阅读框序列.结果 获得了正确序列的基因Ⅱ-4,亚型(genogroup Ⅱ-4,GⅡ-4)NOV ORF2基因序列,经软件分析,3株NOV ORF2序列编码的氨基酸大小约为54KD,与VA387(GⅡ-4)氨基酸同源性为92%～93%.ORF2编码的氨基酸序列存在3个相对保守序列.结论 获得GⅡ-4型NoV ORF2基因序列,为进一步表达病毒衣壳蛋白及Nov感染的诊断试剂及防治疫苗药物研制提供基础依据.
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GⅡ-4型诺如病毒体外结合唾液HBGAs受体的检测与分析
目的 建立诺如病毒(Norovirus, NoV)结合唾液HBGAs受体的实验方法 、验证2株GⅡ-4型NoV毒株与我国人群唾液HBGAs的结合方式.方法 收集健康志愿者唾液标本,采用凝集抑制实验法检测唾液中HBGAs血型物质,用EIA法检测NoV VLPs、阳性毒株与HBGAs的结合情况.结果 63份标本检出O型21例(占33.3%),B型14例(占22.2%),A型和非分泌型各13例(分别占20.6%),AB型2例(占3.2%).rVA387、2株GⅡ-4型毒株均能结合分泌型,与非分泌型唾液不反应.结论 本研究成功建立了NoV结合唾液HBGAs受体的实验方法 ,通过NoV毒株与HBGAs相互作用的研究有助于了解NoV的宿主适应特性及病毒进化和流行规律;同时为筛选防治我国人群的抗NoV药物提供技术平台.
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广东省某农村学校因生活用井水被GⅡ-4型诺如病毒污染引起胃肠炎暴发调查
目的 通过对1起农村学校诺如病毒感染引起的胃肠炎暴发调查,分析感染传播途径,为农村及集体单位饮用水管理提供依据.方法 采用主动搜索、问卷调查等方法对2009年9月广东省某农村中学急性胃肠炎暴发进行调查,采用描述性流行病学方法进行分析；采集病例肛拭子、井水及自来水用RT-PCR方法进行诺如病毒核酸检测和测序分析.结果 广东省某农村学校胃肠炎暴发的指示病例发病时间为2009年9月4日,疫情历时8d,共搜索到病例108例,罹患率1.8％ (108/5 854);病例以学生为主(占85.2％,92/108),另有15名教师及1名校门卫发病；临床症状主要表现为腹泻(99.1％,107/108)、腹痛(82.4％,89/108)和呕吐(72.2％,78/108),82名病例病程中位数2d(P25～P75为2～3d),无住院病例；病例在班级及宿舍分布未见明显空间聚集性；学生是否在学生食堂就餐罹患率分别为1.7％(90/5 418)、3.0％ (2/66),教师是否在教师食堂就餐罹患率分别为7.7％ (11/143)、3.5％ (5/142),学生及教师有无在学校就餐罹患率差异无统计学意义(x2=0.1、1.6,P＞0.05)；生活使用井水人群罹患率(2.0％,47/2 324)是使用自来水人群罹患率(1.0％,14/1 367)的2倍(RR=2.0,95％CI 1.1～3.6).采集9份现症病例肛拭子标本进行诺如病毒核酸RT-PCR检测,6份标本呈阳性；采集消毒前井水及井水末精水各1份和自来水1份,其中2份井水诺如病毒核酸检测均呈阳性,自来水诺如病毒核酸检测为阴性.选取3份肛拭子阳性标本和1份井水进行序列测定,4份标本核酸相似性为100％,经与GenBank进行BLAST比较属于诺如病毒GⅡ-4群.结论 广东省某农村学校发生1起GⅡ-4型诺如病毒感染的胃肠炎暴发,主要传播途径是因生活使用的井水受到诺如病毒污染,加强农村及集体单位饮用水管理是当前各级政府及相关部门重中之重工作.
