首页 > 文献资料
-
ICP-MS法测定那格列奈原料药中镍的含量
目的 建立高灵敏的重金属镍的含量测定方法,用于那格列奈原料药中镍的微量残留测定.方法 采用微波消解技术将样品消解后,采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法进行检测.结果 在选定的条件下,镍元素质量浓度为5~37 ng/mL时,与响应值具有良好的线性关系,线性方程为Y=2703.2852X+122.2433,回归系数(r)=0.999;检测限为0.01 ng/mL,定量限为0.16 ng/mL,折合到样品中检测限为0.07 mg/kg,定量限为0.78 mg/kg,低、中、高3个浓度镍元素的回收率(n=3)分别为104%、107%、104%,相对标准偏差(RSD,n=9)为1.5%;供试品溶液在室温放置8 h内稳定性良好.结论 ICP-MS法具有良好的线性、回收率高、重复性好、操作简单等特点,适合那格列奈中镍残留含量测定.
-
尿蛋白电泳分析和质谱鉴定
目的：探究尿蛋白的佳沉淀方法，且对常规损失蛋白进行鉴定分析。方法采用有机溶剂沉淀法，即用三氯乙酸/90%丙酮法、三氯乙酸/100%丙酮法和90%丙酮法分别沉淀尿液中蛋白质，对90%丙酮法所得到沉淀的可溶部分和不溶部分进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺分离和质谱鉴定。结果90%丙酮沉淀法获得的尿蛋白量相对较高。将90%丙酮法沉淀的尿蛋白不溶部分和可溶部分进行质谱鉴定，可溶部分得到53种蛋白，不溶部分得到49种蛋白，且不溶部分特有的蛋白包括免疫球蛋白κ轻链基因1～5、谷氨酰氨肽酶、突变体1、芳基硫酸酯酶A前体等14种。结论尿液沉淀的不溶部分中特有蛋白的发现有助于尿液蛋白质组的全谱研究，对临床特异蛋白的检测具有重要意义。
-
基于尿代谢产物测定的早产儿遗传代谢病筛查
目的 总结早产儿先天性遗传代谢性疾病的发病情况和治疗经验,以期提高临床医疗工作者对先天性遗传代谢性痰病的重视程度、认识和处理能力.方法 对2011年1月至2012年12月514例早产儿及100例足月儿通过气相色谱一质谱(GC-MS)技术检测其尿液中250种代谢产物.结果 514例早产儿中确诊为先天性遗传代谢病4例,阳性率为0.78％.分别为枫糖尿病1例,戊二酸血症1例,甲基丙二酸血症1例,一过性酪氨酸血症1例.100例足月儿中未发现先天性遗传代谢病.早产儿组有3例继发性肉碱缺乏症.结论 早产儿天性遗传代谢性疾病发生率较高,熟悉遗传代谢病的临床特点,利用尿液GC-MS技术检测遗传代谢病可提高早期诊断率,有利于降低围生期死亡率,避免或减轻神经系统损伤等严重后遗症的发生,促进优生优育.
-
SELDI-TOF-MS技术在肝脏疾病腹腔积液差异蛋白研究中的应用
目的：探讨表面加强激光解析电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术在肝脏疾病腹腔积液差异蛋白研究中的应用价值。方法应用SELDI-TOF-MS技术对肝硬化及原发性肝癌患者腹腔积液蛋白质进行测定，应用质谱仪分析蛋白质波谱。结果原发性肝癌与肝硬化患者腹腔积液相比，质荷比为7852、11467的蛋白质波峰强度明显增强，差异有统计学意义（P＜0.05），该蛋白质组对于肝癌患者腹腔积液的灵敏度为83.56%，特异性为89.82%。结论质荷比为7852、11467的蛋白质谱对于肝癌腹腔积液患者具有特征性。
-
银杏叶提取物对光损伤后视网膜色素上皮细胞蛋白质表达的影响
目的 观察中药银杏叶提取物对光损伤后视网膜色素上皮(RPE)细胞蛋白质表达的影响,探讨银杏叶提取物保护RPE光损伤的分子机制.方法 生长良好的人RPE细胞(ARPE-19)融合生长到80%时,随机分为正常对照组、光损伤组和银杏叶提取物处理组.运用冷白光以(2200±300)1x光照ARPE-19,建立光损伤模型;以100 μg/ml的银杏叶提取物(EGb761)处理光损伤的RPE细胞.提取细胞可溶性蛋白,进行蛋白质双向电泳,ImageMaster凝胶软件分析差异蛋白质点,并选取表达差异蛋白进行质谱鉴定和生物信息学分析.结果 蛋白图谱差异分析显示,光损伤组与正常对照组比较,差异蛋白质有33个,其中蛋白质表达下调10个,蛋白质表达上调23个;银杏叶提取物处理组与光损伤组差异蛋白质有25个,其中,蛋白质表达上调3个,蛋白质表达下调22个.银杏叶提取物处理组与正常对照组比较,差异蛋白质有11个,其中,蛋白质表达上调4个,蛋白质表达下调7个.差异蛋白质的质谱鉴定和生物信息分析,成功鉴定出16个蛋白,包括组织蛋白酶B、热休克蛋白、细胞色素C还原酶等.结论 光损伤RPE细胞与银杏叶提取物处理后的光损伤RPE细胞及正常RPE细胞间的蛋白质表达有差异;银杏叶提取物光损伤保护作用涉及组织蛋白酶B、热休克蛋白、细胞色素C还原酶等多种蛋白.
-
HPLC-MS分析解毒化瘀中药组方水煎液乙酸乙酯分离部分化学成分
目的 分析解毒化瘀中药组方水煎液乙酸乙酯分离部分化学组分.方法 采用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)法,以甲醇-水为流动相,梯度洗脱,流量为1 mL·min-1,采用ESI正离子模式进行质谱检测,相对分子质量扫描范围为50～1 000 m/z.将检测得到的相对分子质量数据与Aglient中药成分数据库比对,对相似度得分在80％以上的化合物进行文献及来源药材成分检索,鉴定化合物.结果 共鉴定出2-O-桂皮酰基-β-葡萄糖、淫羊藿属甙C、大黄二蒽酮A、欧芹脑、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖甙、葛缕酮等18种化合物,2-O-桂皮酰基-β-葡萄糖、大黄二蒽酮A、大黄酚来源于大黄;9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖甙、异微凸剑叶莎醇、熊竹素来源于黄芪;欧芹脑、葛缕酮、茵陈蒿B来源于茵陈;淫羊藿新甙C、1,2-双(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1,3-丙二醇来源于淫羊藿.7,9(11)-去氢茯苓酸、藜芦醇、赛仙鹤草酚C分别来源于茯苓、虎杖、仙鹤草;苍术内酯1来源于白术;决明萘乙酮-8-O-β-D-葡萄糖甙来源于虎杖和大黄;槲皮素来源于仙鹤草、淫羊藿、茵陈.结论 采用HPLC-MS法可明确中药组方水煎液乙酸乙酯分离部分的化学组分,为解毒化瘀中药组方的临床应用提供了理论依据.
-
正常纯化尿路上皮细胞蛋白质表达谱鉴定
目的 研究正常尿路上皮细胞的蛋白质表达谱,为尿路上皮癌蛋白质芯片的研制奠定基础.方法 采用激光捕获显微切割技术从正常膀胱黏膜获得纯化的尿路上皮细胞,二维液相色谱电喷雾串联质谱鉴定标本中的蛋白质表达.应用生物信息学软件以及基因本体论(GO)工具分析鉴定蛋白质.结果 共鉴定 218 个蛋白质,其中19个为假定蛋白质,11个为疏水性蛋白质,40 个蛋白质等电点(PI)>9,42 个蛋白质相对分子质量<10<'4>或者>10<'5>,13 个蛋白具有跨膜结构.按 GO 划分218个蛋白质中具有生物学途径、细胞成分、分子功能注解的蛋白质分别为155、148、173个,浓集与缺失表达的GO术语分别为34/15、24/7、26/14个.结论 本研究为尿路上皮癌生物标记组研究提供了有效的候选蛋白.
-
43个SNP遗传标记复合检验体系的建立及其法医学应用
目的 对43个SNP遗传标记的复合检验体系进行法医学应用评估.方法 采用MALDI-TOF-MS技术检验华东地区123名汉族无关个体在43个SNP位点的分型,并根据43个SNP复合检验体系的群体遗传学参数评估其应用价值.结果 123名个体在43个SNP位点上均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05).除rs1355366、rs2270529、rs10776839和rs938283外,其余39个位点的小等位基因频率(minor allele frequency,MAF)均大于0.25,其中,24个位点的MAF值在0.4～0.5,3个位点的MAF值接近0.4.43个SNP位点的DP为0.2901～0.6544,CDP为1-9.8×10-11,PIC为0.1708～0.5000,Ho为0.1557～0.5935,PEtrio为0.0854～0.2500,PEduo为0.0146～0.1250,CPEtrio为0.999986,CPEduo为0.9924361.结论 本研究的43个SNP复合检验体系具有较高的遗传多态性,既可以作为传统STR遗传标记的有效补充和验证,也可以与其他商品化试剂盒配合使用,用于法医遗传学亲权鉴定及个体识别.
-
MALDI-TOF-IMS分析DAI大鼠脑组织内差异蛋白的分布
目的 基于基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱成像(matrix assisted laser desorption/ionization-time of flight imaging mass spectrometry,MALDI-TOF-IMS)技术建立弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)大鼠脑组织内蛋白差异化表达的质谱成像方法.方法 应用Autoflex Ⅲ MALDI-TOF质谱仪在质荷比1 000～20 000范围内对DAI组和对照组脑组织进行质谱扫描,利用ClinProTool 2.2软件对两组数据进行统计学分析,挑选出存在表达差异的蛋白质分子进行质谱成像,观察不同质荷比的蛋白质分子在脑组织中的分布情况. 结果 质荷比为4963、5634、6253、6714及7532的5个蛋白质分子在DAI大鼠脑组织内表达量存在差异. 结论 MALDI-TOF-IMS可用于大鼠DAI后脑组织内差异蛋白的研究,初步建立了质谱成像技术检测DAI大鼠脑组织中差异蛋白分布的分析方法.
-
MALDI-TOF-MS对DAI大鼠脑干蛋白质组学的分析
目的 应用基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术建立弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)诊断模型,筛选DAI相关蛋白或多肽,为寻找DAI的分子标志物提供理论基础.方法 将15只雄性SD大鼠随机分为DAI组(n=10)和对照组(n=5),采用MALDI-TOF-MS技术对两组大鼠脑干组织的蛋白或多肽表达谱进行检测,运用ClinProTools 2.2分析软件筛选出具有差异的分子峰,应用遗传算法建立诊断模型. 结果 筛选出有差异的分子峰61个(P＜0.05),其中DAI组有9个分子峰下调,52个分子峰上调.筛选出5个分子峰建立诊断模型,交叉验证的特异性为96.14％、敏感性为95.98％,盲法验证结果的特异性为73.33％、敏感性为70.00％. 结论 应用MALDI-TOF-MS技术不仅能够建立特异性和敏感性较高的DAI诊断模型,还可以筛选差异蛋白或多肽,为DAI的法医学鉴定奠定理论基础.
-
生物样品的色谱-质谱定性确认指标
由于复杂基质的存在,生物样品中毒物的色谱-质谱定性确认指标与非生物样品有所不同.即使同为生物样品,定性确认指标也会因应用领域的不同而不尽相同.本文综述了法医毒物分析及其他应用领域生物样品中待测物的色谱-质谱定性确认指标的异同,这些确认指标主要包括保留时间、相对保留时间、信噪比、特征离子、特征离子的相对丰度、母离子-子离子对和离子对丰度比等.
-
MALDI-TOF-IMS在蛋白质组学研究中的新进展
基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱成像（matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight imaging mass spectrometry，MALDI-TOF-IMS）技术已成为目前蛋白质组学研究中的经典技术，是一种研究生物组织切片中蛋白质和小分子物质分布的工具。MALDI-TOF-IMS通过单次扫描就能够同时分析生物组织切片中的各种未知组分，在保持组织中细胞和分子完整性的同时获取组织的分子成像图。近年来，质谱成像技术在生物医学各领域中有了较快发展，本文综合文献资料对MALDI-TOF-IMS技术目前的发展水平、质谱成像原理、方法学以及在法医病理学中的应用前景进行了综述。
-
新生儿甲基丙二酸血症3例临床分析
目的：总结新生儿甲基丙二酸血症的临床特点，提高我院新生儿科对新生儿甲基丙二酸血症的诊治水平。方法：对我院NICU自2011年1月-2012年12月收治的3例新生儿甲基丙二酸血症患儿的临床资料进行分析。结果：3例患儿中男2例，女1例；发病年龄48h～72h；主要临床表现为反应差、皮肤发花、喂养困难、呼吸困难、抽搐等；常规实验室检查表现为代谢性酸中毒、高氨血症等；气相色谱-质谱法(GC/MS)分析尿有机酸显示3例患儿尿中甲基丙二酸浓度均明显高于正常；转归3例患儿均放弃治疗后死亡。结论：新生儿甲基丙二酸血症临床表现复杂，缺乏特异性症状，且病情进展快，死亡率高，早期诊断和治疗是改善预后的关键。
