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VITEK-2 Compact高级专家系统检测肠杆菌科碳青霉烯酶的性能评价
目的 评价VITEK-2 Compact仪器高级专家系统(Advanced expert system,AES)检测肠杆菌科碳青霉烯酶的性能,探讨AES在早期诊断产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌中的应用价值.方法 以VITEK-2 Compact全自动细菌鉴定和药敏系统进行细菌鉴定和药敏试验,筛选2010-2012年非重复临床分离的碳青霉烯类药物敏感性降低的肠杆菌科细菌,PCR检测碳青霉烯酶blaKPC、bla IMP、bla VIM、bla OXA-48及bla NDM-1基因型,阳性结果进行测序并Blast比对确定基因型,以基因测序结果为金标准,分析统计VITEK-2 Compact仪器AES检测肠杆菌科碳青霉烯酶的各项性能指标.结果 试验共收集62株碳青霉烯类敏感性降低的肠杆菌科细菌,包括肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、产酸克雷伯菌,分别占67.74％、19.36％、8.06％、4.84％;AES检测碳青霉烯酶阳性共58株,其中肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、产酸克雷伯菌,分别占68.97％、18.97％、6.89％、5.17％;经PCR扩增并测序证实27株为产IMP-4型基因菌株,包括肺炎克雷伯菌21株、阴沟肠杆菌4株、产酸克雷伯菌2株、20株为产IMP-8型基因菌株,包括肺炎克雷伯菌10株、阴沟肠杆菌6株、大肠埃希菌3株、产酸克雷伯菌1株,其他15株为碳青霉烯酶阴性菌株;AES检测肠杆菌科碳青霉烯酶的灵敏度为100.00％、特异性为26.67％,阳性预测值为81.03％、阴性预测值为100.00％,检验效能为82.26％.结论 VITEK-2 Compact仪器AES检测肠杆菌科碳青霉烯酶具有良好的灵敏度,临床微生物实验室应将检测信息第一时间提供给临床科室,以便及时采取隔离防护措施.
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VITEK-2 Compact高级专家系统对CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的检测分析
目的 评估VITEK-2 Compact(V2C)高级专家系统(AES)对CTX-M型ESBLs的检测分析能力.方法 随机抽取2010年1-8月AES所提示的产ESBLs菌株194株,进行CTX-M表型分析,并与聚合酶链反应(PCR)方法加以比较.结果 194株产ESBLs菌株经AES提示CTX-M型94株,检出率为48.5％,PCR证实携带CTX-M基因型164株,检出率为84.5％,差异有统计学意义(P＜0.05)；AES报告的94株CTX-M型产ESBLs,经PCR确认为89株,头孢他啶MIC值≤1μg/ml占95.5％,其耐药表型以CTX-M型为主,而漏检的75株中,头孢他啶MIC值≤1 μg/ml只占2.7％,其耐药表型大肠埃希菌以产ESBLs为主,肺炎克雷伯菌以产ESBLs或ESBLs+膜渗透障碍为主；AES与PCR漏检株对氨曲南、头孢他啶、头孢吡肟耐药率要高于符合株.结论 AES对混合型耐药机制的CTX-M型产ESBLs检测有一定的漏检；如需进一步进行产ESBLs的亚型研究或相关流行病学调查,仍需要以分子生物学方法进行验证.
关键词： 高级专家系统 产超广谱β-内酰胺酶 基因型 耐药 -
细菌耐药性分析系统应用体会
VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统是一种新型快速细菌鉴定和药敏试验自动化仪器,既经济又标准化,所有在线试验均保证标准化及质量控制过程,形成“质量保证链”.其系统中设置了高级专家系统(advance exporter system,AES)[1].其特点是:①该系统是根据细菌耐药规律而设定的,可帮助校正和修改结果.②提示不可能的或极少见的耐药表型,警示我们应予充分重视,需采用确认试验进行重新鉴定.
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MicroScan WalkAway仪器对碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌检测能力的评价
目的评价MicroScan WalkAway 96 Plus(MSW)全自动微生物分析仪在碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)鉴定与预警中的指导价值.方法同时用PCR法和MSW系统检测福建医科大学附属协和医院实验室保存的81株CRE.以纸片扩散法和PCR法为金标准,比较该分析仪器对CRE菌株鉴定及预测是否产碳青霉烯酶的可靠性.结果MSW判定CRE的符合率为69.1%(56/81).PCR检测有48株细菌携带碳青霉烯类耐药基因;仪器法检测这些菌株时,高级专家系统(AES)预测产碳青霉烯酶的灵敏度为93.8%,特异度为42.4%,阳性预测值为70.3%,阴性预测值为82.4%,准确度为72.8%.结论MSW系统对CRE具有较强的检测能力.
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评估VITEK 2-Compact GN13测定肺炎克雷伯菌体外亚胺培南药敏及高级专家系统修正的可靠性
目的评估VITEK 2-Compact GN13测定肺炎克雷伯菌体外亚胺培南药敏及高级专家系统(AES)修正的可靠性.方法回顾性研究2014-2015年南昌大学第一附属医院分离的157株肺炎克雷伯菌,分别采用纸片扩散法、VITEK 2-Compact GN13法及以微量肉汤稀释法作为参考方法测定该菌对亚胺培南的敏感性.分别评估纸片扩散法、VITEK 2-Compact GN13与参考方法的分类一致率(CA%).对经AES修正药敏的肺炎克雷伯菌采用改良Hodge试验等表型确证试验及PCR、测序法等分子生物学方法,对AES中提示的耐药机制进行验证,评估AES修正GN13测定肠杆菌科细菌体外亚胺培南药敏试验结果的可靠性.结果157株菌中64株经微量肉汤稀释法检测为耐药株,8株为中介;纸片扩散法检测52株为耐药株,10株为中介;VITEK 2-Compact GN13检测54株为耐药株,13株为中介,而经AES修正后70株为耐药株,3株为中介.纸片扩散法和VITEK 2-Compact GN13与参考方法的一致率均>90%;但在使用VITEK 2-Compact GN13与纸片扩散法测定亚胺培南时会出现一定比例的大错误(ME,3.8%)和极大错误(VME,0.6%).AES对16株菌株进行了亚胺培南药敏修正,虽然消除了0.6%的VME,但却增加1.3%的ME和1.9%的小错误(MIE)出现.表型验证显示75.0%(12/16)表现为产ESBL联合产碳青霉烯酶,与AES推测相符,PCR及测序显示62.5%(10/16)为IMP-4/KPC-2/NDM-1联合产ESBL.结论无论采用VITEK 2-Compact GN13还是纸片扩散法,对肺炎克雷伯菌亚胺培南体外药敏的测定均较可靠,但都应注意可能出现ME及VME,使用AES修正虽可避免VME的出现,但会增加ME和MIE的出现,这或与碳青霉烯酶表达降低有关.
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Phoenix-100全自动微生物分析系统对碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌鉴定及预警能力的评价
目的 评价Phoenix-100全自动微生物分析系统检测碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(Carbapenem-resistant Enter-obacteriaceae,CRE)的性能及预警中的指导价值.方法 以本实验室保存的93株CRE为研究对象,Phoenix-100全自动微生物分析系统进行细菌鉴定及药敏试验;PCR法检测常见碳青霉烯类耐药基因(blaKPC、blaIMP、blaVIM、blaOXA-48和blaNDM);以PCR为金标准,评价Phoenix-100全自动微生物分析系统在鉴定及预测CRE是否产碳青霉烯酶的可靠性.结果 Phoenix-100全自动微生物分析系统鉴定实验CRE的符合率为41.9％(39/93),其高级专家系统(AES)筛检碳青霉烯酶阳性的符合率为80％(44/55);PCR法检测发现55株CRE携带碳青霉烯类耐药基因;Phoenix-100全自动微生物分析系统检测试验菌株时,高级专家系统在提示产碳青霉烯酶方面灵敏度为52.7％,特异性为60.5％,阳性预测值为65.9％,阴性预测值为46.9％,准确度为55.9％.结论 Phoenix-100全自动微生物分析系统对CRE检出率较低,其高级专家系统产酶信息预警灵敏度也较低.
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VITEK-2检测超广谱β-内酰胺酶结果的评价
目的:分析VITEK-2检测肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的准确性和可靠性,并了解本院产ESBLs的情况.方法:将VITEK-2所鉴定的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别进行VITEK-2的药敏试验和纸片扩散确证法(头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸组、头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸组)检测,然后将两组数据进行统计学分析.结果:在38株肺炎克雷伯菌和28株大肠埃希菌中,两种方法都产ESBLs有33株(50.0%),都未产ESBLs有30株(45.5%),而VITEK-2产ESBLs但确证法未产的有2株(3.0%),VITEK-2未产ESBLs但确证法产的有1株(1.5%).其中,肺炎克雷伯菌产ESBLs有18株(47.4%),大肠埃希菌产ESBLs有16株(57.1%).结论:VITEK-2的ESBLs检测结果与确证试验的检测结果阳性符合率为91.7%,所以VITEK-2检测ESBLs准确、可靠,同时证实本院感染细菌产ESBLs比率较高.
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评价VITEK 2判定肠杆菌科细菌产ESBL的可靠性
目的用纸片扩散确证法评价VITEK 2高级专家系统判定肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的可靠性[1].方法对414株肠杆菌科细菌(其中肺炎克雷伯菌144株、大肠埃希菌174株和阴沟肠杆菌96株),用VITEK 2测定产ESBLs株,同时用NCCLS(2004年版)推荐的纸片扩散确证法进行对照.结果仪器法和纸片扩散确证法检测ESBLs菌株阳性率分别为46.4%和43.5%,两种方法对上述3种细菌产ESBLs的检测结果分别经χ2检验,均为P>0.05,无显著差异.产ESBLs菌株耐药率高于产酶菌株.结论提高ESBLs菌株的阳性检出率及准确性具有重要意义.VITEK 2高级专家系统的ESBLs判定结果准确可靠.
