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益肾胶囊对糖尿病肾病肾组织SOCS3及Col-Ⅰ、Ⅳ表达的影响
目的:观察益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织SOCS-3、Ⅰ、Ⅳ型胶原表达的影响,探讨益肾胶囊延缓糖尿病肾病肾纤维化的机制.方法:36只健康雄性Wistar大鼠,通过尾静脉单次注射链脲佐菌素(60 mg/kg),制造糖尿病大鼠模型,后随机分为DN模型组、益肾胶囊组、氯沙坦钾组,各12只,益肾胶囊组每只灌胃益肾胶囊(625mg·kg-1 ·d-1),氯沙坦组每只灌胃氯沙坦钾片(30mg·kg-1 ·d-1),坚取12只健康大鼠作为正常对照组.正常对照组及模型组每日给予等量蒸馏水.12周后测定各组大鼠体重、24h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮；采用HE、Masson和PAS染色观察肾组织病理变化,采用免疫组化法检测肾组织中SOCS-3、Ⅰ、Ⅳ型胶原表达水平.结果:实验12周末,与正常组比较,模型组大鼠病理改变较明显,24 h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮明显上升(P＜0.05),肾组织中SOCS-3、Ⅰ、Ⅳ型胶原表达明显上调.与模型组比较,治疗组大鼠病理改变减轻,24h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮水平明显降低(P＜0.05)；肾组织中SOCS-3表达显著上调,Ⅰ、Ⅳ型胶原表达显著抑制(P＜0.05).结论:益肾胶囊可能通过上调SOCS-3表达,抑制Ⅰ、Ⅳ型胶原的表达,从而减轻了DN大鼠肾小球硬化和肾小管间质纤维化的程度,延缓糖尿病肾病的进展.
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TGFβ1对转染Smad4/Smad7基因的大鼠系膜细胞系膜细胞Ⅰ、Ⅳ型胶原表达的影响
目的探讨Smad4/Smad7信号蛋白在转化生长因子β1(TGFβ1)作用下对大鼠系膜细胞(MsC)Ⅰ、Ⅳ型胶原表达的影响.方法经脂质体介导分别将Smad4/Smad7基因瞬时转染体外培养的大鼠MsC,并用免疫荧光、RT-PCR和Western blot法检测其转染成功与否;再用Western blot法分别观察转基因MsC及其在TGFβ1作用下,其Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白表达的改变.结果与转染空载体的MsC相比较,转染Smad4基因的MsC,其Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白表达分别增强1.2和1.8倍,经TGFβ1作用后升高1.8和3.3倍(P<0.01);而转染Smad7基因的MsC,其Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白表达分别下降1.4和1.9倍,经TGFβ1作用后则降低1.7和2.4倍(P<0.01).结论TGFβ1/Smad信号通路可从正反两方面调节MsC Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白的合成而影响肾小球硬化的进展.
