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黄芪多糖诱导的树突状细胞疫苗对S180荷瘤小鼠Th1/Th2类细胞因子的影响
目的：探讨黄芪多糖诱导成熟的树突状细胞（DC）肿瘤疫苗对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及作用机制。方法体外培养小鼠骨髓来源的DC，加入黄芪多糖诱导成熟，以S180肿瘤抗原致敏获得DC肿瘤疫苗。建立S180荷瘤小鼠模型，分为模型组、环磷酰胺组、黄芪多糖组、细胞因子组，在荷瘤第5天和第10天分别给予相应治疗。荷瘤第12天摘取肿瘤组织、胸腺、脾脏称质量，计算抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数；ELISA法检测小鼠血清白细胞介素（IL）-4、干扰素（IFN）-γ水平。结果黄芪多糖组、细胞因子组的抑瘤率高于环磷酰胺组（64.25%、64.10%vs 35.11%），胸腺指数高于环磷酰胺组（1.69±0.26、1.74±0.38 vs 1.45±0.22），脾脏指数高于环磷酰胺组(5.44±0.76、5.31±0.81 vs 3.54±0.52)，IL-4水平(ng/L)低于环磷酰胺组（15.66±2.57、14.72±4.84 vs 23.95±6.07），IFN-γ水平(ng/L)高于环磷酰胺组（16.54±3.71、17.20±2.03 vs 10.37±2.19），差异均有统计学意义。结论黄芪多糖诱导的DC疫苗可有效发挥抑瘤作用，其机制可能与提高荷瘤小鼠胸腺指数与脾脏指数，调节细胞因子表达，促进Th1/Th2失衡向Th1细胞占优势的细胞免疫偏移，增强机体的抗肿瘤免疫功能有关。
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抗IL-4R单链抗体原核表达载体的构建与表达
目的 通过BL21(DE3)原核表达系统制备抗白细胞介素-4受体(IL-4R)鼠抗人单链抗体(scFv).方法在前期研究结果的基础上优化抗IL-4R scFv序列,优化后分析scFv序列,构建重组质粒pET-32a-scFv,将该重组质粒酶切鉴定,将其转入BL21(DE3)原核表达菌进行诱导表达,并进行SDS-PAGE分析检测,对表达蛋白进行纯化和复性,通过SDS-PAGE分析抗IL-4R单链抗体的分子质量,运用Western blot检测融合蛋白的特异性.结果插入pET-32a载体的scFv序列长度761 bp,抗IL-4R单链抗体的分子质量在45 ku左右,重组蛋白具有较高的特异性.结论本实验成功构建pET32a-scFv原核表达系统,重组蛋白具有较高的免疫反应性,为进一步研究抗IL-4R单链抗体作为药物靶点提供了工作基础.
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丙泊酚和异氟醚对颅内肿瘤患者抗炎性因子的影响
目的:观察丙泊酚、异氟醚对颅内肿瘤患者抗炎性因子白细胞介素(IL)-4、IL-10及IL-13的影响.方法:择期全麻下行颅内肿瘤手术患者106例,ASA Ⅰ或Ⅱ级,随机分为丙泊酚组(P)和异氟醚(I)组各53例,P组采用血浆靶控输注丙泊酚3～6 mg/L,I组使用1％ ～2％的异氟醚持续吸入,2组术中均按需静脉给予芬太尼和维库溴铵,并于手术结束前5 min分别停止丙泊酚输注和异氟醚吸入.2组均于麻醉诱导前(T0)、术后0h(T1)、24 h(T2)和48 h(T3)各时点抽取静脉血,测定血清IL-4、IL-10和IL-13水平.结果:P组和I组比较,T0、T1时,IL-4、IL-10和IL-13的水平差异均无统计学意义(均P＞ 0.05)；T2时,P组IL-10和IL-13的水平均高于I组(均P＜0.01)；T3时,P组IL-4、IL-10和IL-13的水平均高于I组(均P＜ 0.01)；P组、I组患者血清IL-4、IL-10和IL-13的水平自T0～T2时逐渐上升,T3时均较T2时明显下降(均P＜0.01).结论:丙泊酚靶控输注较异氟醚吸入可更好地增强颅内肿瘤患者术后抗炎性水平,这可能是丙泊酚较异氟醚发挥脑保护作用强的原因之一.
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支气管哮喘患者IL-4测定的临床意义
支气管哮喘(简称哮喘)是以气道高反应性(AHR)和慢性气道炎症为特征的变态反应性疾病,有嗜酸性粒细胞(EOS)、肥大细胞(MC)、T淋巴细胞等多种炎症细胞和细胞因子参与.研究发现,哮喘的病理生理学特点是由Th2细胞产生的细胞因子IL-4、IL-5和IL-13异常增加[1,2],它们与哮喘的关系日益受到关注.本文采用ELISA法检测支气管哮喘患者外周血IL-4含量,旨在探讨IL-4在支气管哮喘发病中的临床意义.
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人参白虎汤对1型糖尿病幼鼠血糖及干扰素γ、白细胞介素4的影响
目的 探究人参白虎汤对1型糖尿病(T1DM)幼鼠血糖及干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)的影响作用.方法 将50只幼鼠随机选取10只设为正常组,剩余40只以链脲佐菌素(STZ)腹腔注射1次诱导T1DM模型,造模成功后随机分为模型组、胰岛素组、人参白虎汤高剂量组及人参白虎汤低剂量组,每组各10只.胰岛素组予精蛋白生物合成人胰岛素注射液2 U/(kg·d)皮下注射,人参白虎汤高、低剂量组分别予人参白虎汤12、6 mL/(kg·d)灌胃,正常组及模型组予0.9％氯化钠注射液1 mL灌胃,均持续6周.观察5组幼鼠给药前后体质量变化,分别于给药前及给药结束后采集5组幼鼠尾静脉血测定空腹血糖,处死幼鼠取腹主动脉血采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测IFN-γ和IL-4水平,并观察5组幼鼠胰腺的病理变化.结果 给药前,模型组、胰岛素组、人参白虎汤高剂量组及人参白虎汤低剂量组幼鼠体质量均较正常组明显下降(P＜0.05),空腹血糖升高(P＜0.05);给药后,胰岛素组、人参白虎汤高剂量组及人参白虎汤低剂量组幼鼠体质量均较本组给药前及模型组同期升高(P＜0.05),空腹血糖降低(P＜0.05),但与正常组同期比较差异仍有统计学意义(P＜0.05);与胰岛素组相比,人参白虎汤高剂量组体质量及空腹血糖无明显差异(P＞0.05),而人参白虎汤低剂量组体质量低,空腹血糖高(P＜0.05).与正常组相比,模型组、胰岛素组、人参白虎汤高剂量组及人参白虎汤低剂量组IFN-γ水平升高,IL-4水平降低(P＜0.05);与模型组相比,胰岛素组、人参白虎汤高剂量组及人参白虎汤低剂量组IFN-γ水平明显降低(P＜0.05),IL-4水平明显升高(P＜0.05),且人参白虎汤高剂量组与胰岛素组相比比较差异无统计学意义(P＞0.05).胰腺组织病理观察显示,胰岛素组、人参白虎汤高剂量组及人参白虎汤低剂量组胰岛β细胞损伤较模型组减轻,但仍未恢复正常.结论 人参白虎汤能明显降低T1DM幼鼠血糖、IFN-γ水平,提高IL-4水平,改善胰腺病理结构,进而发挥修复T1 DM幼鼠胰岛免疫损伤的作用.
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308nm准分子激光治疗对白癜风患者外周血Th1及Th2细胞因子的影响
目的：研究308 nm准分子激光对白癜风患者外周血Th1型细胞因子干扰素γ（ IFN-γ）和Th2型细胞因子白细胞介素-4（ IL-4）水平的影响，探讨其可能的作用机制。方法50例白癜风患者均采用308 nm准分子激光治疗，每周2次共治疗24次。采用酶联免疫吸附法（ ELISA法）检测50例白癜风患者治疗前、后及20例正常健康者外周血IFN-γ及IL-4的水平，并统计临床疗效。结果治疗组治疗前IFN-γ水平较正常对照组升高，比较差异有统计学意义（P＜0．05）；治疗后较治疗前明显降低（P＜0．05），且与正常对照组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。治疗组治疗前IL-4水平与正常对照组及本组治疗后比较差异均无统计学意义（ P＞0．05）。结论白癜风患者体内Th1型细胞因子占优势，308 nm准分子激光可恢复白癜风患者Th1及Th2的平衡状态。
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痛泻要方对大鼠溃疡性结肠炎IL-6、IL-4mRNA血清含量的影响
目的:观察痛泻要方治疗大鼠溃疡性结肠炎(UC)白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素4(IL-4)含量变化,探讨其治疗UC的作用机制.方法:将UC大鼠动物模型随机分成正常对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(SASP)和痛泻要方组,观察大鼠结肠黏膜损伤指数,检测IL-6、IL-4含量变化.结果:痛泻要方能有效改善UC大鼠结肠组织的病理损伤,与模型组比较,痛泻要方组IL-6水平显著减低,IL-4水平升高.结论:痛泻要方治疗溃疡性结肠炎疗效明显,其治疗作用与调节UC大鼠炎性因子密切相关.
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肥胖症和正常体质量哮喘儿童血白细胞介素2、白细胞介素4、IgE的动态观察
支气管哮喘是由多种细胞和细胞因子共同参与的气道慢性炎症性疾病.不少学者认为细胞因子网络失衡在哮喘发病机制中起着重要作用,发现并阻止这种失衡为诊断和治疗哮喘的重要环节.
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脑出血患者血清和颅内血肿液中白细胞介素4、白细胞介素6含量的研究
目的 研究脑出血患者静脉血清和颅内血肿液中白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)含量的动态变化,探讨IL-4、IL-6与脑出血的关系和意义.方法 检测89例急性脑出血患者静脉血清和颅内血肿液中IL-4、IL-6含量,并与正常对照组进行对比.结果 急性期脑出血患者静脉血清和颅内血肿液中IL-4、IL-6含量均明显高于正常对照组,IL-4(63.6±23.7)ng/L、(60.9±23.4)ng/L VS(17.9±7.1)ng/L(P
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Graves病患者血清性激素与干扰素γ、白细胞介素4水平及相关性研究
目的 观察Graves病(GD)患者治疗前后血清性激素及干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)的动态变化,探讨GD患者Ⅰ型辅助性T细胞(Th1)/Ⅱ型辅助性T细胞(Th2)细胞因子平衡的偏离方向,及性激素对Th1/Th2平衡的影响.方法 选取初发未治的Graves病患者80例为治疗组,经抗甲状腺药物治疗12周后均临床缓解,治疗前后分别应用应用放免法(RIA)检测血清雌二醇(E2)、睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清IFN-γ、IL-4水平;健康体检者50例作为正常对照组.结果 女性GD患者治疗前血清E2、LH、FSH水平均较正常对照组明显升高(均P＜0.01),治疗后均接近正常对照组;治疗前血清IL-4水平较正常对照组明显升高(P＜0.001),血清IFN-γ水平较正常对照组降低(P＜0.01);治疗后IL-4水平下降,而IFN-γ水平升高,均接近正常对照组;经多元逐步回归分析,血清E2水平是影响IL-4及IFN-γ水平的独立因素,分别呈正相关和负相关;IL-4与IFN-γ水平是相互的独立因素,呈负相关.结论 初发未治的GD患者存在性激素水平的变化及Th1/Th2细胞因子失衡,治疗前可能以Th2免疫反应为主,治疗后向Th1免疫反应漂移,雌激素可能在Th1/Th2平衡方面起着重要作用.
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呼吸道合胞病毒感染大鼠肺干扰素调节因子1表达与Th1/Th2失衡的相关性研究
目的 探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染时干扰素调节因子1(IRF-1)对辅助性T淋巴细胞(Th1/Th2)类细胞因子分泌的调控作用.方法 随机将16只SD大鼠分为对照组、RSV感染组(RSV滴鼻法建立RSV感染模型),每组8只.在第8周测定气道反应性;取肺组织苏木素伊红(HE)染色观察病理改变;通过免疫组织化学染色和蛋白质印迹(Western-blot)法检测IRF-1在肺组织中的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织匀浆白细胞介素4(IL-4)和干扰素Ⅱ型(IFN-γ)水平.结果 RSV感染组大鼠肺部病理学切片呈现典型的过敏性炎症表现,而且RSV感染组气道阻力增高程度明显高于对照组大鼠.免疫组织化学染色RSV感染组灰度值较对照组灰度值20 838±9 931 vs 14 514±6 553,较对照组显著减低(P<0.01).蛋白质印迹法检测肺组织中IRF-1的表达RSV感染组积分先密度值也较对照组积分光密度值0.428±0.02 vs 0.756±0.04显著减低(P<0.01).RSV感染组IL-4蛋白水平较对照组明显增强(P<0.01),而IFN-γ蛋白水平明显减低(P<0.01).肺IRF-1水平与IFN-γ水平呈正相关(P<0.01),与IL-4水平呈负相关(P<0.01),与IFN-/IL-4比值呈正相关(P<0.01).结论 RSV感染可以下调IRF-1在肺组织中表达,并可能与Th1/Th2的免疫失衡有关.
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慢性乙型重型肝炎患者外周血白细胞介素18、白细胞介素4、γ干扰素的变化
目的分析白细胞介素18(IL-18)、白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)在慢性乙型重型肝炎中的作用.方法采用固相双抗体夹心法酶联免疫吸附试验,检测25例正常人,35例慢性乙型肝炎,45例慢性乙型重型肝炎患者血清IL-18、IL-4、IFN-γ的水平.结果IL-18、IL-4在3组间差异均有统计学意义,IFN-γ在慢性肝炎与慢性重型肝炎间差异无统计学意义,但均显著高于正常对照组;IL-18、IL-4生存组显著低于死亡组(P<0.05),IFN-γ在两组间差异无统计学意义.重型肝炎重症期与康复期比较,IL-18、IL-4、IFN-γ康复后均显著性下降(P<0.05);慢性重型肝炎组IL-4与IL-18呈正相关(r=0.6,P<0.01);IL 4与IFN-γ呈正相关(r=0.54,P<0.01).结论IL-18、IL-4、IFN-γ参与了重型肝炎的发病及转归过程,在慢性重型肝炎的病理机制中有重要作用.
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舒利迭联合卡介菌多糖核酸对哮喘稳定期患儿血清中白细胞介素4和白细胞介素12的影响及意义
哮喘是儿童期常见的呼吸道疾病之一,发病率呈上升趋势[1].2002年新的《全球哮喘防治指南》提出吸入糖皮质激素联合长效β2受体激动剂治疗哮喘作用更强而持久,且可减少激素用量,具有协同作用.但现有的治疗仍不能完全控制患儿的哮喘症状且存在顺应性差的问题[1].笔者应用丙酸氟替卡松/沙美特罗(舒利迭)联合卡介菌多糖核酸防治哮喘稳定期患儿,观察患儿血清中白细胞介素4(IL-4)和IL-12的表达,旨在探讨舒利迭联合卡介菌多糖核酸防治哮喘的作用机制.
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Creutzfeldt-Jakob病相关研究的新进展
Creutzfeldt-Jakob病(CJD)是一种全世界分布的罕见的、致死性神经变性疾病.CJD是人类常见的朊蛋白病之一,为异常的朊蛋白(prion protein,PrPsc)在脑内沉积所致,临床表现以迅速进展的痴呆为特征,伴有共济失调、肌阵挛、视力障碍、锥体系及锥体外系受损的病状和特征[1].
关键词： 克-亚综合征 朊蛋白 14-3-3蛋白质类 白细胞介素4 痴呆 -
类风湿关节炎外周血淋巴细胞Th1/Th2和Fas/Fas L的表达及相关性研究
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节炎症为主的自身免疫性疾病.RA的病因目前仍不十分清楚.本课题拟研究RA患者外周血中T淋巴细胞的Fas系统、γ型干扰素/白细胞介素4(IFN-γ/IL-4)水平,阐述它们在RA活动期与非活动期的关系,以期寻求Fas系统和Th1/Th2在RA发病机制中的作用.
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结核分枝杆菌感染者白细胞介素4和白细胞介素17A的检测
目的：检测隐性结核感染者、活动性结核患者及健康人群白细胞介素（IL）-4和 IL-17 A水平。方法选择已确诊的活动性结核患者、隐性结核感染者及健康对照者，且所有入组者均注射过卡介苗。采用流式细胞术测定血清中的IL-4和IL-17 A的水平。结果与正常对照组和隐性感染组比较，活动性结核组血清中的IL-4及IL-17 A水平明显降低：IL-4（1．85±1．43）μg/L、（1．77±1．16）μg/L和（0．85±0．94）μg/L（P＜0．05）；IL-17A（1．06±1．29）μg/L、（0．91±1．08）μg/L和（0．09±0．16）μg/L（P＜0．01）；但正常对照组与隐性感染组之间IL-4、IL-17A比较差异均无统计学意义（P＞0．05）。结论可以根据结核分枝杆菌感染后产生 IL-4和 IL-17A的水平来区分活动性结核感染和隐性结核感染及健康人群。
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不同病情小儿毛细支气管炎血清白细胞介素-4及尿白三烯E4水平变化
目的:探讨不同病情小儿毛细支气管炎发病期血清白细胞介素-4(IL-4)及尿白三烯E4(LTE4)水平变化.方法:选择2006年12月～2008年12月80例小儿毛细支气管炎,按病情程度分为轻度、中重度两组,每组各40例,另选择同期健康体检儿童40例为对照组.采用酶联免疫法及竞争性酶联免疫吸附试验技术测定3组血清IL-4及尿LTE4水平,其中轻度组与中重度组分别于发病期和恢复期采血.结果:轻度组和中重度组发病期血清IL-4及尿LTE4水平较恢复期及对照组增高,差异有统计学意义(P＜0.01),中重度组又高于轻度组,差异有统计学意义(P＜0.01),两组恢复期测定水平及与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:血清IL-4及尿LTE4水平可作为毛细支气管炎病情严重程度的指标之一,有利于指导临床诊治.
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白细胞介素-4受体在小鼠肾缺血再灌注损伤后肾纤维化中的作用
目的 评价白细胞介素-4受体(IL-4R)在小鼠肾缺血再灌注损伤后肾纤维化中的作用.方法 雄性野生型BALB/C小鼠和IL-4Rα基因敲除小鼠各12只,8～10周龄,体重20～ 30 g.采用随机数字表法,将2种小鼠各分为2组(n=6):假手术组(S组)和缺血再灌注组(I/R组).I/R组行右侧肾缺血1h,再灌注2周,制备肾缺血再灌注损伤后肾纤维化模型.再灌注2周时采集眼眶静脉血样,检测血清BUN和Cr的浓度;取肾组织,天狼星红染色,确定肾纤维化面积;采用免疫荧光法检测肾组织纤连蛋白(FN)、Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)和α-平滑肌肌动蛋白(0α-SMA)表达;采用Western blot法检测肾组织信号转导和转录激活因子6(STAT6)和磷酸化STAT6(p-STAT6)表达,计算p-STAT6与STAT6表达的比值反映STAT6磷酸化水平.结果 与野生型小鼠的S组比较,野生型小鼠的I/R组和IL-4Rα基因敲除小鼠的I/R组血清BUN和Cr浓度升高,肾纤维化面积增加,肾组织FN、COL-Ⅰ和α-SMA表达上调,肾组织STAT6磷酸化水平升高(P＜0.05);与野生型小鼠的I/R组比较,IL-4Rα基因敲除小鼠的I/R组血清BUN和Cr浓度降低,肾纤维化面积减少,肾组织FN、COL-Ⅰ和α-SMA表达下调,肾组织STAT6磷酸化水平降低(P＜0.05).结论 小鼠肾缺血再灌注损伤后肾纤维化的机制部分与IL-4R有关,IL-4R通过促进STAT6信号通路激活导致肾纤维化.
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体外循环术后血中细胞因子及其诱生能力变化的研究
目的观察体外循环(CPB)心脏瓣膜置换术前后病人血中多种细胞因子水平及体外诱生能力的变化.方法30例择期行心脏瓣膜置换术的病人,于术前及术后第1、3、7、14d检测血中白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、和可溶性白细胞介素2受体(SIL-2R)水平及其体外诱生能力.结果IL-1和SIL-2R在CPB后第1、3d显著性增高(P＜0.01或0.05),第7d则明显降低(P＜0.05);IL-2在CPB后第1～7d明显降低(P＜0.01或0.05);IL-8在CPB后第1～14d显著增高(P＜0.01);TNFα在CPB后无显著性变化;各时点的IL-4均未检测出.体外诱生水平变化:IL-2、IL-4和SIL-2R在CPB后第1～7d显著减少(P＜0.01或0.05);IL-1在CPB后第1d明显增加(P＜0.01),第3～7d则显著减少(P＜0.01);IL-8在CPB后第1、3d明显增加(P＜0.01);TNFα仅在CPB后第7d显著减少(P＜0.05).结论体外循环心脏瓣膜置换术后可引起病人多种细胞因子及其体外诱生能力的变化.
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胸段硬膜外阻滞对心脏瓣膜置换术后病人血浆皮质醇、IFN-γ、IL-4的影响
目的 探讨胸段硬膜外阻滞对心脏瓣膜置换术后病人血浆皮质醇(Cor)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)的影响.方法 心脏瓣膜置换术病人20例,心功能Ⅱ级或Ⅲ级,射血分数＞0.4,随机分为2组(n=10):单纯全麻组(GA组)和全麻复合硬膜外阻滞组(GEA组).采用视觉模拟评分法(VAS)评价术后的疼痛程度.于麻醉诱导前、术后4 h和1、3、7 d取外周血,测定血浆Cor、IFN-γ、IL-4的浓度.结果 血浆Cor浓度的比较:与麻醉诱导前比较,GA组术后4 h、1 d升高,GEA组术后4 h升高(P＜0.05);与GA组比较,GEA组术后4 h、1 d降低(P＜0.05).血浆IFN-γ浓度的比较:与麻醉诱导前比较,2组术后4 h和1、3 d均升高(P＜0.05);与GA组比较,GEA组术后1 d升高(P＜0.05).血浆IL-4浓度的比较:与麻醉诱导前比较,GA组术后4 h降低(P＜0.05).IFN-γ/IL-4比值的比较:与麻醉诱导前比较,2组术后4 h、1 d升高(P＜0.05);与GA组比较,GEA组术后1 d升高(P＜0.05).结论 胸段硬膜外阻滞可降低心脏瓣膜置换术后病人血浆Cor水平,提高IFN-γ/IL-4比值.
