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肝细胞癌上皮型钙粘素基因甲基化及其临床特征研究
目的：探讨肝细胞癌上皮型钙粘素基因甲基化与肝细胞癌之间的关系。方法收集肝细胞癌患者53例，取手术切除肿瘤标本53分以及癌旁组织标本53份，并取30份正常人的肝组织标本作为对照，应用甲基化特异性PCR技术检测其肿瘤组织、癌旁非肿瘤组织或者正常组织中的上皮型钙粘素基因甲基化情况。结果肿瘤组织甲基化率的甲基化率为45.3%，显著高于癌旁组织的11.3%（P<0.05）；正常肝组织的甲基化率为6.7%，与肿瘤组织甲基化率比较差异显著（P<0.05），而与癌旁组织比较无显著差异；肿瘤Ⅲ-Ⅳ期、肿瘤组织包膜不完整、HBV阳性均与甲基化密切相关（P<0.05）。结论上皮型钙粘素基因甲基化可能参与了肝细胞癌性转变过程。
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上皮型钙粘素(E-cad)与子宫内膜癌研究的新进展
上皮型钙粘素(E-cad)是一类介导同种上皮细胞之间相互黏附的钙依赖性跨膜糖蛋白,参与形成和维护细胞间的连接,同时还可促进旁分泌信号传递,起信息传递和细胞稳定作用,是介导细胞间连接重要的一类分子.E-cad及其影响因子连接素亚单位、细胞间交流的缝隙连接、孕激素受体与子宫内膜癌近几年相关性研究的新进展.
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肝细胞癌上皮型钙粘素基因甲基化及其临床特征分析
目的:探讨上皮型钙粘素基因启动子CpG岛甲基化与肝细胞癌(HCC)及其临床病理特征的关系.方法:用甲基化特异性PCR技术检测53例HCC肿瘤组织及其癌旁非肿瘤组织和15例肝海绵状血管瘤周围正常肝组织中,上皮型钙粘素基因启动子CpG岛甲基化状况.结果:上皮型钙粘素基因在HCC肿瘤组织中的甲基化率显著高于癌旁非肿瘤组织(P=0.007,P＜0.01),显著高于正常肝组织(P=0.006,P＜0.01),在Ⅲ～Ⅳ期肿瘤中的甲基化率显著高于Ⅰ～Ⅱ期肿瘤(P=0.037,P＜0.05),在包膜完整的肿瘤中甲基化率显著高于包膜不完整的肿瘤(P=0.043,P＜0.05),在HBV阳性的肿瘤组织中甲基化率显著高于HBV阴性的肿瘤组织(P=0.024,P＜0.05),在不同大小的肿瘤之间、单个结节与多个结节的肿瘤之间甲基化率的差异均无显著性.结论:上皮型钙粘素基因启动子CpG岛甲基化可能参与肝细胞的癌性转变.
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缺氧诱导因子1α诱导人前列腺癌细胞上皮间质化改变的研究
目的:研究人前列腺癌细胞在缺氧诱导因子1α(HIF-1α)诱导下能否发生上皮细胞间质转化态(EMT)改变,进而致侵袭能力增强,并初步分析其分子机制.方法:应用RT-PCR技术检测LNCaP细胞及其亚细胞系C4、C4-2、C4-2B这4种EMT阴性的人前列腺癌细胞中波形蛋白(vimentin)mRNA表达情况,并凭此筛选出适合于进一步作转染诱导试验的细胞.用脂质体Lipofectamine2000包装重组真核表达载体pCDNA3.1(-)/HIF-1α和pCDNA3.1(-)空质粒后,分别转染上步试验所挑选出的人前列腺癌细胞LNCaP,600μg/mL G418筛选抗性克隆.免疫荧光及Western印迹法鉴定HIF-1α表达,Western印迹法检测EMT标志蛋白--上皮型钙粘素(E-cadherin)和vimentin的表达,Transwell验证转染后LNCaP细胞侵袭能力的改变.结果:RT-PCR证实4种EMT阴性的细胞中,仅LNCaP表达有vimentin编码基因,适合作转染诱导试验.免疫荧光也观察到HIF-1α转染细胞胞质中荧光亮度较空质粒转染细胞和未转染细胞明显增强.Western印迹法证实HIF-1α仅转染细胞发生了EMT转化,其E-cadherin表达缺失,而vimentin表达增加.同时,Transwell体外侵袭试验也发现,LNCaP/HIF1α细胞的体外侵袭能力显著高于LNCaP细胞和LNCaP/pCDNA3.1(-)细胞.结论:HIF-1α过表达可以通过调节两种EMT相关蛋白诱导人前列腺癌细胞LNCaP发生EMT改变并致其侵袭能力增强.
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多种转移潜能不同的人前列腺癌细胞"上皮细胞间质转化态"特性鉴定及其意义
目的:对多种转移潜能不同的人前列腺癌细胞"上皮细胞间质转化态"(EMT)特性进行鉴定,并从粘附因素和细胞骨架蛋白角度分析其骨转移潜能获得的分子机制. 方法:用Western印迹法鉴定LNCaP及其亚细胞系C4、C4-2和ArCaP亚细胞系IF11、IA8,以及PC-3、Du145等细胞中上皮型钙粘素(E-cadherin)、神经型钙粘素(N-cadherin)和波形纤维蛋白(Vimentin)的表达差异情况,并分析其在前列腺癌转移过程中的作用. 结果:E-cadherin在PC-3、LNCaP、C4、C4-2中表达较高,但在Du145、IF11、IA8中表达极低;而Vimentin的表达情况恰恰与E-cadherin相反;N-cadherin在IF11、IA8细胞中呈现显著的高表达状态. 结论:转移潜能不同的人前列腺癌细胞株之间存在EMT表型的表达差异,其中PC-3、LNCaP、C4、C4-2是未发生EMT改变的细胞,Du145、IF11、IA8却是EMT化的细胞.EMT表型差异蛋白在解释前列腺癌转移机制方面占据着重要地位.
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前列腺癌细胞株LNCaP和IA8中转移相关蛋白的差异表达及意义
目的:从粘附因素及细胞骨架蛋白角度初步探讨前列腺癌细胞骨转移潜能的分子机制.方法:用Western印迹法鉴定转移潜能不同的两个前列腺癌细胞株(LNCaP和IA8)中E-钙粘素和波形蛋白的表达差异情况,并初步分析其在前列腺癌转移过程中所发挥的作用.结果:E-钙粘素在低转移细胞株LNCaP中高表达、在高转移细胞株IA8中缺失;而波形蛋白在这两种细胞中的表达情况恰与E-钙粘素相反.结论:人前列腺癌高、低转移株之间确实存在转移表型(E-钙粘素和波形蛋白)的表达差异,而这两种表达差异蛋白可能在促进或抑制前列腺癌转移的过程中发挥重要作用.
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E-cad、MMP-2在子宫腺肌病与子宫内膜癌中的表达及生物学行为相关性研究
目的:研究E-cad、MMP-2在子宫腺肌病、子宫内膜癌中的表达,探讨其表达与子宫腺肌病发生及子宫腺肌病和子宫内膜癌生物学行为的相关性.方法:应用免疫组化SP染色法检测30例子宫腺肌病在位内膜、异位内膜,30例子宫内膜癌,16例对照组子宫内膜E-cad、MMP-2的表达.结果:E-cad在子宫腺肌病在位内膜组和子宫内膜癌组中的表达显著低于对照组(P＜0.05、P＜0.01);E-cad在子宫腺肌病异位内膜组中的表达显著低于子宫腺肌病在位内膜组(P＜0.01).MMP-2在子宫腺肌病异位内膜组中的表达显著高于子宫腺肌病在位内膜组及对照组(P＜0.01、P＜0.01);MMP-2在子宫内膜癌组中的表达显著高于对照组(P＜0.01).E-cad、MMP-2在子宫腺肌病异位内膜组与子宫内膜癌组中的表达差异均无显著性(P＞0.05).结论:E-cad、MMP-2的异常表达可能与子宫腺肌病的发生有关;且可能与子宫腺肌病具有和子宫内膜癌相似的生物学行为有关.
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E-cadherin和β-catenin在食管鳞状细胞癌中的表达及其意义
目的:探讨上皮型钙粘素(E-cadherin,E-cad)和β-连环素(β-catenin, β-cat)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及其与临床病理特征的关系.方法:采用免疫组织化学EnVision法检测60例ESCC组织和15例正常食管组织中E-cad和β-cat的表达,分析其表达与ESCC临床病理特征的关系.结果:(1)E-cad和β-cat在ESCC组织中的异常表达率分别为61.67%(37/60)和66.67%(40/60),高于正常食管组织(0.00%,0.00%) (P<0.01);(2) E-cad和β-cat在中低分化、侵及肌层及有淋巴结转移患者中的异常表达率分别高于高分化、未侵及肌层及无淋巴结转移患者(P<0.01);(3)ESCC中E-cad 和β-cat的表达呈正相关(r=0.679, P<0.01).结论:ESCC中E-cad和β-cat异常表达促进了肿瘤的浸润和发展,可能作为监测肿瘤恶性程度和判断预后的指标.
