萝卜硫素调控磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路诱导胃癌HGC27细胞凋亡
摘要： 目的 研究萝卜硫素对胃癌HGC27细胞凋亡的影响,探讨其作用机制.方法 培养HGC27细胞,分别以不同浓度的萝卜硫素干预,检测萝卜硫素对HGC27细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测萝卜硫素对 HGC27 细胞凋亡的影响;采用 WB 法检测萝卜硫素诱导胃癌 HGC27 细胞中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3的表达及磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B, Akt)信号通路中PI3K、Akt及p-Akt蛋白的表达;WB检测抑制剂LY294002、萝卜硫素单独及联合诱导 HGC27 细胞后,PI3K、Akt 及 p-Akt 蛋白表达变化.结果 萝卜硫素呈时间浓度依赖性抑制HGC27细胞的增殖.与对照组比较,10、20、40 μg/ml萝卜硫素组细胞凋亡率[(10.29±1.57)%、(23.68±1.69)%、(35.29±2.38)%比(2.52±0.74)%]增加(P＜0.05),Bax[(18.92±2.18)、(34.06±5.06)、(44.08±5.69)比(12.51±2.15)]、caspase-3[(29.37±3.06)、(49.24±6.08)、(81.55±7.95)比(18.16±2.35)]表达升高(P＜0.05) , Bcl-2[(56.39±5.27) 、(33.06±4.26)、 (25.61±4.01)比(78.25±7.26)] 、 PI3K[(51.06±5.27) 、(42.06±5.21)、(23.08±4.51)比(79.07±8.12)]、p-Akt/Akt[(58.62±5.34)、(35.24±4.06)、(14.52±2.56)比(82.64±8.25)]蛋白表达降低(P＜0.05);与对照组比较,40 μg/ml萝卜硫素组、LY294002组、LY294002+萝卜硫素组细胞中 PI3K[(56.41±5.36)、(34.37±4.52)、(23.11±3.05)比(81.24±7.16)]、p-Akt/Akt [(49.52±5.84)、(31.06±4.09)、(21.05±2.28)比(77.52±7.06)]蛋白表达降低(P＜0.05).结论 萝卜硫素可抑制胃癌HGC27细胞增殖、促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路活化有关.
