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α-klotho蛋白拮抗瘦素损伤小鼠足细胞的实验研究
目的:探讨瘦素对小鼠足细胞的损伤效应及α-klotho蛋白拮抗这一效应的可能.方法:小鼠足细胞分为三组,分别为空白对照组,瘦素刺激组(瘦素15 ng/ml),α-klotho干预组(α-klotho 0.1μg/ml及瘦素15 ng/ml).mRNA检测采用实时定量PCR方法,蛋白质检测采用免疫印迹法.结果:瘦素能显著抑制足细胞标志蛋白podocin,nephrin,podocalyxin,podoplanin表达,与对照组比较,蛋白质表达的抑制率分别为24％、25％、25％和23％;mRNA表达的抑制率分别为42％、27％、39％、24％,P均＜0.05.α-klotho干预后,上述足细胞标志蛋白均被上调,与瘦素组比较,蛋白质表达分别上调1.36、1.25、1.29和1.22倍;mRNA表达分别上调1.77、1.48、1.66、1.26倍,P均＜0.05.此外,瘦素能显著活化Wnt/β-catenin信号通路,与对照组比较,Wnt2b、Wnt5a、Wnt6、Wnt7a的mRNA表达分别上调2.06、1.72、2.14、1.59倍,P＜0.05;β-catenin的蛋白磷酸化水平抑制率为26％,P＜0.05.α-klotho干预后,上述信号通路分子均被抑制,与瘦素组比较,Wnt2b、Wnt5a、Wnt6、Wnt7a的mRNA表达抑制率分别为42％、28％、43％、30％,P均＜0.05,磷酸化的β-catenin上调1.27倍,P＜0.05.结论:瘦素可能通过Wnt/β-catenin信号通路损伤足细胞,而α-klotho可逆转足细胞损伤,其机制可能与抑制瘦素的作用有关.
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醛固酮受体拮抗剂对肥胖相关肾小球病的影响
目的：本研究拟应用醛固酮受体拮抗剂干预肥胖致肾损伤小鼠模型，以期初步探讨醛固酮在肥胖相关性肾小球病（obesity?related glomerulonephropathy, ORG）中的作用。方法雄性C57BL/6J小鼠分为：对照组（10只），予10%脂肪含量普通饲料喂养；模型组（10只）和干预组（12只），予60%高脂饲料喂养。8周后，对照组和模型组予60%丙二醇10 ml·kg-1·d-1皮下注射，干预组予螺内酯20 mg·kg-1·d-1皮下注射。检测理化指标及肾组织病理，实时定量PCR及Western印迹检测足细胞标志蛋白的mRNA和蛋白变化。结果与对照组相比，12周末模型组小鼠体质量、肾质量、Lee氏指数、脂肪指数、血三酰甘油、血胆固醇、肌酐清除率、12 h尿蛋白量均明显上升（P＜0.05）；肾小球平均直径及肾小管损伤面积及足突宽度均明显增大（P＜0.05）；肾组织nephrin、podocin、podoplanin、podocalyxin mRNA及蛋白相对表达量下调（P＜0.05）。螺内酯干预后，上述指标均改善。结论醛固酮可损伤足细胞，参与ORG的发生，而抗醛固酮干预可改善上述过程，故为应用醛固酮受体拮抗剂治疗ORG提供了初步实验依据。
