首页 > 文献资料
-
组氨酸三聚体核苷结合蛋白1的研究进展
组氨酸三聚体核苷结合蛋白1(HINT1)是新近发现的一种肿瘤抑制因子.HINT1可以通过多种途径控制多种转录过程,发挥肿瘤抑制作用,涉及Wnt 通路、p27KIP1、核因子κB、激活蛋白1和小眼畸形转录因子等,但具体机制尚未完全明确.HINT1在部分肿瘤细胞中的低表达可能与其启动子区超甲基化有关.该文就HINT1的分子结构、启动子区超甲基化现象、抑癌作用及目前发现的作用机制的研究进展予以综述.
关键词： 组氨酸三聚体核苷结合蛋白1 分子结构 肿瘤抑制 -
组氨酸三聚体核苷结合蛋白1在肾透明细胞癌中的表达及意义
目的:通过检测组氨酸三聚体核苷结合蛋白1(histidine triad nucleotide-binding protein 1,HINT1)mRNA及其蛋白质在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中的表达情况,探讨其与临床病理特征的关系.方法:应用实时荧光定量(real-time fluorescence quantitative,RFQ)-PCR和免疫组织化学分别从mRNA和蛋白质水平检测HINT1在36例新鲜ccRCC组织、37例新鲜正常肾组织(其中29例配对)、30例石蜡包埋ccRCC组织与12例石蜡包埋正常肾组织中的表达水平,并分析其与临床病理特征间的关系.结果:HINT1 mRNA在29例配对ccRCC和癌旁正常肾组织中的表达量分别为0.209±0.033和0.733±0.136(P<0.001),在36例CCRCC和37例癌旁正常肾组织中的表达量分别为0.245±0.035和0.694±0.108(P<0.001).HINT1蛋白在癌旁正常肾组织中的阳性表达率为100%(12/12),弥漫性分布于细胞核及细胞质中,其中近曲小管表达强度高于远曲小管.肾小球基膜、肾小囊壁层上皮细胞可见HINT1蛋白部分表达,其强度低于肾小管,肾间质未见阳性表达.HINT1蛋白在ccRCC中的阳性表达率为60%(18/30),同样分布于细胞核及细胞质,癌组织间质阴性(P<0.01).HINT1在mRNA和蛋白质水平表达趋势一致,在CCRCC中表达水平低于癌旁正常肾组织,并且在T3-4晚期肿瘤中表达量低于T1-2早期肿瘤中的表达量(P<0.05);但2者在不同Fuhrman核分级、性别、年龄和肿瘤大小中的表达差异无统计学意义(P>0.05).结论:HINT1可能在ccRCC发病机制中发挥肿瘤抑制作用,其表达异常可能与翻译水平之前的异常调控有关.推测HINT1 mRNA和蛋白质的异常表达可作为ccRCC发生和进展的预后指标.
关键词： 肾肿瘤 基因表达 反转录酶聚核酶链反应 免疫组织化学 组氨酸三聚体核苷结合蛋白1 -
HINT1对人黑素瘤细胞A375增殖和凋亡的影响
目的 探讨HINTl基因对人黑素瘤细胞A375增殖、凋亡的影响及其作用机制.方法 应用构建的peDNA.3.1/mye-His(-)A-HINTl真核表达载体,建立稳定转染且能高表达HINTI的A375细胞模型.用M1rr法检测细胞增殖活性变化,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率,TUNEL法检测细胞凋亡.分光光度法检测Caspase 3,Caspase 8及Caspase 9的相对活性.Western印迹法检测bcl-2、bax、细胞色素C及p53的表达.结果 与空载体-A375及未转染A375细胞相比,HINT1-A375细胞生长速度明显减慢(P<0.05);Gl期细胞增多(73.17%±3.99%,F=25.65,P<0.05),S期细胞减少(16.75%±1.62%.F=75.48,P<0.01),细胞出现明显的晚期凋亡(23.57%±9.58%,F=11.71,P<0.01). TUNEL法显示凋亡阳性细胞百分比(12%±1%)显著增高(F=358.02,P<0.01);Caspase 9(0.45±0.03,F=135.62,P<0.01)和Caspase 3表达(0.46±0.04,F=90.28,P<0.01)升高.凋亡相关蛋白bax、细胞色素C及p53表达增加,bel-2表达降低.结论 高表达H1NT1可抑制A375细胞的增殖,促进其凋亡,细胞周期出现G_1期阻滞,提示HINT1可能是人黑素瘤的抑癌基因.
-
pcDNA.3.1/myc-His(-)A-HINT1真核表达载体的构建及其在人黑素瘤细胞A375中的表达
375细胞.
关键词： 组氨酸三聚体核苷结合蛋白1 黑色素瘤 真核表达 稳定转染
