首页 > 文献资料
-
和厚朴酚对脂变性状态下HepG2细胞脂合成的影响
本文采用油红0染色法检测细胞脂滴含量,荧光光度法检测细胞的葡萄糖摄取量,实时荧光定量PCR及蛋白印迹法检测目标基因的表达量,研究了和厚朴酚(honokiol,HN)对正常、T0901317 (TO)和油酸(oleic acid,OA)处理的HepG2细胞脂合成、葡萄糖摄取及细胞色素P450酶(cytochrome P450 proteins,CYP)家族的CYP2El、CYP4A蛋白表达的影响.结果显示:①TO和OA处理能明显提高细胞中脂滴数量,以及固醇调节元件结合蛋白lc (sterol regulatory element binding protein-1,SREBP-1c)和脂肪营养蛋白3 (patatin-like phospholipase domain-containing 3,PNPLA3)的mRNA和蛋白表达水平;经HN(10、20、40 μmol·L-1)处理细胞24 h后,肝细胞中脂滴明显减少,SREBP-lc和PNPLA3 mRNA及蛋白表达量降低.②OA处理能明显抑制细胞的糖摄取;经HN处理24 h后,肝细胞对荧光葡萄糖[2-(N-(7-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazol-4-yl)amino)-2-deoxyglucose,2-NBDG]的吸收呈剂量依赖性增加.③正常及TO、OA处理的HepG2细胞经HN处理24 h后,胞内CYP2E1的蛋白表达量较对照组明显降低,但HN给药仅抑制了经OA处理的HepG2细胞中CYP4A的蛋白表达量.上述结果表明,HN可通过抑制脂变性状态下肝细胞内SREBP-1c和PNPLA3的表达而降低肝细胞的脂堆积,通过下调肝细胞内CYP2E1、CYP4A的蛋白表达及促进肝细胞的糖摄取,改善肝细胞的脂质过氧化和胰岛素抵抗.
-
抵抗素及其结合多肽对大鼠骨骼肌细胞糖摄取功能的影响
目的 探讨抵抗素及其结合多肽(RBP)对大鼠骨骼肌细胞糖摄取功能的影响.方法 体外培养的大鼠骨骼肌细胞(L6)随机分为对照组,抵抗素(10 nmol/L)组,RBP(1 nmol/L)组、抵抗素(10 nmol/L)+RBP(1 nmol/L)组,培养0.5 h后,液闪计数法(LSC)观察L6细胞糖摄取功能的变化,RT-PCR、Western blot法检测葡萄糖转运载体(GLUT)4基因的表达及转位变化.结果 与对照组相比,抵抗素组糖摄取功能下降,RBP组及抵抗素+RBP组糖摄取功能无明显变化(P＜0.05);与抵抗素组相比,抵抗素+RBP组糖摄取功能明显上调(P＜0.05).4组L6细胞的GLUT4基因的蛋白表达及转位均无明显变化(P＞0.05).结论 抵抗素能抑制骨骼肌细胞的糖摄取;但对正常骨骼肌细胞糖摄取功能无明显影响;RBP但能有效拮抗抵抗素抑制骨骼肌细胞糖摄取的作用.
-
胰岛素对糖尿病大鼠下颌骨成骨细胞糖摄取的影响
目的:研究胰岛素对糖尿病大鼠下颌骨成骨细胞糖摄取的影响.方法:按照培养基中胰岛素的浓度(0,10-6mol/L),将对照组和糖尿病组成骨细胞分为N、N+Ins、DM、DM +Ins 4组,荧光显微镜观察它们对2-脱氧荧光葡萄糖(2-NBDG)的摄取能力.结果:2-NBDG的摄取量,20 min时由大到小依次为N+Ins>DM+Ins>DM>N;40min时依次为DM>N+Ins>N及DM+Ins.结论:胰岛素可以抑制糖尿病大鼠成骨细胞过高的糖摄取.
-
D-葡萄糖同系物作为人类肝癌细胞BEL-7402荧光探针的价值
目的 评价荧光D-葡萄糖同系物2-NBDG作为肝癌细胞BEL-7402荧光探针的价值.方法 肝癌细胞株BEL-7402培养24h后分为实验组及对照组,其中实验组加入5 mmol/L D-葡萄糖的DMEM培养基,对照组加入不合5 mmol/LD-葡萄糖的DMEM培养基,再将两组各分为两个亚组加入不同浓度的2-NBDG(0.3 mmol/L、1mmol/L),即共4组:0.3 mmol/L2-NBDG +5 mmol/L D-葡萄糖组、1 mmol/L 2-NBDG +5 mmol/L D-葡萄糖组、0.3 mmol/L 2-NBDG组、1mmol/L 2-NBDG组.比较各组细胞荧光强度,分析2-NBDG在肝癌细胞BEL-7402中的摄取及荧光成像情况,以及D-葡萄糖对2-NBDG的抑制竞争作用.结果 0.3 mmol/L 2-NBDG组的相对荧光强度为(78.72±3.78)％,低于1 mmol/L 2-NBDG组的(100.00±8.23)％(P＜0.05).0.3 mmol/L 2-NBDG +5 mmol/L D-葡萄糖组的相对荧光强度为(20.67±1.46)％,明显低于0.3 mmol/L 2-NBDG组的(78.72±3.78)％(P＜0.05).1 mmol/L 2-NBDG +5 mmol/L D-葡萄糖组的相对荧光强度为(22.23±2.01)％,明显低于1 mmol/L 2-NBDG组的(100.00±8.23)％(P＜0.05).结论 2-NBDG可被肝癌细胞BEL-7402快速摄取,并可通过荧光强度的方式量化其摄取程度,D-葡萄糖可竞争性抑制肝癌细胞BEL-7402对2-NBDG摄取.2-NBDG可以作为人源肝癌细胞株BEL-7402的检测荧光探针.
-
荧光D-葡萄糖同系物2-NBDG示踪和测定肝癌细胞HepG2细胞糖摄入的实验研究
目的：以荧光D-葡萄糖同系物（2-NBDG）为示踪探针，建立一种在活细胞中快速、直接检测糖摄入的敏感方法。方法通过培养肝癌细胞株HepG2，使用不同浓度的2-NBDG（0．3 mmol／L、1．0 mmol／L）处理20 min，用荧光显微镜观察细胞荧光强度，用IPP6．0软件分析细胞荧光强度。结果不同浓度2-NBDG（0．3 mmol／L、1．0 mmol／L）处理后，细胞荧光强度随剂量增加而显著增强（P＜0．05）。结论2-NBDG可以作为人源肝癌细胞株HepG2的荧光探测示踪剂进行糖摄入实验测定。本实验在细胞水平建立了简便可行的糖摄入能力评估方法，将有助于糖尿病的研究。
关键词： 糖尿病 荧光D-葡萄糖同系物 糖摄取 HepG2细胞 肝癌 -
格列美脲对高糖环境下大鼠下颌骨成骨细胞葡萄糖摄取的影响
目的：格列美脲对高糖环境下大鼠下颌骨成骨细胞葡萄糖摄取的影响。方法分离培养大鼠下颌骨成骨细胞，分别用不同糖浓度（5.5、16.5mmol·L-1）处理细胞，持续24h，加入或不加入10μmol·L-1格列美脲干预120min。采用氟-18标记的脱氧葡萄糖（18F-FDG）测定成骨细胞的葡萄糖摄取，Westernblot检测葡萄糖转运蛋白（GLUT）-1、GLUT-3表达水平。结果高糖浓度降低了成骨细胞的糖摄取能力和GLUT-3的表达，增加了GLUT-1的表达。格列美脲能够提高2种糖浓度下成骨细胞糖摄取的能力和GLUT-1、3的表达。结论格列美脲能够促进2种糖浓度下大鼠下颌骨成骨细胞的葡萄糖转运。
关键词： 格列美脲 成骨细胞 糖摄取 葡萄糖转运蛋白-1：葡萄糖转运蛋白-3
