解毒消斑散的薄层定性鉴别

目的:制定解毒消斑散的定性质量标准,以更好地控制质量,确保临床疗效.方法:采用TLC法对制剂中的栀子、大黄、黄连进行定性鉴别.结果:方中栀子、大黄、黄连均具有特征斑点.结论:所用方法特异性强、重现性好,可作为控制解毒消斑散质量的定性鉴别方法.

高效液相色谱法测定阿尔泰大黄中游离大黄酚的含量

目的:建立高效液相色谱法测定阿尔泰大黄中大黄酚含量的方法.方法:采用Shim-Pack VP-ODS(4.6×250L)色谱柱,以甲醇-0.45％磷酸溶液(85.5∶14.5)为流动相,流量1.0ml/min,检测波长为254nm.结果:大黄酚在0.1194 ～0.2989μg/ml范围内与峰面积成良好线性关系(r=0.999 9),平均加样回收率为97.65％,其相对标准差(RSD)为1.34％(n=6).结论:该法简便,经济,专属性好,可作为阿尔泰大黄的质量控制方法.

HPLC法测定肝胃气痛片中大黄酚的含量

目的建立高效液相色谱法测定肝胃气痛片中大黄酚的方法.方法采用C18柱,流动相为甲醇:0.1%磷酸(85:15),检测波长254nm,流速1ml·min-1,进样量10 μ L.结果线性范围为0.026-0.53 μ g,回收率为97.7%,RSD1.7%(n=5).结论本法简便、准确、快速、灵敏、重现性好,可供该制剂定量用.

高效液相色谱法测定大败毒胶囊中大黄酸、大黄素和大黄酚的含量

目的应用高效液相色谱法测定大败毒胶囊中大黄酸、大黄素、大黄酚的含量.方法以shim-pack ODS(4.6×150mm,5 μ m)为固定相,甲醇-0.1%磷酸(82:18)为流动相,检测波长为438nm.结果大黄酸、大黄素和大黄酚的线性范围分别为0.06-0.27 μ g,r=0.9998;0.05-0.22 μ g,r=0.9996;0.06-0.27 μ g,r=0.9998.平均回收率分别为97.8%,RSD=0.37%:98.9%,RDS=0.69%;98.1%,RDS=0.57%(n=6).结论本方法可作为该品种质量控制依据.

HPLC法测定保健食品中蒽醌类成分的含量

目的 建立测定保健食品中大黄酸、芦荟大黄素、1,8-二羟基蒽醌、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚含量的高效液相色谱法.方法 使用Symmetry@C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以甲醇+0.1%磷酸水溶液(80+20)为流动相,检测波长为254 nm.结果 大黄酸、芦荟大黄素、1,8-二羟基蒽醌、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚在0.014～0.280、0.014～0.280、0.0126～0.0252、0.0156～0.104、0.025～0.500和0.025～0.500μg/ml浓度范围内具有良好线性关系;平均加标回收率分别为91.5%、90.2%、85.3%、105.3%、87.7%和102.1%;相对标准偏差分别为6.21%、5.82%、7.11%、8.50%、7.35%和9.42%.结论 该方法简便、准确,有良好的重现性,技术参数指标符合食品理化分析的要求,可用于蒽醌类保健食品的质量控制.

清火片中大黄素和大黄酚的含量测定

目的:对清火片中大黄素和大黄酚的含量进行测定.方法:固定相为日本岛津C()键合硅胶柱φ4.6mm×150mm×5μm,流动相为甲醇-0.1%高氯酸(75:25),检测波长为254nm.结果:线性范围大黄素为3.652× 10-2-1.387μg,大黄酚为4.449×10-2-1.273μg,r均为1.000(n-6);平均回收率大黄素为99.56%(RSD-0.61,n-6),大黄素为99.22%(RSD-0.36,n-6).结论:本法简便,准确,灵敏度高,重现性好,可用于清火片成分的含量测定.

高效液相色谱法测定决明子中大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量

目的 探讨决明子中大黄素、大黄酚及大黄素甲醚的高效液相色谱测定方法.方法 采用NovapakC18色谱柱(250 mm× 4.6 mm,2.5 μm),选择甲醇:1.0％磷酸缓冲溶液(80:20)为流动相,柱温:25c℃,检测波长:254nm.结果 大黄素、大黄酚及大黄素甲醚分别在1.96～19.6 μg/mL(r=0.9998),3.57～35.7 μg/mL (r=0.9995),3.955～39.55μg/mL(r=0.9997)范围内线性关系良好;大黄素的平均回收率为99.508％(n=5),大黄酚平均回收率为98.506％(n=5),大黄素甲醚平均回收率为99.360％(n=5).结论 高效液相色谱法测定决明子中大黄素、大黄酚以及大黄素甲醚,结果准确、重复性好,可用于决明子中三种有效成分的含量测定的有效方法.

HPLC法同时测定血平片中大黄和三七含量

目的 对已有供试样品溶液的制备方法 及其色谱条件进行适当改变,得以实现一次性测定大黄(大黄素、大黄酚)及三七(三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1)含量的方法.方法色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.2％磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0 ml/min,检测波长为203 nm,柱温30℃.结果 血平片中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1、大黄素、大黄酚分别在1132.4～16986 ng(r=0.9991)、793～11895 ng(r=0.9983)、285.2～4278 ng(r=0.9992)、10.136～152.04 ng(r=0.9989)和12.652～189.78 ng(r=0.9994)与峰面积呈良好线性关系;平均回收率分别为95.3％、94.1％、93.1％、94.6％和93.6％.结论 该方法测定结果准确、可靠,具有可操作性和实际应用性,可进一步完善对该产品的质量控制.

130 毛细管电泳同时测定大黄素、大黄酚及其8-β-D-葡糖苷

RP-HPLC法同时测定三黄片中4种有效成分含量

目的 建立同时测定三黄片中盐酸小檗碱、黄芩苷、大黄素、大黄酚含量的RP-HPLC法.方法 采用Thermo Hypersil GOLD aQ色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm),以甲醇-0.1％磷酸水溶液为流动相,进行梯度洗脱,流速1.0 ml/min,柱温30℃,检测波长254 nm.结果 盐酸小檗碱、黄芩苷、大黄素、大黄酚的分离度均符合要求,线性范围分别为0～0.6348μg(r=0.9999)、0～1.0172μg(r=0.9999)、0～0.8024μg(r=0.9999)、0～0.9672μg(r=0.9999);平均回收率(n=9)分别为101.03％、99.81％、99.35％、99.54％;定量限分别为0.0363、0.0210、0.0497、0.0793 mg/g;供试品溶液在24 h内稳定,RSD(n=5)分别为0.48％、0.56％、0.68％、0.49％;方法耐用性良好,在不同柱温(±1℃)条件下,RSD(n=3)分别为0.57％、0.42％、0.44％、0.65％,不同流速(±0.1 ml/min)条件下,RSD(n=3)分别为0.74％、0.29％、0.46％、0.56％.12批样品中盐酸小檗碱、黄芩苷、大黄素、大黄酚含量分别为4.6303～5.5866、14.5514～18.8189、0.1711～2.7984、0.5299～2.9254 mg/小片.结论 本法经方法学验证,适用于三黄片的质量控制.

大黄酚及P38阻断剂对紫外线诱导人永生化表皮细胞光老化的影响及机制研究

目的 研究大黄酚及P38阻断剂SB203580抑制中波紫外线诱导的人永生化表皮细胞(HaCaT immortalizedhuman epidermal cells,HaCaT)光老化的作用及其作用机制.方法 采用MTT法检测不同浓度的大黄酚及SB203580对HaCaT细胞增殖的影响;将细胞按随机数字表法分为空白组、模型组、大黄酚组、P38阻断剂组.培养24 h后,大黄酚组及P38阻断剂组分别加入10-6 mol/L大黄酚及10-7 mol/L SB203580溶液.继续培养24 h,除空白组外,其他各组细胞于紫外灯下照射,照射强度0.61 mW/cm2,照射时间7 min,照射距离10 cm.继续培养24 h后,采用MTT法检测各组细胞的增殖活性;Western Blot检测各组细胞中P38、磷酸化P38(P-P38)、TNF-α 及IL-6蛋白表达.结果 与空白组比较,模型组HaCaT细胞增殖率降低(P<0.01);与模型组比较,大黄酚组及P38阻断剂组HaCaT细胞增殖率升高(P<0.01);与模型组比较,大黄酚组及P38阻断剂组细胞P-P38[(0.419±0.029)、(0.398±0.015)比(0.497±0.051)]、TNF-α[(0.435±0.025)、(0.411±0.021)比(0.509±0.040)]及IL-6[(0.457±0.027)、(0.432±0.018)比(0.478±0.036)]蛋白表达降低(P<0.01).结论 大黄酚及SB203580可抑制紫外线诱导的HaCaT细胞光老化,其作用机制可能与抑制P38MAPK通路及炎症因子表达有关.

高效液相色谱法测定麻仁润肠丸中大黄素、大黄酚的含量

目的 建立了麻仁润肠丸中大黄素、大黄酚含量测定方法.方法 采用BDS C18柱,以甲醇-0.1%磷酸(85:15),流速为1.0 ml/min,检测波长为254 nm,外标法定量.结果 发现大黄素在进样量0.03508～0.3508μg范围内,大黄酚在进样量0.09304～0.8304μg呈良好的线性关系;平均回收率大黄素为98.32%,RSD为1.05%(n=6),大黄酚为97.98%,RSD为0.46%(n=6).结论 该方法快速简便,结果准确,可用于麻仁润肠丸的质量控制.

高效液相色谱法测定排毒清脂片中大黄素、大黄酚的含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定排毒清脂片中的大黄素、大黄酚的含量.方法:色谱柱:Ultimate XB-C18柱(250mmx4.6mm,5μm);流动相:甲醇-磷酸溶液(85:15);流速:1mL·min-1;检测波长:254nm.结果:大黄素、大黄酚分离良好,进样量分别在0.007984～0.047904μg和0.01002～0.060121μg范围内与峰面积是良好线性关系,r值分别为0.9991和0.9998,平均回收率分别为99.18%和99.94%,RSD分别为1.19%和1.16%(n=5).结论:该方法简便、精确、分离效果好、专属性强,可作为排毒清脂片中大黄成分的质量控制方法.

荧光猝灭法研究大黄酚与牛血清白蛋白的相互作用

目的:运用荧光猝灭光谱研究了模拟人体生理条件下大黄酚与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.方法:以BSA为荧光剂,大黄酚为荧光猝灭剂,在激发波长278 nm下的荧光光谱,根据Stern-Volmer方程、位点结合模型和Lineweawer-Burk双倒数曲线方程,求出了大黄酚与BSA结合的结合类型、结合位点数和结合常数等参数.并利用Van't Hoff方程求得反应的热力学参数,讨论了大黄酚与蛋白质的主要作用力类型.结果:大黄酚与BSA形成复合物从而猝灭BSA的内源荧光,且其荧光猝灭机理符合静态机制.在25℃和37℃下大黄酚与BSA结合的结合常数分别为:4.923×104 L·mol-1和5.928×104 L·mol-1；结合分子数分别为:0.8551和1.0583.热力学数据表明大黄酚与BSA以疏水作用为主,同时也存在较弱的静电作用.结论:大黄酚在体内能够被血清白蛋白存储和转运,且结合时可能改变了BSA的构象.

HPLC梯度洗脱法同时测定决明子中橙黄决明素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量

目的:采用HPLC梯度洗脱法同时测定决明子中橙黄决明素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量.方法:用Kromasil 100A C18色谱柱(5μm,4.6mm×150mm,迪马公司);甲醇-0.1%磷酸溶液梯度洗脱:0～15min(65:35),15～16 min(65～85:35～15),16～40 min(85:15);柱温:室温;检测波长:285nm(0～15min),254nm(15～40min);流速:1mL·min-1.结果:橙黄决明素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的线性范围分别为0.00038～0.00608μg(r=0.9998)、0.0029～0.0464μg(r=0.9999)、0.00105～0.0168μg(r=0.9996)、0.00044～0.00704μg(r=0.9998),平均回收率分别为99.50%(RSD=0.71%)、99.59%(RSD=1.42%)、99.31%(RSD=0.59%)、99.74%(RSD=0.91%).结论:本方法专属性强,重复性好,可用于决明子中橙黄决明素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量测定.

HPLC法测定参附强心丸中大黄素、大黄酚的含量

5～1.554μg(r=0.9999),平均回收率为99.29%,RSD为0.32%,重复性RSD为0.59%(n=6),精密度RSD为0.63%(n=6),稳定性RSD为0.36%.结论:本文所得方法稳定、可靠,可作为该制剂的质量控制方法.

HPLC法测定四消丸中大黄素、大黄酚的含量

目的:建立四消丸中大黄素、大黄酚的含量测定方法,考察不同厂家四消丸的质量.方法:采用HPLC法,使用C18柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(85:15),检测波长为254 nm,流速为1.0 mL/min,按外标峰面积法计算含量.结果:大黄素、大黄酚线性范围分别为2.02～2.20 μg/mL和6.23～60.23μg/mL;平均加样回收率大黄素为97.4%,RSD为1.27%,大黄酚为98.2%,RSD为1.11%.不同生产厂家的四消丸中含大黄(以大黄素、大黄酚总量计)在0.07%～0.19%之间.结论:HPLC法可作为四消丸的质量控制方法之一.

铁包金按摩膏中铁包金超微粉与饮片质量对比研究

目的：采用 HPLC 建立铁包金按摩膏中铁包金中大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量测定方法，比较铁包金超微粉与饮片中上述3种成分的含量。方法：Hypersil C18柱（250 mm ×4.6 mm，5μm）；流动相：甲醇－0.2％甲酸水溶液，梯度洗脱；流速：1.0 mL／min；检测波长：290 nm；柱温：25℃。结果：大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的线性范围分别为1.13～51μg／mL（r2＝0.9999）、1.27～57μg／mL（r2＝0.9995）和2.22～40μg／mL（r2＝0.9998），加样回收率分别为99.58％、99.47％和99.27％，RSD 值分别为1.18％、1.49％和1.52％。结论：该方法灵敏度高，精密度好，对比超微粉末与饮片中3种成分含量发现，在相同提取方法中，超微粉中3种成分含量明显高于饮片，超微粉技术可提高铁包金中3种化学成分的提取率。

大黄酚对铅中毒小鼠学习记忆能力的影响

目的:研究大黄酚对铅中毒小鼠学习记忆能力及组织内铅水平的改善作用,并探讨其可能的作用机制.方法:采用连续8 dip7 mg?kg-1醋酸铅造成铅中毒小鼠模型,采用跳台实验,观察ip大黄酚(10.0,1.0,0.1 mg? kg-1)对铅中毒模型小鼠记忆能力的改善作用,并于大黄酚治疗14 d后测定小鼠心、肝、脾、肾内铅水平,同时测定小鼠肝、肾组织内丙二醛(MDA)含量及超氧化酶歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力.结果:连续8 dip7 mg?kg-1醋酸铅造成铅中毒小鼠模型学习记忆障碍,使小鼠心、肝、脾、肾内铅水平显著升高,小鼠肝、肾内SOD和GSH-Px活性显著降低,使MDA含量增加；而连续ip大黄酚14 d治疗后,可不同程度提高小鼠铅中毒后学习记忆能力,与模型组相比大黄酚治疗组均可显著降低心、肝、脾、肾铅含量(P＜0.01)；与模型组相比大黄酚10.0,1.0 mg?kg-1治疗组可显著升高肝、肾内SOD和GSH -Px的活性,降低MDA含量(P＜0.01),而大黄酚0.1 mg?kg-1治疗组可显著升高肾内SOD和GSH-Px的活性,降低MDA含量(P＜0.01),对肝内SOD,GSH-Px的活性及MDA含量无显著影响.结论:大黄酚可显著改善铅中毒小鼠学习记忆能力,降低铅中毒小鼠各组织的铅水平,提高小鼠肝、肾组织内抗氧化酶的活性,改善铅中毒造成的脂质过氧化.

半夏有效成分大黄酚对肿瘤坏死因子-α诱导人脑微血管内皮细胞的作用机制

目的:研究半夏有效成分大黄酚对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导人脑微血管内皮细胞(HBMEC)的作用机制.方法:体外培养HBMEC,用TNF-α诱导HBMEC造模,将细胞分为正常组、模型组、大黄酚组、依达拉奉组.采用噻唑蓝比色(MTT)法检测大黄酚对HBMEC增殖能力的影响,用逆转录PCR法(RT-PCR)检测TNF-α,白细胞介素-6(IL-6),IL-8 mRNA的表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测TNF-α,IL-6,IL-8,磷酸化氨基末端蛋白激酶(p-JNK)和磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)的含量,用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测p-JNK,total JNK,p-ERK和total ERK的蛋白表达.结果:在256 μmol·L-1浓度时,大黄酚对HBMEC细胞有明显的抑制作用(P＜0.01).与模型组比较,在64～128 μmol·L-1浓度时,大黄酚对模型细胞生长有明显的促进作用(P＜0.05);大黄酚组TNF-α,IL-6,IL-8 mRNA表达明显下降(P＜0.01);大黄酚组TNF-α,IL-6,IL-8,p-JNK和p-ERK的含量明显减少(P＜0.05);大黄酚组磷酸化JNK/JNK,磷酸化ERK/ERK表达明显下降(P＜0.05).结论:半夏有效成分大黄酚具有抑制TNF-α诱导HBMEC损伤作用,可能是通过下调ERK/JNK信号通路减少炎症相关因子TNF-α,IL-6和IL-8的表达.