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3种化学物对血脑屏障通透性影响的体内、外实验对比研究
目的 观察分析乙酸铅、硫酸铝和甲醛3种化学物对血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性的作用影响.方法 利用血脑屏障模型(blood-brain barrier model,BBBM)进行3种化学物通透性试验,计算通透系数(Permeability Coefficient,Pe)用以反映血脑屏障通透性变化情况;伊文氏蓝比色法测定3种化学物对Wistar试验大鼠血脑屏障通透性作用影响.对体内、外测试结果一致性进行比较分析.结果 求得乙酸铅、硫酸铝和甲醛3种化学物Pe值分别为(2.38±0.54) ×10-3、(2.07±0.33)×10-3和(1.11 ±0.28) ×10-3 cm/min,其中乙酸铅和硫酸铝组Pe值与对照组[(1.06±0.17)×10-3 cm/min]比较,差异具有统计学意义(P＜0.01);动物试验结果显示,乙酸铅、硫酸铝和甲醛对试验大鼠大脑皮质血脑屏障通透性影响增高和对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 乙酸铅和硫酸铝两种化学物体内外均能对血脑屏障通透性产生显著影响.甲醛在体内可对血脑屏障通透性产生显著影响.甲醛在体外对血脑屏障通透性产生影响有待进一步证实.
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不同血脑屏障模型的建立及其功能特点
目的 比较不同类型体外血脑屏障模型(blood brain barrier model,BBBM)的建立及其屏障功能特点,为构建血脑屏障(BBB)毒性筛检模型提供选择依据.方法 以Wistar乳鼠脑毛细血管内皮细胞(brain capillary endothelial cells,BCECs)和星型胶质细胞(astrocytes,As)共培养构建BBBM;以渗漏试验、跨内皮细胞阻抗(transendothelial electrical resistance,TEER)测量和荧光黄(lucifer yellow,LY)通透性试验评判模型的屏障功能.结果 建立分别与12孔和24孔板相匹配的各4种BBBM:单细胞模型、接触模型、非接触模型和间接模型.镜下细胞融合完整的模型,渗漏试验结果呈阳性；各模型TEER于细胞融合完整后的2～4d到达峰值.其中以接触模型和非接触模型的TEER为突出,12孔、24孔接触模型TEER值分别为(241±4.5)、(297±5.6)Ω/cm2;12孔、24孔非接触模型TEER值分别为(233±5.6)、(273±4.6)Ω/cm2.4种模型中,12孔接触模型和非接触模型具有较低的通透系数(permeability coefficient,Pe),其值分别是(0.92±0.07)×10-3cm/min和(1.06±0.05)×10-3cm/min.结论 12孔BBB非接触模型的建立周期短、屏障特征明显,且易于实施通透性测试操作,可作为构建BBB毒性筛检模型的优先选择.
