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血管内皮生长因子在大鼠角膜碱烧伤中的表达
眼角膜碱烧伤是临床上常见的致盲性眼外伤之一,对其损伤机制的研究一直受到人们的重视.深入研究其发病机制,或许可以找到新的治疗方法.碱烧伤后新生血管的增殖导致了严重的并发症,是治疗的关键,研究血管内皮生长因子(VEGF)的表达特点,为临床治疗新生血管寻找一种新的方法.
关键词： 角膜/损伤 烧伤 化学/病理学 血管内皮生长因子A/代谢 -
血清VEGF水平在小细胞肺癌诊治中的临床意义
目的 探讨血清血管内皮生长因子(serum vascular endothelial growth factor,sVEGF)水平在小细胞肺癌( SCLC)诊治中的临床价值.方法 用放射免疫的方法检测69例未经任何治疗的SCLC患者sVEGF水平以及治疗后的sVEGF水平,同时用相同方法检测了50例健康体检者的sVEGF水平作为对照,分析SCLC患者与健康体检者的sVEGF水平差异,并分析SCLC患者sVEGF水平与临床分期及治疗效果之间的关系.结果 SCLC组sVEGF水平[(236.83±72.35)ng/ml]明显高于健康对照组[(114.18±27.57) ng/ml,t=12.853,P＜0.001],广泛期患者的sVEGF浓度[(263.09±81.30) ng/ml]高于局限期浓度[(204.63±42.04)ng/ml,t=-3.846,P＜0.001],治疗有效组治疗后sVEGF水平[(129.43±29.12) ng/ml]低于治疗前[(236.90±68.76)ng/ml,P＜0.05],治疗无效组治疗后sVEGF水平[(236.72±78.60) ng/ml]与治疗前[(258.70±72.93) ng/ml,t=-1.100,P=0.281]无明显变化.结论 sVEGF浓度检测有助于SCLC诊断,监测治疗前后SCLC患者sVEGF浓度变化对评价治疗效果具有积极的意义.
关键词： 血管内皮生长因子A/代谢 癌 小细胞/诊断/治疗 肺肿瘤/诊断/治疗 -
大肠癌患者VEGF、nm23及COX-2表达的临床意义
目的:探讨人大肠癌组织中VEGF、nm23和COX-2表达与临床意义.方法:应用免疫组化方法,检测60例大肠癌组织中VEGF、nm23和COX-2表达,分析其与大肠癌患者预后的关系.结果:VEGF、COX-2表达依大肠癌临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期顺序而上升(P＜0.05),同时与大肠癌有无淋巴结转移密切相关(P＜0.05).VEGF、COX-2阴性表达患者3、5 a生存率高于阳性表达组(P＜0.05).VEGF、COX-2阴性表达组nm23表达高于阳性表达组(P＜0.05).结论:VEGF、nm23、COX-2可作为估计大肠癌预后的指标.
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槐耳清膏对结肠癌SW480细胞生长抑制作用及机制研究
目的:探讨槐耳清膏对体外培养人结肠癌SW480细胞生长抑制作用及其作用机制.方法:采用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法检测槐耳清膏对SW480生长抑制作用并探求佳作用浓度;体外培养SW480细胞48 h,随机分为常氧组(NC组)、低氧组(HC组)和低氧槐耳组(HH组).半定量RT-PCR检测SW480细胞血管内皮生长因子(VEGF) mRNA表达水平,Western blot检测蛋白表达水平.结果:槐耳清膏对SW480细胞抑制率随药物浓度增加而上升,1 mg/ml时抑制率大(66.7%),与5-FU组(浓度为10 μg/ml)相比无统计学意义.HH组和HC组VEGF mRNA表达均显著高于NC组4.71±0.07,4.54±0.02和1.19±0.03(P<0.05),但HH组与HC组比较差异无统计学意义.HC组VEGF蛋白表达显著高于NC组0.66±0.03和0.38±0.02(P<0.05),HH组较HC组VEGF蛋白表达均显著下降0.37±0.03和0.66±0.03(P<0.05).结论:槐耳清膏可抑制SW480细胞生长,1mg/ml时抑制率大.机制为槐耳清膏下调SW480细胞内VEGF蛋白表达抑制肿瘤.
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HIF-1α和VEGF在骨肉瘤组织中的表达及其与血管生成的关系
目的 观察HIF-1α和VEGF在骨肉瘤组织中的表达,并分析两者相关性,同时探讨其在骨肉瘤血管形成中所起的作用.方法 应用免疫组织化学SP法,检测35例骨肉瘤、14例骨软骨瘤中HIF-1α和VEGF的表达情况,同时用CD34标记血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD).结果 35例骨肉瘤组织中,HIF-1α蛋白的阳性表达率为34.3％(12/35),与对照组相比差别有非常统计学意义(P＜0.01)；VEGF的阳性表达率为82.9％(29/35),亦显著高于对照组(P＜0.01); HIF-1α和VEGF的表达同时呈阳性,13例(37.1％)同时呈阴性,两者表达显著相关(r=0.589,P=0.000),且与癌组织分期显著相关(P＜0.05)；HIF-1α和VEGF均阳性的骨肉瘤组织中MVD值高于两者均为阴性者,两者相比较差异有非常统计学意义(P＜0.01).结论 HIF-1α和VEGF在骨肉瘤组织中均为高表达,提示它们可能对骨肉瘤新生血管生成中具有协同作用,在骨肉瘤的发生、发展起到重要作用.
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环氧合酶-2对人肺癌组织血管形成及耐药性的影响
目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)的表达对肺癌新生血管形成、化疗后多药耐药性(P-gp)的影响.方法:应用免疫组织化学检测COX-2蛋白、VEGF蛋白和P-gp蛋白的表达.结果:肺癌组织中COX-2、P-gp和VEGF的表达分别为45.12%、53.66%及62.20%.COX-2的表达与淋巴结转移、肿瘤组织的分化程度、不同的病理类型有关,与肿瘤的大小无关;VEGF的表达与淋巴结转移、肿瘤组织的分化程度及临床分期均有关,而与病理类型无关;P-gp在肿瘤组织中的的阳性表达率显著高于癌旁正常组织,P-gp表达率的升高与淋巴结转移、肿瘤组织的分化程度相关,P-gp的表达与肺癌组织学分级、临床分期、不同的病理类型及肿瘤的大小均无关.结论:COX-2与VEGF、P-gp表达之间均呈显著正相关.
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缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子在卵巢癌中的表达及相关性
目的:探讨卵巢癌组织中缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子的表达及相关性.方法:采用免疫组织化学S-P方法检测145例不同卵巢组织中HIF-1α和VEGF的表达情况.结果:交界性卵巢肿瘤和卵巢癌组织中HIF-1α的表达高于正常卵巢和良性卵巢肿瘤,差异有显著性(P<0.05);卵巢癌组织中HIF-1α表达与病理分级呈正相关,有统计学差异(P<0.01).VEGF表达在正常卵巢和良性卵巢肿瘤组织中均明显低于交界性卵巢肿瘤和卵巢癌(P<0.01).卵巢癌组织中HIF-1α表达与VEGF表达之间呈明显正相关(rs=0.439,P=0.000).结论:在缺氧状态下,卵巢癌组织中HIF-1α基因被激活,过渡表达HIF-1α蛋白,并通过VEGF的上调而刺激肿瘤新生血管的生成,促进卵巢癌的转移.
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Stat3、HIF-1α、MMP-7和VEGF在肾母细胞瘤中的表达
目的 研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),信号传导与转录激活因子3(signal transduccer and activator of transcription 3,Stat 3)、低氧诱导因子HIF-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和基质金属蛋白酶-7(MMP-7)在肾母细胞瘤(nephrohlastoma,Wilms'tumor,WT)中的表达及其及其与临床分期和病理分级间的关系.方法 采用免疫组化SP法检测43例手术切除WT标本和24例小儿非肿瘤肾组织标本中Stat 3、HIF-1α、MMP-7、与VEGF的表达.结果 24例对照组织标本中MMP-7未见表达,43例WT组织标本中MMP-7在胞浆表达率54.18±10.72(MVD值).MMP-7在预后良好(favorable histological types,FH)组中的阳性表达率明显低于在预后不良(unfavorable histological types,UH)组中的阳性表达率(P＜0.05); VEGF、Star 3及HIF-1α在WT组织中表达强度较正常肾组织显著增强(P＜0.05).另外,临床分期Ⅲ～Ⅳ和预后不良病理类型的WT中Star 3及VEGF表达强度明显高于临床分期Ⅰ～Ⅱ的WT,预后不良病理类型及直径≥6 cm的WT中HIF-1α表达强度较预后良好型及直径＜6cm的WT升高.VEGF的表达与性别、年龄和病理学分型无关(P＞0.05),而与临床分期明显相关(P＜0.05).结论 WT组级中Stat 3、HIF-1α、MMP-7和VEGF的表达与肿瘤侵袭转移和发展有关,可被认为是肾母细胞侵袭性标志,对WT对于靶向治疗肾母细胞瘤具有一定意义.
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大鼠Slit2基因慢病毒干扰载体的构建及其对大鼠RPE细胞中Slit2基因的下调作用
背景 年龄相关性黄斑变性(AMD)是老年人致盲的首要原因.目前,AMD的治疗方式在取得显著疗效的同时亦有一定的不足,寻找新的有效治疗靶点是当前的研究热点. 目的 构建大鼠Slit2基因慢病毒干扰载体,筛选有效干扰序列以用于大鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞中Slit2基因沉默,为大鼠相关体内实验奠定基础.方法 设计2条大鼠Slit2基因siRNA序列,退火形成DNA,连接形成慢病毒干扰载体并进行测序鉴定.采用三质粒共转染293T细胞法收获慢病毒(Lv-rSlit2-siRNA),用药物筛选法测定病毒悬液滴度.将大鼠RPE细胞分为空白对照组、空病毒组、Lv-rSlit2-siRNA1组和Lv-rSlit2-siRNA2组,根据分组分别用仅有病毒的载体和不同序列的Lv-rSlit2-siRNA载体转染细胞,分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot法测定各组细胞中Slit2 mRNA及蛋白的表达以确定Slit2基因的敲减率,筛选有效干扰序列.采用0、100、200和400μmol/L CoCl2孵育大鼠RPE细胞以制备缺氧细胞模型并转染筛选Lv-rSlit2-siRNA2干扰序列,采用实时荧光定量PCR法和ELISA法测定大鼠RPE细胞中血管内皮生长因子A(VEGFA)表达变化及细胞上清液中VEGFA质量浓度.结果 成功构建2条大鼠Slit2基因慢病毒干扰载体,病毒滴度分别为5×108 TU/ml和3×108 TU/ml,转染病毒后72 h于荧光显微镜下观察RPE细胞慢病毒转染率均在70％以上.Lv-rSlit2-siRNA1组和Lv-rSlit2-siRNA2组大鼠RPE细胞中Slit2 mRNA相对表达量分别为0.67±0.09和0.23±0.11,明显低于空白对照组的1.03±0.31和空病毒组的0.92 ±0.07;Lv-rSlit2-siRNA1组和Lv-rSlit2-siRNA2组大鼠RPE细胞中Slit2蛋白相对表达量分别为0.62±0.07和0.49±0.02,明显低于空白对照组的1.00±0.10和空病毒组的0.95±0.11,差异均有统计学意义(均P＜0.01).0、100、200和400 μmol/L CoCl2作用后,空白对照组和Lv-rSlit2-siRNA2组大鼠RPE细胞中VEGFA mRNA的相对表达量明显不同,差异均有统计学意义(F浓度=127.998,P＜0.01;F分组=69.663,P＜0.01),不同浓度CoCl2作用后各组大鼠RPE细胞中VEGFA蛋白相对表达量均明显不同,差异均有统计学意义(F浓度=17.059,P＜0.01;F分组=91.791,P＜0.01).100、200和400 μmol/LCoCl2作用后Lv-rSlit2-siRNA2组大鼠RPE细胞中VEGFA mRNA表达量及蛋白质量浓度均明显低于空白对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 大鼠Slit2基因慢病毒干扰载体构建成功并筛选出有效干扰重组序列,其能有效下调大鼠RPE细胞中Slit2基因的表达,并抑制缺氧环境下VEGFA在大鼠RPE细胞中的表达.
关键词： 慢病毒 转染技术 RNA干扰 视网膜色素上皮/基因 血管内皮生长因子A/代谢 -
巨噬细胞移动抑制因子及相关因子在宫颈鳞癌组织中的表达及意义
目的探讨宫颈鳞癌（SCC）中巨噬细胞移动抑制因子（MIF）、金属蛋白酶‐9（MMP‐9）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达及意义。方法选择SCC组织标本51份（SCC组）、宫颈上皮内瘤样病变（CIN）标本41份（CIN组），正常宫颈组织（NCE）标本32份（NCE组），采用免疫组化SP法检测各组MIF 、MMP‐9和VEGF的表达并比较分析。结果 NCE组、CIN组、SCC组MIF、MMP‐9、VEGF阳性率及微血管密度（MVD）值依次升高，组间比较有统计学差异（ P ＜0．05），且SCC组显著高于CIN组、NCE组；MIF、MMP‐9和VEGF在SCC组织中的阳性表达均与组织分化程度、有无淋巴结转移、临床分期有关（ P ＜0．05）；MIF、MMP‐9和VEGF阳性表达的M VD值与SCC临床分期、分化程度、淋巴结转移显著相关（ P ＜0．05）；在SCC中M IF和M M P‐9的表达呈显著正相关（ P ＜0．05），而VEGF和MIF、MMP‐9的表达无相关性（ P ＞0．05）。结论 MIF、MMP‐9和 VEGF在SCC的发生、发展、浸润及转移中起重要作用；SCC组织学分化越差，MIF、MMP‐9和VEGF阳性表达率及MVD值越高，提示三者联合检测可为评估SCC严重程度。
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Livin与EGFR、VEGF在结直肠癌中的表达及相关性研究
【目的】探讨Livin基因在结直肠癌中的表达及其与表皮生长因子受体（EGFR ）、血管内皮生长因子（VEGF）的相关性。【方法】采用免疫组织化学染色方法检测结直肠癌、大肠正常黏膜组织各50例中Livin、EG‐FR、VEGF的表达，并分析Livin表达与EGFR、VEGF的相关性。【结果】结直肠癌组织中Livin蛋白的阳性表达率明显高于大肠正常黏膜组织（ P ＜0．01）；Livin蛋白阳性表达率与淋巴结转移及Duke分期有关，而与结直肠癌患者的年龄、性别、分化程度无关；结直肠癌组织中 EGFR蛋白的阳性表达率明显高于正常黏膜组织（ P ＜0．01）；EGFR阳性表达率与结直肠癌中肿瘤的分化程度、Duke分期及淋巴结转移密切相关，与结直肠癌患者的年龄、性别无统计学意义；大肠正常黏膜组织中VEGF的阳性表达率低于结直肠癌组织中VEGF的阳性表达率（ P ＜0．01），其差异有统计学意义，VEGF蛋白表达与结直肠癌患者的性别、年龄、肿瘤分化程度无关，与肿瘤的Duke分期及有无淋巴结转移有关；在结直肠癌组织中Livin蛋白阳性表达与 EGFR ，VEGF蛋白阳性表达无相关性，而EGFR蛋白阳性表达与VEGF蛋白阳性表达呈正相关。【结论】Livin在结直肠癌组织中过表达，阳性表达率明显高于大肠正常黏膜组织，推测Livin促进了结直肠癌的发生、发展。EGFR、VEGF蛋白在结直肠癌组织中表达呈正相关，推测EGFR、VEGF在结直肠癌的发生发展过程中起着至关重要的作用。
关键词： 结直肠肿瘤/病理学 受体 表皮生长因子/代谢 血管内皮生长因子A/代谢
