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应用血小板图和快速血栓弹力图评价体外凝血功能
自的 用血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa抑制剂阿昔单抗在体外抑制全血中血小板来观察血小板图(PlateletMapping(R))技术的方法学可靠性,并对血小板图和凝血激活检测试剂盒(Rapid TEGTM,快速血栓弹力图)两种方法进行评估.方法 根据临床性能评价的要求,将不同浓度的阿昔单抗与健康志愿者全血混合后进行血小板图测试,并用Rapid TEG试剂盒测定肝素抗凝血的活化凝血时间(TEG(R) ACT)等参数,计算两种方法的线性、重复性和有效性.结果 随着阿昔单抗浓度的升高,除纤维蛋白原以外各激活方式凝集曲线的MA都有明显的线性减低;在(1～4)×10-2 mg阿昔单抗作用下,不同通道和系统的血小板抑制率重复性良好(CV＜10%);加入阿昔单抗后,AA激活途径的血小板抑制率由28.0%±2.8%升至63.4%±0.0%(t=21.9,P＜0.01);ADP激活途径血小板抑制率由35.9%±0.56%升至91.4%±1.1%(t=58.9,P＜0.01).TEG(R) ACT与肝素呈现明显的剂量线性关系;快速血栓弹力图检测参数除R以外,K、α、MA和TEG(R)ACT的测量重复性良好(CV＜5%).结论 血小板图能够灵敏地反映出血小板所受抑制程度的不同,具有良好的测量精密度和剂量效应关系.Rapid TEG在以TEG(R) ACT监测肝素浓度的同时,还提供了对总体凝血功能的分析.
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抗HBs Fab-IFNα融合蛋白的制备与初步鉴定
目的 构建抗HBsAg的pComb Fab-IFNα载体,原核表达具双重生物活性的抗HBs Fab-IFNα融合蛋白.方法 以pBAD-Fab和pBAD IFNα作为模板,分别扩增Fd、λ和IENα基因,经相应的限制性内切酶酶切后分3次克隆人pComBHss质粒,转化XL-1 Blue大肠埃希菌.限制性酶切和测序鉴定重组质粒,免疫蛋向印迹(Western blotting)和斑点印迹(Dot blotting)鉴定融合蛋白的表达及抗原结合活性.结果 重组载体的酶切、电泳及测序表明抗HBs Fab-IFNα基因克隆正确.表达产物经12%SDS-PAGE电泳、转印,Western blotting显示该融合蛋白分子量约为65kD,Dot blotting显示其与HBsAg具有结合能力.细胞病变抑制法测定IFNα生物学活性为7.8×104～5.1×105U/ml.结论 该原核系统成功表达了抗HBs Fab-IFNα融合蛋白,表明其既具有抗HBsAg结合能力,又具备IFNα的生物活性,为进一步的系统表达和应用研究提供了条件.
关键词： 免疫球蛋白Fab碎片 干扰素α 肝炎表面抗原 乙型 肝炎病毒 -
46例白血病细胞免疫表型分析
目的:探讨白细胞免疫表型在白血病诊断中的临床价值及意义.方法:用23种单克隆抗体(CD),用流式细胞仪对46例白血病患者骨髓单个核细胞进行测定.结果:各型白血病主要表达本系列特异抗原,B-ALL可见表达髓系抗原,髓系也可见表达淋系抗原,M3较少表达CD34和HLA-DR;2例混合型白血病(HAL)表达CD+34,CD+13,CD+33,CD+19,CD+10,CD+20,CD+38.1例M0患者.结论:白血病细胞具有高度异质性;FAB与免疫分型同时结合可互相补充,提高诊断率.淋巴细胞增殖性疾病进行免疫表型分析有准确诊断的重要意义.
关键词： 白血病 免疫表型分型 免疫球蛋白Fab碎片
