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水蛭对糖尿病大鼠视网膜微血管形态的影响
目的探讨水蛭对糖尿病大鼠视网膜微血管形态的影响.方法 40只SD大鼠随机分成正常对照组、链脲佐菌素糖尿病模型组与水蛭干预组.将水蛭(每天1.67g/kg)混入普通饲料给药.180天后测血液流变指标、血浆一氧化氮(NO)水平、丙二醛(MDA)含量以及全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及纤溶酶原激活抑制剂(PAI)活性等,对视网膜血管铺片进行光镜及透射电镜观察.结果病程6个月的模型组大鼠的血液存在明显的高凝、高粘现象,并出现了周细胞减少、微血管瘤、无细胞毛细血管及影周细胞等早期糖尿病视网膜病变的特征性改变.水蛭干预组视网膜病变与模型组相比明显较轻.结论水蛭对早期糖尿病大鼠视网膜病变具有良好的防治作用,可能与其能减轻氧自由基损伤、提高抗脂质过氧化作用,增强纤溶性及改善血流变学指标有关.
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水蛭提取液对体外培养牛晶状体上皮细胞生长抑制的实验研究
目的 观察水蛭提取液对体外培养的牛晶状体上皮细胞(LEC)生长的影响,探讨水蛭用于防治后发性白内障的可能性.方法 采用植块培养法,对牛晶状体前囊膜进行培养.利用水蛭水提醇沉提取液,观察传代培养48小时的LEC加入不同浓度提取液培养24和72小时后的生长情况,以MTT法测定OD值,并求出半效抑制量(ID50).传代的LEC加入提取液高剂量(ID50)及低剂量(1/10ID50)培养24小时,观察贴壁抑制情况.结果 水蛭水提醇沉提取液抑制LEC生长的24和72小时ID50分别为31.85mg/ml、30.69mg/ml;与空白组比较,水蛭水提醇沉液对LEC贴壁有明显抑制作用(P＜0.01).结论 水蛭水提醇沉液能同时抑制体外培养的LEC生长及贴壁,为水蛭提取液用于防治后发性白内障提供了实验依据.
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水蛭提取液对视网膜色素上皮细胞内游离钙离子的影响
目的 观察水蛭提取液对视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)内游离钙离子(Intracellular liber calcium ion,[Ca2+]i)浓度的影响.方法 利用体外培养的视网膜色素上皮细胞,采用双波长荧光分光光度计测量法测定视网膜色素上皮细胞内[Ca2+]i浓度.结果 空白组(A)133.4517±13.17789、凝血酶组(A1)192.2037±4.54292、水蛭组(A2)96.9935±8.80148、水蛭和凝血酶同时加组(A3)142.0867±26.47195、先加水蛭后加凝血酶组(A4)162.7284±29.13950、先加凝血酶后加水蛭组(A5)130.4810±20.48673.结论 水蛭提取液能使RPE细胞内游离Ca2+浓度下降,为进一步深入研究水蛭提取液抑制RPE细胞增殖的作用机制,防治增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)提供了实验室依据.
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水蛭提取液对凝血酶诱导的视网膜色素上皮细胞增殖的影响
目的观察渗滤法水蛭提取液对体外培养视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)增殖的影响.方法利用体外培养的视网膜色素上皮细胞,观察水蛭提取液对凝血酶诱导的视网膜色素上皮细胞增殖的影响.结果128mg/ml水蛭提取液对体外培养的视网膜色素上皮细胞具有抑制增殖的作用.结论水蛭提取液对体外培养的视网膜色素上皮细胞具有抑制增殖的作用.
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西藏林芝地区吸血蚂蟥的生态学调查
目的 调查西藏林芝、墨脱一线山地蚂蟥生态习性及危害状况,为研究和制定防治方法提供数据.方法 沿G318国道,采取"线路法"、"点线结合法"及"访问法",同时记录调查时的地理经纬度和实时环境温度和湿度.结果 与结论西藏林芝、墨脱的山地蚂蟥的种类优势种为斯里兰卡山蛭,模式亚种Haemadipsa zeylanica zeylanica(Moquin-Tandon,1826),又名斑纹山蛭,该山蛭每年的季节高峰在3~8月,尤其是6~7月.蚂蟥分布范围在通麦、墨脱一带,地理位置位于北纬29.~34.,东经95.左右,海拔高度在2000 m以下的地区.活动地区环境中平均温度~22.3℃,高温度43.9℃,低温度13℃;平均相对湿度55.3%,高湿度78%,低湿度22.9%.调查地段从林芝到通麦,沿路调查点,海拔高度2052-3181 m,蚂蟥在2052 m的调查点通麦发现.人体诱捕蚂蟥平均指数为7.1条/15 min.
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水蛭粉与煎剂对老龄自发性高血压大鼠血压 血脂及血流动力学的影响
目的观察水蛭粉及煎剂对老龄自发性高血压大鼠(SHR)血压、血脂及血流动力学的影响.方法将18只SHR随机分为SHR组、水蛭粉组(粉剂)及水蛭液组(煎剂),并与Wistar大鼠作对比,首次给药前、后12h内观测各组血压变化,连续给药7d后,处死各组大鼠取血检测各指标.结果老龄SHR血脂、血流动力学指标显著高于健康老龄Wistar大鼠,给予水蛭粉与水煎剂后均有明显下降,水煎剂与粉剂效果近似.急性降压实验显示,灌服水蛭粉与水煎剂后1h血压即见下降,3～9h时下降幅度较大,水蛭煎剂降压起效时间早于粉剂.结论老龄SHR大鼠血脂、血流动力学指标显著高于健康老龄Wistar大鼠,.水蛭有降低老龄SHR大鼠血压、血脂及改善血流变作用,其煎剂降压起效时间早于粉剂,水蛭的降血压作用可能与其降脂、改善血流动力学、从而降低外周阻力的作用有关.
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仲景方中水蛭用药剂量研究
本研究拟采用文献考证药物品种、产地、炮制与药物实测相结合的方法,并利用数据统计学处理方法,对仲景方中水蛭剂量开展古今折算研究.研究得出,仲景方中水蛭应为日本医蛭Hirudo nipponica Whitman的干燥全体,抵当汤中水蛭30个为45.87 g,抵当丸中水蛭20个为30.58 g,大黄蟅虫丸中水蛭100枚为152.9 g.本研究力求大限度地接近仲景方水蛭剂量及相关经方配伍比例的原貌.
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水蛭活血成分研究及临床应用
水蛭,首载于<神农本草经>,属于活血化瘀药,功用破血通经,逐瘀排脓.研究表明,水蛭的活血成分水蛭素、多种氨基酸及微量元素具有抗凝血及改善微循环的作用,广泛应用于心脑血管疾病及糖尿病肾病的实验研究中,现就水蛭的活血成分及临床应用作一阐述.
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水蛭和虻虫不同剂量配伍对血瘀大鼠血液流变学指标的影响
目的:观察水蛭和虻虫不同剂量配伍对血瘀大鼠血液流变学的影响,探讨药对剂量配比的合理性.方法:将大鼠随机分为空白对照组、模型对照组和4个不同剂量比的水蛭、虻虫配伍组(水蛭:虻虫分别为3:4,4:3,3:1,6:1,总剂量均为1 200 mg·kg-1).连续给药7 d.于d 6给药1 h后,除空白对照组外,其余各组以皮下注射盐酸肾上腺素及冰水浴复制大鼠血瘀证模型.次晨给药后2 h采血,测定血液流变学指标.结果:不同配比的水蛭、虻虫药对均能明显改善大鼠血瘀模型的血液流变学异常,其中配伍2组(4:3)、配伍3组(3:1)对血细胞比容、红细胞聚集指数的作用较强.配伍3组(3:1)对血浆黏度、卡松黏度的作用较强.配伍3组(3:1)、配伍4组(6:1)对血全黏度和全血还原黏度作用较强;配伍4组(6:1)对红细胞变形指数作用较强.结论:在总剂量相同的条件下,水蛭剂量相对较大的配伍组(3:1,6:1)对血液流变学指标的作用较明显.
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柱前衍生化HPLC法测定疏血通注射液及其原药材中糖的含量
目的:测定疏血通注射液及其原药材水蛭、地龙中游离糖和多糖的含量.方法:采用PMP柱前衍生化法,对疏血通注射液及水蛭、地龙药材进行分析,色谱柱为Phenomenex Prodigy ODS-3 (250 mm×4.6 mm,5μm)；流动相为20 mmol·L-1醋酸铵-乙腈,梯度洗脱；检测波长为254nm；流速为1.2 mL·min-1.结果:在确定的分析条件下,葡萄糖、甘露糖和半乳糖在测定范围内都有良好的线性,甘露糖的平均回收率为101％,葡萄糖的平均回收率为96.8％,半乳糖的平均回收率为97.3％.结论:该方法简便、准确、稳定,适合用于疏血通注射液及原药材中游离糖和多糖含量的测定.
关键词： 疏血通注射液 水蛭 地龙 柱前衍生化 1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮 -
活血通脉胶囊含量测定方法的探讨
目的:采用<中国药典>2010年版一部水蛭项下的含量测定方法对活血通脉胶囊进行了含量测定,为其质量控制建立方法.方法:参照药典方法进行了相应的方法学考察,对制剂和药材的实验结果进行了统计分析.结果:活血通脉胶囊(0.25 g/粒)含量测定均值为0.4 U/粒,水蛭药材为1.6 U·g-1,两种含量均值之间的统计检验t值为0.312.结论:两种含量均值之间不存在显著的统计学差异.以药典现行方法对活血通脉胶囊进行含量测定是可行的,此方法简单、快速,测定结果准确可靠,可用于活血通脉胶囊的质量控制.
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宽体金钱蛭新鲜药材抗凝血有效成分分析
目的 对中药水蛭品种之一的宽体金钱蛭鲜品药材中抗凝血的活性成分进行提取、分离及纯化,并进行抗凝活性检测.方法 采用凝胶色谱等方法对活性成分进行提取、分离及纯化;采用HPLC对单体蛋白进行纯度检查;采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法和质谱法测定蛋白单体的分子量;通过单体蛋白对家兔全血凝固时间的影响和对家兔血浆复钙时间的影响进行抗凝血活性检测.结果从宽体金钱蛭新鲜药材中分离出3个蛋白质单体,分子量分别为12042.57 Da、15580 Da、24416 Da,经检测有两个蛋白单体具有抗凝血活性.结论从非吸血类水蛭药材的宽体金钱蛭体内也可分离出具有抗凝血作用的活性物质.
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简述几种常用具有抗肿瘤作用的有毒动物药
本文对全蝎、蜈蚣、斑蝥、守宫、蟾蜍、土鳖虫、水蛭、露蜂房八种有毒动物药就其抗肿瘤作用,在化学成分、临床应用等方面进行了简要论述,以供临床医师和药剂师参阅.
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生物检定技术应用于水蛭抗凝血活性测定的研究
目的 将生物检定技术应用于水蛭抗凝血活性的测定,探讨反映水蛭生物活性的质量控制方法.方法 采用肝素钠作为对照品,选择活化部分凝血酶时间值作为抗凝活性评价依据,对宽体金线蛭、日本医蛭、菲牛蛭、棒纹牛蛭的抗凝活性进行测定,测定结果分别用标准曲线法和生物检定统计法计算.结果 4种水蛭活性部分凝血酶时间法的量效关系曲线与肝素的量效关系曲线类似,突跃范围呈平行关系,上述特点符合生物检定的要求,以肝素钠作为标准品,采用生物检定技术活性部分凝血酶时间法测定水蛭等的抗凝活性是可行的.结论 活化部分凝血酶时间值可以全面反映水蛭的抗凝血作用,测定结果对临床使用更具指导意义.生物检定技术应用于中药质量评价,是对现有中药质量标准控制方法良好的补充.
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水蛭体外抗凝血实验研究及其生物活性测定方法反应体系的筛选
目的 筛选出水蛭活血化瘀作用的抗凝血反应体系,并基于该反应体系建立水蛭体外生物活性法,为水蛭的质量控制奠定基础.方法 将不同浓度的水蛭浸提液加入富血小板血浆(PRP)和乏血小板血浆(PPP)中,分别测定6 min内的血小板大聚集率和凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原-凝血酶时间(Fibg-TT),观察水蛭浸提液浓度与上述指标的量效关系.结果 水蛭能增加血小板聚集率,对凝血酶原时间未见显著性的影响,能显著延长活化部分凝血酶时间、凝血酶时间和纤维蛋白原-凝血酶时间,在一定的浓度范围内,水蛭浸提液浓度与凝血酶时间和纤维蛋白原-凝血酶时间对数凝固时间呈现较好的线性关系(r1 =0.987 4;r2=0.995 0),与活化部分凝血酶时间凝固时间同样具有较好线性关系(r3 =0.997 0),因此可以采用生物检定法中的量反应平行线法测定水蛭的抗凝血活性.结论 活化部分凝血酶时间、凝血酶时间和纤维蛋白原-凝血酶时间反应体系可以用于水蛭体外生物活性测定方法的建立,量化水蛭的抗凝血活性(效价),为水蛭的质量控制奠定基础.
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《中国药典》与《欧洲药典》用于水蛭药材生物检定计算模型的比较
目的 探寻适合不同水蛭生物检定的计算方法,达到以统一标准衡量不同水蛭活性的目的.方法 以肝素钠为标准品,将宽体金线蛭、日本医蛭及菲牛蛭的活化部分凝血酶时间值检定结果,分别采用《欧洲药典》7.0斜率模型及《中国药典》2015年版量反应平行线模型进行比较计算.结果 3种水蛭的对数量反应曲线均能呈直线关系,能满足两种生物检定计算法的要求.《欧洲药典》斜率模型完全随机化(0,3,3)法适合此3种水蛭的生物检定计算,但《中国药典》量反应平行线3,3法仅适合于菲牛蛭的生物检定计算.结论 以肝素钠抗凝效价为标准,采用《欧洲药典》斜率模型完全随机化(0,3,3)法,可达到统一标准衡量不同品种水蛭活性的目的.
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高效液相色谱法测定宽心合剂中芍药苷的含量
宽心合剂为我院自制制剂,由赤芍、水蛭、丹参等10味中药组成,具有活血化淤、补气通络的功效,用于冠心病、心绞痛、高粘血症所引起的胸痛、心悸、气短等症的治疗.我们参照有关文献]1～3],采用高效液相色谱法测定合剂中赤芍的主要成分芍药苷的含量,旨在为控制制剂质量提供依据.
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HPLC法测定脑复苏胶囊中盐酸小檗碱的含量
脑复苏胶囊是由黄连、水蛭、乙酰水杨酸等药物制成的新制剂.具有活血化瘀、清热解毒之功效.临床用于缺血性脑血管疾病引起的半身不遂口舌歪斜、头昏目眩,以及脑动脉硬化和血管性痴呆等症的治疗及预防.黄连是组方的主要药物之一,其有效成分之一为盐酸小檗碱[1].本文采用HPLC法测定该胶囊中盐酸小檗碱的含量,以期建立该制剂的质量控制标准.
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采用电感耦合等离子质谱法检测水蛭药材中重金属的含量
目的 检测水蛭药材中重金属的含量,为保障水蛭药材安全用药提供依据.方法 采用电感耦合等离子质谱(ICP-MS)技术,检测不同产地、不同部位水蛭药材中6种重金属的含量.结果 不同产地水蛭药材中汞、铅和镉3种元素的含量基本符合国家现行标准规定,部分砷元素超出国家有关现行标准.但是不同产地水蛭药材中铜和铬2种元素的含量均超出国家现行有关标准.水蛭药材不同部位中重金属的含量存在明显的差异性,在头部少,中部次之,尾部多.结论 水蛭药材中各重金属含量存在明显的产地、部位差异性,研究结果能够为保障水蛭药材的质量和用药安全提供重要参考依据.
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水蛭在男科疾病中的运用举隅
1 精液不液化症中医认为精血同源,而精瘀与血瘀同理,治当同法,故精液不液化症这一精液瘀结证当以活血化瘀法治疗.用药选"善破冲任之瘀"的水蛭,应用于临床观察多有效验,今举例示之:
