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蛋白质芯片飞行质谱技术检测体外培养的肝癌细胞株与转染HBV的肝癌细胞株蛋白质的差异表达
目的:运用SELDI蛋白质芯片技术检测体外培养的肝癌细胞株(HepG2)与转染乙肝病毒的肝癌细胞株(HepG2.2.15)蛋白质的差异表达,从而为进一步研究肝癌的发病机制奠定基础.方法:常规培养上述两种细胞,细胞状态良好时收集细胞,裂解细胞后采用SELDI-TOF-MS技术用WCX2芯片检测HepG2、HepG2.2.15蛋白质组学的差异.结果:WCX2芯片共捕获91个蛋白,其中HepG2、HepG 2.2.15细胞差异蛋白共19个,9个蛋白在HepG2细胞中表达量增高,10个蛋白在HepG2细胞中表达量降低.通过在Swiss蛋白数据库中搜索,发现Mr11081蛋白与钙结合蛋白S100 A10相符,其他几种蛋白暂时寻找不到.结论:SELDI蛋白芯片技术检测肝癌细胞株与转染乙肝病毒的肝癌细胞株蛋白质的差异表达方法简便,敏感性高,重复性好,本文发现的这些组织特异性蛋白生物标记对我们从血清或组织标本中筛选和鉴定不同型别肝癌细胞之间的标志蛋白有重要意义.
关键词: SELDI蛋白质芯片 肝癌 蛋白表达 -
运用SELDI蛋白质芯片技术检测Vero细胞感染HSV-1后蛋白质的差异表达
目的 运用SELDI(Surface Enhanced Laser Desorption/Ionization)蛋白质芯片技术检测Vero细胞感染HSV-1后蛋白质的差异表达,从而为从蛋白质水平研究HSV-1感染的致病机制奠定基础.方法 常规培养Vero细胞,感染HSV-1,孵育12 h、24 h、48 h后用细胞裂解液裂解细胞.裂解上清经蛋白定量后应用IMAC3(固定金属亲和)和WCX2(弱阳离子交换)芯片,SELDI-TOF-MS技术检测细胞感染HSV-1前后蛋白质表达的差异.结果 感染24 h细胞出现明显细胞病变效应(CPE),感染12 h质谱分析即可见蛋白的差异表达.共19个蛋白表达水平发生变化,其中IMAC3芯片发现差异峰9个, WCX2芯片发现差异峰10个.结论 SELDI蛋白质芯片技术检测Vero细胞感染HSV-1后蛋白质的差异表达方法简便,敏感性高,从而为从蛋白质水平研究HSV-1感染的致病机制,HSV-1与宿主细胞的相互作用,及抗感染治疗靶位的寻找奠定了一定的基础.
关键词: SELDI蛋白质芯片 Vero细胞 HSV-1 蛋白表达 -
SELDI蛋白质芯片技术在结直肠癌临床诊断中的应用及发展前景
结直肠癌是消化系统常见的恶性肿瘤.近年来,随着我国生活条件和饮食习惯的改变,结直肠癌发病率呈明显上升趋势.目前对结直肠癌的检查手段主要有大便隐血试验、血清学肿瘤标记物检测、消化道钡剂灌肠、肠镜及其他影像学检查方法,但检测的阳性率和准确性都较低,或者为侵入性检查,重复性较差.寻找结直肠癌特异性的早期诊断方法,是临床亟待解决的问题.