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时差监测培养系统在人未成熟卵母细胞体外成熟及其授精时机中的应用
目的 观察时差监测培养系统在人未成熟卵母细胞体外成熟(IVM)中的应用,并探讨核成熟后佳的授精时机. 方法 收集我生殖中心促排卵周期中捐赠用于科研的240枚GV期卵母细胞,应用时差监测培养系统联合IVM技术,观察卵母细胞核成熟的动力学参数,包括GV破裂时间、第一极体排出时间、MⅠ持续和MⅡ静止的时间段.经过培养,对其中160枚卵母细胞根据第一极体排出后不同ICSI授精时间分为3组:＜3 h组、3～6h组和＞6 h组,比较各组的受精情况及胚胎发育情况. 结果 240枚GV期卵母细胞体外成熟率为73.3％,平均GV破裂时间为实施IVM后的(7.0±0.3)h,MI持续平均时间为(14.9±0.2)h,第一极体排出平均时间为(22.7±0.5)h.不同授精时间3组的正常受精率、卵裂率和可利用胚胎率比较均无显著性差异(P＞0.05). 结论 时差监测培养系统为未成熟卵母细胞IVM培养系统优化提供了新思路;第一极体排出后的3～6 h实时ICSI可用胚胎率有增高的趋势,但其具体影响及佳授精时间仍有待进一步研究探讨.
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小鼠GV期卵母细胞的提取及其核质比分析
目的:提取小鼠GV(germinal vesicle,GV)期卵母细胞并分析其核质比.方法:用挤压法从卵巢中分离获得GV期卵母细胞,放入DEPC-NS液体快速清除颗粒细胞,获得GV期卵母细胞裸卵,并计算其核质比.结果:用挤压法分离获得的GV期卵母细胞有一完整球形核,核膜明显,含有单个折光的核仁,胞浆中心稍变黑并呈颗粒状,共51枚,测得其卵径为(40.940±3.341)μm,核径为(15.020±2.236)μm,其核质比为0.054±0.019.结论:用挤压法加DEPC-NS液体可快速破坏颗粒细胞之间的连接,便于迅速获得GV期卵母细胞裸卵;小鼠GV期卵母细胞的核质比为0.054±0.019,与其它物种同时相核质比在相同范围内,提示核质比是卵母细胞发育成熟的重要指标.
