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基于均匀设计法分析铁元素对虫草素产量的影响
目的:利用均匀设计法分析铁元素对虫草素产量的影响.方法:采用均匀设计实验,以虫草素含量为检测标准,考察Fe2+添加量、Fe3+添加量及添加时间对虫草素产量的影响,并确定佳方案.结果:利用均匀设计法得到的佳实验方案为当Fe2+浓度为1.5g·L-1,Fe3+浓度为1.3g·L-1,第10天添加时可在每升蛹虫草发酵培养液中得到910.7 mg虫草素,与空白对照组相比含量提高了36.32％.结论:在培养基中添加铁元素会提高液体发酵蛹虫草产虫草素的产量.
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虫草素对舌癌TCA-8113细胞周期和凋亡的影响
目的:研究虫草素在体外对舌癌TCA-8113细胞周期和凋亡的影响;方法:以噻唑蓝法(MTT)测定虫草素对TCA-8113细胞增殖活性的影响;用流式细胞术测定虫草素对TCA-8113细胞周期的影响情况以及是否诱导TCA-8113发生凋亡作用;采用蛋白免疫印迹检测细胞周期相关蛋白和细胞凋亡相关蛋白的表达情况;结果:虫草素对TCA-8113细胞增殖活性的抑制作用具有浓度依赖性,能够引起TCA-8113细胞发生G2期细胞周期阻滞,并诱导TCA-8113细胞发生凋亡作用;CyclinB1和Bc1-2表达减少,Cdc2和Bax表达量没用明显变化.结论:虫草素有效的引起TCA-8113发生细胞周期阻滞,诱导TCA-8113细胞凋亡,从而抑制TCA-8113细胞的增殖活性,为进一步应用于临床治疗舌癌等肿瘤疾病提供了依据.
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虫草素抑制Ras蛋白表达并诱导非小细胞肺癌H358细胞凋亡研究
目的:研究虫草素在体外对K-Ras突变型非小细胞肺癌H358细胞的抑制作用及其相关机制.方法:用MTT法检测虫草素对H358细胞增殖的影响;以流式细胞术检测虫草素诱导H358细胞凋亡情况和对细胞周期的影响;用活性检测试剂盒检测Caspase3、8、9的活性变化;采用Western Blot方法检测K-Ras蛋白的表达情况.结果:不同浓度的虫草素对于H358细胞增殖均有一定的抑制作用,并以浓度依赖的方式诱导H358细胞凋亡和引起G1期周期阻滞;Caspase3、8、9均被不同程度激活;虫草素能够抑制H358细胞K-Ras的表达.结论:虫草素能够在体外有效诱导H358细胞凋亡并抑制H358细胞增殖,为进一步应用于临床治疗K-Ras突变型非小细胞肺癌等肿瘤疾病奠定了实验基础.
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辽阳产人工北虫草中虫草素含量的测定
目的 通过一定有效的实验方法测定辽阳产人工北虫草中的虫草素含量.方法 使用不同方法对实验北虫草进行提取并使用HPLC法测定,以虫草素标准品测定标准曲线,测定使用不同提取方法提取的北虫草样品中虫草素的含量.结果 在甲醇浓度20%料液比1∶30、提取时间30 min条件下提取效果好.在以水∶甲醇∶甲酸= 95∶4∶1为流动相的情况下使用HPLC法测得样品中虫草素含量高,含量为0.14%.结论 本实验方法可对人工培育冬虫夏草中的虫草素含量进行测定.并且经过分析认为,实验中使用的辽宁省辽阳地区出产的人工培育冬虫夏草质量较好,其生产工艺值得推广.
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北虫草废料酶解液中核苷和虫草素HPLC分析
目的:用HPLC测定人工北虫草及废料酶解液中核苷和虫草素的含量,判断酶解过程对核苷和虫草素的影响.方法:以Agilent C18色谱柱,甲醇-水为流动相,采用梯度洗脱,流速0.8 mL·min-1,检测波长260 nm,柱温28℃.结果:样品中尿苷、鸟苷、腺苷和虫草素的加标回收率为92.14％～103.23％,相对标准偏差为0.31％～5.41％.结论:该法简单、快速、准确地测定酶解液中3种核苷和虫草素的含量,人工北虫草废料酶解液中核苷和虫草素含量较高,有进一步开发和利用的价值.
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虫草素抑制帕金森病细胞凋亡的caspase激活途径研究
目的 研究虫草素抑制鱼藤酮诱导的PC12细胞凋亡的caspase激活途径.方法 实验分为对照组、模型组、虫草素三个剂量组(0.4×10-6、2.0×10-6和8.0×10-6 μnol· L-1).以1.0 μmol·L-1鱼藤酮制备PC12细胞帕金森病(parkinson's disease,PD)模型,MTT法测定细胞存活率,流式细胞技术检测细胞内ROS水平,Western blot法检测细胞内caspase-3、caspase-8、caspase-9、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9和fas蛋白的表达.结果 虫草素能显著升高鱼藤酮诱导的PC12细胞的存活率(P＜0.05),降低细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量(P＜0.01).与对照组比较,模型组显著上调了caspase-3、caspase-8、caspase-9和fas蛋白的表达并促进了caspase-3和caspase-9的活化(P＜0.01).虫草素能明显减少后两者的激活,下调caspase-8和fas蛋白的表达(P＜0.01).结论 虫草素可减少细胞氧化应激,通过内源性以及fas受体途径抑制caspase-3的激活而抑制细胞凋亡.
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北虫草的化学成分及药理作用
北虫草是一种药食两用真菌，在保健食品和药品行业日益成为热点。近10年研究表明，北虫草主要含有虫草素、腺苷、乙酰基虫草素等多种核苷、虫草多糖、氨基酸和无机元素的化学成分；药理研究显示北虫草中核苷和多糖类成分在抗肿瘤、抗炎、抗老化、免疫调节等方面有较为明显的作用。但有效成分的分离纯化制约着产业化的发展，北虫草有效成分药理作用机制研究也有待补足。
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国产虫草素(cordycepin)抗小鼠迟发型超敏反应的实验研究
目的:研究国产虫草素抗小鼠迟发型超敏反应的作用及其免疫机理.方法:用2,4-二硝基氯苯(2,4-DNCB)对昆明种小鼠皮肤致敏和诱发,制成迟发型超敏反应模型.以国产虫草素溶液作为实验组,分为两个剂量组(实验组1:12mg/kg;实验组2:16 mg/kg),以生理盐水作为阴性对照组,所有溶液均为间隔24小时(后一次间隔为4小时)重复腹腔注射给药.计算激发后各组小鼠左右耳耳廓肿胀厚度差、耳廓增重值及肿胀度,进行统计分析,并经过HE染色观察虫草素对小鼠致炎耳炎症病理变化及脾脏病理变化的影响.结果:两种给药剂量的国产虫草素溶液对模型鼠红斑,水肿,渗出的接触性皮炎损害有明显抑制作用,可减轻由于充血、水肿等炎症反应导致的局部皮损增厚及重量的增加.与生理盐水对照组相比,两实验组虫草素溶液的抗炎作用均有显著性差异(厚度差:P＜0.000 1;肿胀度:P＜0.05);两实验组间的抗炎作用也有显著性差异(厚度差及肿胀度均为P＜0.05),且与给药剂量相关.三组小鼠脾指数未见明显差异(P＞0.05),脾脏组织病理变化未见明显差异.结论:虫草素以24小时间隔(后一次给药间隔为4小时)经腹腔注射后,可能通过其免疫调节作用对迟发型超敏反应引起的小鼠接触性皮炎发挥明显的抑制效应,该效应与给药剂量相关,同时对脾脏组织未见明显毒性作用.
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虫草素对小鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及炎症调节
目的 观察虫草素对小鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能障碍及梗死灶体积的影响,探讨其可能的机制.方法 线栓法制备大脑中动脉阻塞的脑缺血再灌注模型.96只雄性小鼠随机分为假手术组、模型组和虫草素预处理组.再灌注24h后进行神经功能缺陷评分,TTC染色测定梗死面积,ELISA法检测缺血侧大脑皮层组织中白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素10(IL-10)和转化生长因子β1(TGF-β1)的含量,并用蛋白免疫印迹法检测缺血侧大脑皮层组织中核转录因子κB(NF-κB)的活性.结果 虫草素能明显改善小鼠的神经行为,缩小梗死面积,抑制促炎症因子IL-1β和TNF-α的表达,而增加抗炎症因子IL-10和TGF-β1的表达,并抑制NF-κB的活化.结论 虫革素对小鼠脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,其机制与抵抗炎症反应有关.
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蛹虫草中虫草素的提取及药理活性研究进展
蛹虫草又被称为北冬虫夏草，该物种是虫草属的模式种，可作为冬虫夏草的替代品之一（经成分测定分析及药理实验证明）。虫草素是蛹虫草中特有的活性成分，具有广泛的生物活性。虫草素是一种核苷类抗生素，具有良好的抗肿瘤作用，另外还具有抗炎、抗病毒等多种药理活性。本文主要对北冬虫夏草中虫草素的提取工艺及其药理活性进行简单地概述。
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人工培育北冬虫夏草主要有效成分分布特点的研究
目的:研究人工培育北冬虫夏草主要有效成分的分布特点.方法:以虫草素、腺苷和虫草多糖的含量为主要评价指标,采用HPLC和苯酚一硫酸法,分别研究了这三种活性物质在人工北冬虫夏草子实体上部、中部、下部和培养基中的分布情况.结果:人工北冬虫夏草整个生长过程中,腺苷、虫草素和虫草多糖在培养基中的含量都远远低于其他三个部分.结论:人工北冬虫夏草子实体的活性物质主要分布在子实体中,在培养基中的含量极少.
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虫草素抑制血管平滑肌细胞增殖的可能机制
虫草素是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗菌素，具有免疫刺激、抑菌、抗肿瘤、抗炎等非常广谱的生物活性及药理作用，目前已经成为一个研究热点。同时，国内外的多项研究都已证实虫草素能明显抑制血管平滑肌细胞的增殖，并从多个方面对其相关机制进行了探讨。现就虫草素抑制血管平滑肌细胞增殖的可能机制作一综述。
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虫草素在Aβ1-42寡聚体诱导AD模型大鼠神经元损伤中的作用
虫草素为天然中药材冬虫夏草和人工培养蛹虫草的有效成分.近年来研究表明,虫草素具有抗肿瘤,抗衰老,抗白血病等药理作用.阿尔茨海默病是一种神经系统退行性疾病.可溶性Aβ1-42寡聚体具有神经细胞毒性且是阿尔茨海默病发病的关键因素.本文探讨了虫草素在Aβ1-42寡聚体诱导AD模型大鼠神经元损伤中的作用.
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蛹虫草化学成分及药理作用研究进展
综述近年蛹虫草化学成分及药理作用研究进展.蛹虫草的化学成分有核苷类、多糖类、虫草酸、虫草素、甾醇类以及氨基酸和微量元素等,其药理作用广泛,主要对神经系统、循环系统以及免疫系统等多种疾病疗效显著.
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HPLC测定冬仙胶囊中虫草素的含量
目的:建立冬仙胶囊中虫草素含量测定方法.方法:采用HPLC法测定冬仙胶囊中虫草素的含量,色谱柱为AIlti-maC18柱,流动相为水-乙腈(95:5),流速为1 mL·min-1,检测波长为260 nm.结果:进样量在0.067μg～2.67μg范围内虫草素量与峰面积响应值呈良好的线性关系,r=0.9999;平均回收率为98.3%,RSD为0.4%(n=5).结论:本方法简便、准确,可作为该制剂的质控方法.
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脊髓损伤后虫草素增强突触分化诱导基因1的表达
目的:观察脊髓损伤后虫草素对脊髓组织内突触分化诱导基因1(SynDIG1)表达和神经系统运动功能的影响,探讨神经损伤修复的内在机制.方法:将成年雌性SD大鼠随机分为对照组、损伤组、低剂量和高剂量治疗组,对照组不损伤脊髓,治疗组与损伤组行脊髓半横切损伤,随后治疗组给予虫草素处理,损伤组给予生理盐水处理.术后14、21、28、35 d用BBB和斜板试验评价大鼠肢体运动功能,并用免疫荧光和免疫印迹测定脊髓组织内SynDIG1活性.结果:免疫荧光和免疫印迹结果均表明术后14d损伤组和治疗组均有神经细胞SynDIG1表达,在28 d达到高峰,之后呈高水平表达,且SynDIG1水平在高剂量治疗组明显高于低剂量治疗组和损伤组,BBB和斜板试验评分在高剂量治疗组均明显高于低剂量治疗组和损伤组.结论:虫草素明显改善损伤区域的微环境,激活神经系统的内源性修复机制,促进神经细胞SynDIG1大量表达,有利于神经系统运动功能恢复.
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cDNA阵列分析法研究虫草素对胰腺癌BxPc-3和BxPc-3-LN细胞株部分肿瘤相关基因表达的影响
目的 从分子水平探讨虫草素对胰腺癌细胞株部分肿瘤相关基因表达的影响.方法 利用多点eDNA阵列分析法对9个胰腺癌相关基因进行表达研究.结果 与空白对照组相比用药(虫草素)组甲基化CpG结合蛋白1(MBD1)、视网膜母细胞瘤1 (RB1)基因、E2F转录因子5(E2F5)、胰岛素样生长因子1(IGF1)、转化生长因子BI (TGFBI)、转录因子2B (GTF2B)、上皮细胞钙黏蛋白(CDH)、视黄醇受体-β(RARB)和RAS癌基因家族成员之一(RAB1)表达均明显下降(P＜0.05).结论 虫草素对胰腺癌细胞具有一定的生长抑制作用.
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虫草素羧甲基壳聚糖纳米粒的制备及表征
采用乳化离子交联法制备虫草素羧甲基壳聚糖纳米粒(1-CMC-NPs).通过单因素试验和正交设计,以粒径和包封率为指标优化处方组成.结果表明,优化后1-CMC-NPs的包封率和载药量约为70％和9％,平均粒径约为148 nm,ζ电位约为-25 mV,外观呈球形或类球形.差示扫描量热(DSC)和X射线衍射(XRD)分析结果提示纳米粒中药物可能以无定形存在.体外释放试验中,1-CMC-NPs在不含及含血清的磷酸盐缓冲液(pH 7.4)中,48 h累积释放率为68.1％和80.4％,与其溶液相比,呈现明显的缓释效果.
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虫草素及虫草多糖对结直肠癌转移的预防作用和调控血管内皮生长因子表达的研究
目的 观察虫草素、虫草多糖单独用药或联合铂类化疗药物对结肠癌转移的预防作用以及对血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的影响.方法 25只BALB/c裸鼠经腹腔注射接种结肠癌细胞株SW1116（5×106个细胞）24 h后,分为虫草素组、虫草多糖组、顺铂化疗组、联合用药组（虫草素+顺铂）和空白对照组5组,分别予喂饲和（或）腹腔注射给药.持续3周后,采用颈椎脱臼法处死裸鼠.观察各组裸鼠的致瘤总数、腹腔内肿瘤结节直径以及各脏器转移情况.取腹腔肿瘤结节作病理切片,苏木精—伊红(H-E)染色后置于光学显微镜下观察.应用透射电子显微镜观察细胞超微结构,并检测细胞凋亡状况.采用免疫组织化学法观察肿瘤细胞VEGF的表达情况.结果 顺铂化疗组、联合用药组的腹腔内肿瘤结节数均显著低于空白对照组(P值分别为0.007、0.001),联合用药组与顺铂化疗组间的差异无统计学意义(P＞0.05),虫草组与虫草多糖组间的差异亦无统计学意义(P＞0.05).联合用药组肿瘤结节的直径显著小于其余4组（P值均＜0.05）,顺铂化疗组肿瘤结节的直径显著小于虫草素组及空白对照组（P值均＜0.05）,虫草多糖组肿瘤结节的直径显著小于空白对照组(P=0.01).各组肝脏、肠系膜、肾脏及肠系膜转移率的差异均无统计学意义（P值均＞0.05）.光学显微镜观察见联合用药组的肿瘤细胞较其余4组显著减少,细胞伪足消失.透射电子显微镜观察见联合用药组出现大量凋亡细胞.免疫组织化学检测显示,联合用药组VEGF表达阳性的面积比显著小于其余4组(P值均＜0.05).结论 顺铂、虫草素及虫草多糖具有一定的减少肿瘤腹腔种植的作用,可能对结肠癌术后腹腔转移复发有一定的预防作用,虫草素与顺铂联合用药可加强这一作用.顺铂、虫草素及虫草多糖能抑制结肠癌细胞质中VEGF的表达,可能与其抑瘤作用有关.
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蝉花与有关虫草活性成分检测比较
目的:测定蝉花的虫草活性成分,并与冬虫夏草和蛹虫草作比较.方法:分别采用高效液相色谱法、3,5-二硝基水杨酸比色法和高碘酸钠比色法测定3种虫草样品的腺苷和虫草素、虫草多糖以及虫草酸含量.结果:经测定,蝉花中含虫草素0.02mg·g-1,腺苷1.90mg·g-1,虫草多糖94.88mg·g-1,虫草酸78.57mg·g-1,其中虫草酸和腺苷含量高于冬虫夏草,多糖和虫草酸含量高于蛹虫草.结论:蝉花中的虫草活性成分不亚于冬虫夏草和蛹虫草,属于优质虫草,值得进一步研究和推广.
