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APA微囊猪肝细胞异种移植的排斥反应与存活时间研究
目的 探讨海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊猪肝细胞异种移植的排斥反应和存活时间.方法 用胶原酶灌注分离猪肝细胞,用海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠法制成微囊肝细胞,将其植入正常SD大鼠腹腔内,两个对照组分别于腹腔植入游离肝细胞和空囊,观察3个月.结果 经测定白细胞介素-2、T细胞亚群等免疫指标和组织学检查均无明显变化;经形态学检查显示微囊肝细胞在3个月内有较好活性.结论 实验结果表明海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠微囊肝细胞异种移植未发现明显排斥反应且肝细胞存活时间超过3个月.
关键词: 微囊肝细胞 排斥反应 存活时间 海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠 -
微囊化乳猪肝细胞培养
生物型人工肝是目前治疗暴发性肝衰竭一种有效的方法[1],它要求所用肝细胞能提供足够的肝功能支持,且当应用异种肝细胞时还应避免排斥反应的发生,肝细胞的微囊化可解决这些问题[2]。我们在以往研究的基础上[3],制备微囊化乳猪肝细胞并进行体外培养。1. 材料与方法: (1)采用改进的Seglen原位胶原酶(Ⅳ型)灌注法,经门静脉、腹主动脉双重灌洗分离新生雄性乳猪肝细胞。(2)采用静电液滴法制备海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(alginate-polyly sine-alginate,APA)微囊肝细胞。(3)取自同一供体猪相同数量(3.5×107)APA微囊肝细胞和游离肝细胞分别以Williams’E培养液(含胰岛素、表皮生长因子、胰高糖素等)于CO2培养箱(37℃,5% CO2)同期培养。(4)APA微囊乳猪肝细胞(1.4×108)置入自制灌流罐以Williams’E培养液100ml循环灌流24h,流速10ml/min(37℃,5%CO2)。(5)统计学处理采用Studen t’s t检验,方差分析,q检验。