围绝经期女性Thl/Th2平衡与内皮功能损伤的关系研究

　　围绝经期女性Thl/Th2平衡与内皮功能损伤的关系研究

　　郝宇呜1，张颖佳2，徐丽华1，李际春3，张宁梅3，郎淑慧3 1.银川市中医医院妇科，宁夏银川750001;2.首都医科大学附属北京安贞医院妇科，北京100029：3.宁夏医科大学附属医院，宁夏银川750001

　　摘要：目的研究围绝经期女性辅助型T细胞l( Thl)/辅助型T细胞2(Th2)平衡与内皮功能损伤的关系，为临床治疗提供数据支持。方法选择2015年6月- 2017年1月在北京安贞医院诊治的围绝经期女性82例及绝经期女性80例作为研究对象，分别纳入围绝经组和绝经组，另选取同期在医院体检的女性健康志愿者80例作为对照组。对比3组女性外周血Thl和Th2细胞绝对值及细胞因子水平、单个核细胞内共刺激分子mRNA表达水平、血清内皮损伤有关标志物水平，分析围绝经期女性Thl/Th2平衡与内皮功能损伤的相关性。结果3组女性外周血Thl和Th2细胞绝对值及细胞因子水平、单个核细胞内共刺激分子mRNA表达水平、血清内皮损伤有关标志物水平比较，差异均有统计学意义(均P Ll和ET-1均呈负相关，与NO呈正相关。结论 围绝经期女性的Thl/Th2平衡与其内皮功能损伤有紧密联系，且细胞因子也在其中发挥了较大作用，值得临床重视。

　　关键词：围绝经期女性;Thl/Th2平衡;内皮功能损伤

　　中国图书分类号：R173文献标识码：A文章编号：.10014411(2018)13-3026-04;doi:10. 7620/zgfybj.j.issn. 1001-4411. 2018.13.50

　　在围绝经期及绝经后，女性卵巢功能逐渐下降，且伴随雌激素分泌量减少等症状。研究¨。证实：女性身体多个组织和器官存在雌激素受体，并且当雌激素水平下降时，会发生相应的退行性改变及代谢变化，常导致心血管系统丧失了机体雌激素的保护作用，使心血管类疾病发生率上升。因此，临床研究总结：围绝经期及绝经后女性为心血管类疾病的高危人群，同时绝经被公认为是增大心脑血管类疾病发生率的一项重要危险因素。目前，有关雌激素分泌量下降和心血管类疾病发生率上升二者之间的关系目前尚不清楚，仍需要深入研究探讨。已知心血管疾病发病和炎症反应密切相关，并且辅助型T细胞1( Thl)及辅助型T细胞2(Th2)亚群功能及Thl/Th2平衡情况与炎症反应甚至心血管疾病发病相关。因此，研究围绝经期女性Thl/Th2平衡情况及其对内皮功能的影响是当前研究的重点。本文通过研究分析围绝经期女性Thl/Th2平衡与内皮功能损伤的关系，旨在为临床治疗提供数据支持。现报道如下。

　　1 资料与方法

　　1.1 临床资料选择2015年6月-2017年1月在北京安贞医院诊治的围绝经期女性82例及绝经期女性80例作为研究对象，分别纳入围绝经组和绝经组，其中围绝经组女性年龄41~50岁，平均年龄(45. 18 +1. 27)岁。绝经组女性年龄45~55岁，平均年龄(49. 23+1.14)岁。入选标准：①围绝经期女性的月经不规律或停经期限在1年内，而绝经期女性的停经期限超过1年;②年龄>40岁。排除标准：①无严重的内科合并症;②在近期内无激素药物替代治疗的情况;③有血液类疾病。另选取同期在医院体检的女性健康志愿者80例作为对照组，年龄20~40岁，平均年龄( 31. 48+2. 07)岁。本研究已经医院医学伦理委员会审核批准，且研究对象及其家属均知情同意并签署知情同意书。

　　1.2研究方法在实施激素替代治疗前，分别采集围绝经组及绝经组女性外周血约6 ml，对照组女性则在健康体检时抽取其外周血约6 ml，将3组女性的外周血均分成两份，其中一份放在室温下静置后对血清进行离心分离，通过ELISA法及配套试剂盒(深圳晶美公司和美国R&D公司)检测干扰素-1(IFN-7)、白细胞介素一2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)及白细胞介素-10(11-10)、人内皮素一1(ET-1)和一氧化氮( NO)水平，并应用流式细胞仪检测Thl和Th2细胞计数值;另一份添加淋巴细胞的分离液后进行离心(离心半径12 cm，离心速度3 000 r/min，离心时间15 min)，再吸取中间悬浮存在的单个核细胞，而后提取RNA，通过荧光定量PCR试剂盒(武汉博士德公司)依次检测CD28、CTLA -4、PD -1及PD - Ll有关mRNA表达量，操作时需严格遵守说明书步骤进行。

　　1.3观察指标 比较3组女性外周血Thl和Th2细胞绝对值及细胞因子水平、单个核细胞内共刺激分子mRNA表达水平、血清内皮损伤有关标志物水平，分析围绝经期女性Thl/Th2平衡与内皮功能损伤的相关性。

　　1.4 统计学分析 本研究所得数据均采用SPSS21.O版统计学软件进行统计处理。计数资料以百分率(%)的形式表示，数据比较采用疋2检验;计量资料以(x+s)的形式表示，数据比较采用f检验。

　　2结果

　　2.1 3组女性外周血Thl和Th2细胞绝对值及细胞因子水平比较3组女性外周血Thl和Th2细胞绝对值及细胞因子水平比较，差异均有统计学意义(均P

　　2.2 3组女性外周血单个核细胞内共刺激分子mR-NA表达水平比较3组女性外周血单个核细胞内共刺激分子mRNA表达水平比较，差异均有统计学意义(均P

　　2.3 3组女性血清内皮损伤有关标志物水平比较3组女性血清内皮损伤有关标志物水平比较，差异均有统计学意义(均P

　　2.4 围绝经期女性Thl/Th2平衡与内皮功能损伤的相关性分析 Spearman分析结果显示：围绝经期女性的Thl细胞绝对值、INF-y及IL-2与CD28、CT-LA-4、PD-1、PD -Ll和ET-1均呈正相关，与NO呈负相关;Th2细胞绝对值、IL-4及IL-10与CD28、CTLA-4、PD -1、PD -Ll和ET-1均呈负相关，与NO呈正相关。见表4。

　　表3 3组女性血清内皮损伤有关标志物水平比较(i±s)

　　表4 围绝经期女性Thl/Th2平衡与内皮功能损伤的相关性分析

　　3讨论

　　围绝经期女性机体多个系统及器官均发生相应变化，进而表现出相应围绝经期症状、卵巢功能衰退及激素分泌水平降低等，而此类变化不但会引起早期血管舒缩系列症状，如潮热、出汗等，重要的是其还会增大患心脑血管类疾病的风险。临床研究认为，主要和围绝经期女性失去了雌激素对血管的保护作用有关。多项报道证实：炎症反应主要通过损伤血管内皮功能的方式来增加心血管类疾病的发生率，因此内皮功能保持正常是维护血管内膜完整的关键。当内皮功能受损时，则会加大血管内皮遭受破坏的风险，进而加剧炎症细胞于局部位置聚集，并促使泡沫细胞及脂纹沉淀，引发动脉粥样斑块产生和扩大心血管类疾病的发病风险。本研究针对围绝经期女性Thl/Th2平衡情况，以及Thl/Th2平衡与内皮功能损伤的关系进行深入探讨，总结相关结论，旨在为其他医疗工作者提供可靠依据。

　　本研究发现：绝经组及围绝经组的Thl细胞绝对值和IFN一^y及IL-2水平均明显高于对照组，且绝经组较围绝经组明显更高，而Th2细胞绝对值和IL-4及IL-10水平均明显低于对照组，且绝经组较围绝经组明显更低，差异均有统计学意义(均P <0. 05)，符合李春等学者一。叫的报道结果，提示围绝经期女性的Thl细胞数目及Thl细胞因子的分泌均增多，主要可能与女性体内雌激素水平降低有关。CD4+T淋巴细胞为一类辅助性T细胞，主要参与调解机体免疫应答及免疫反应等活动，而Thl和Th2则为其两个重要亚群。CD4+T细胞通过分化作用分化出的Thl和Th2功能各异，并且Thl和Th2可合成及分泌出不同种类的细胞因子。其中，Thl细胞分泌的主要为IFN-一y及IL-2等促炎因子，作用在于对细胞免疫和炎症反应等进行介导;而Th2细胞则主要分泌IL-4及IL-10等抑炎因子，可对Thl.细胞自身分化作用和其介导的炎症活动产生抑制作用，并且还可以激发体液免疫应答H1。本研究结果也充分证实：随着围绝经期女性雌激素分泌量下降，自身Thl类细胞因子大量分泌，水平显著上升，而Th2类细胞因子分泌则受到抑制，水平下降。同时，本研究发现：绝经组及围绝经组女性CD28、CTLA-4、PD-1和PD-L1 mRNA表达水平均分别明显高于对照组，且绝经组较围绝经组明显更高，差异均有统计学意义(均P PD-1及PD -Ll则属于Treg细胞表层的负性共刺激分子。因此，上述指标均出现了明显的变化。本研究还发现：绝经组及围绝经组女性ET-1水平均分别明显高于对照组，且绝经组较围绝经组明显更高，而NO水平均分别低于对照组，且绝经组较围绝经组明显更低，差异均有统计学意义(均P 绝经期女性的Thl/Th2平衡可能与其内皮功能损伤联系紧密，而细胞因子也参与此过程，因此各项指标之间均有相关性。费晓红等学者17-181的报道中也有类似的结论可加以佐证。

　　综上所述，围绝经期女性的Thl/Th2平衡与其内皮功能损伤具有紧密联系，且细胞因子也在其中发挥了较大作用，值得临床重视。