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iTRAQ实验方法文献资料
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基于尿液蛋白质谱技术评估系膜增生性肾炎患者小管间质纤维化程度的临床研究
目的:观察经肾活检证实病理表现为弥漫系膜增生性肾炎的原发性肾病综合征患者,分析比较肾小管间质纤维化不同病变程度下尿液蛋白质谱的差异表达,筛选用于评价原发性肾病综合征肾小管间质损伤的早期生物标志物,为早期诊断和治疗肾间质纤维化提供新的思路.方法:将12例经肾活检病理诊断为弥漫系膜增生性肾炎的原发性肾病综合征患者,根据肾小管间质损伤程度依次划分为正常组、轻型组、中型组、重型组各3例,采用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)的方法检测各组尿液蛋白质谱的表达,继而采用免疫印迹法验证差异表达蛋白,分析相关差异性蛋白及蛋白表达的情况.结果:与正常组相比,小管间质纤维化轻、中、重组患者尿液的α1-抗胰蛋白酶、抗胰凝乳蛋白酶、微管蛋白酪氨酸连接酶表达明显升高(P＜0.01),且在不同组别之间差异也存在统计学意义(P＜0.01);补体C4a蛋白亚型、血清淀粉样蛋白A4、免疫球蛋白ε重链可变区等的尿液蛋白质表达在轻、中、重3组中差异有统计学意义(P＜0.01).结论:病理诊断为弥漫系膜增生性肾炎的原发性肾病综合征患者,尿液蛋白质谱在不同肾小管间质损伤程度间差异存在统计学意义,这些差异蛋白可以作为判断肾间质纤维化程度的新的生物学标记物,以期将来以尿液蛋白质组学分析替代有创的肾活检穿刺术,广泛地应用于临床实践.
