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沙眼衣原体感染细胞抗凋亡及Bim的表达
目的:研究沙眼衣原体(D血清型)感染的Hela229细胞Bim蛋白质的表达及抵抗凋亡的情况.方法:Western-blot检测沙眼衣原体感染和未感染的Hela229细胞Bim蛋白质的表达水平.凋亡诱导剂etoposide作用Hela229细胞后,琼脂糖凝胶电泳检测DNA Ladder 带;流式细胞仪检测凋亡率.结果:Hela229细胞在未感染沙眼衣原体时可检测到Bim的表达;在感染24小时、48小时后均未检测到Bim的表达.经etoposide作用后.未感染的Hela229细胞检测到DNA Ladder带;流式细胞仪检测的凋亡率为90.64%.感染24小时的Hela229细胞,未检测到DNA Ladder带;凋亡率为11.50%,与未感染的Hela229细胞诱导后的凋亡率比较有统计学意义(P＜0.05).结论:沙眼衣原体感染的Hela229细胞Bim蛋白质的表达下降;并能抵抗etoposide诱导的细胞凋亡.
关键词： 沙眼衣原体(D血清型) Hela229细胞 BIM 细胞凋亡 -
对沙眼衣原体感染细胞促凋亡蛋白表达的影响
目的:研究蛋白酶体抑制剂MG132对沙眼衣原体感染细胞促凋亡蛋白Bim、Puma表达的影响,探讨沙眼衣原体抑制宿主细胞凋亡的可能机制.方法:以沙眼衣原体(D 血清型)感染Hela229细胞,用不同浓度MG132作用后,Western-blot检测Bim、Puma蛋白质表达水平的变化.结果:沙眼衣原体感染12 h后Bim、Puma的表达降低;24 h后完全消失.MG132能抑制Bim、Puma的表达下降.结论:沙眼衣原体感染Hela229细胞后可降低促凋亡蛋白Bim、Puma蛋白质的表达;MG132可阻止这一作用,Bim和Puma的降解依赖蛋白酶体的活性.
关键词： 沙眼衣原体(D血清型) Hela229细胞 BIM PUMA 细胞凋亡 -
三叶青水提物体内、体外抗肿瘤作用的研究
目的 考察三叶青水提物体内、体外抗肿瘤的作用.方法 应用中药血清药理学方法,制备三叶青水提物的含药血清.采用MTT法观察不同质量浓度三叶青水提物及其含药血清对人宫颈癌细胞Hela229和人恶性黑色素瘤细胞A375细胞的体外抑制作用；以小鼠S180肉瘤为模型,观察三叶青水提物在体内对肿瘤生长的抑制作用.结果 三叶青水提物对Hela229和A375细胞有增殖抑制作用,且呈现出剂量依赖性,IC50分别为45.60 g/L和38.35 g/L;三叶青水提物含药血清高、中、低(20,10,5g/kg)剂量组也可抑制Hela229和A375细胞的体外增殖,IC50分别为41.82 g/L和248.60g/L,呈现出剂量依赖性；三叶青水提物在体内对小鼠S180肉瘤的生长具有一定的抑制作用,高、中、低(24,12,6g/kg)剂量组的抑瘤率分别为28.24％、41.56％和6.00％.结论 三叶青水提物体内、体外均具有抗肿瘤作用.
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多柔比星叶酸隐形脂质体对HeLa229荷瘤裸鼠的抑瘤作用
考察多柔比星(1)叶酸隐形脂质体对荷瘤裸鼠肿瘤生长的抑制作用.以pH梯度法分别制备了多柔比星叶酸隐形脂质体(1-FSL)和普通脂质体.比较两者在荷瘤裸鼠瘤旁给药后对瘤体动态变化趋势、瘤体组织病理学差异和瘤体中肿瘤细胞内DNA质量的影响等.结果表明,1-FSL对荷瘤裸鼠具有显著的抑瘤效果,1-FSL抑瘤率略高于普通脂质体,但两者抑瘤特性明显有别.
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p65 siRNA联合顺铂对宫颈癌HeLa229细胞增殖及侵袭力的影响
目的 通过RNA干扰(RNAi)阻断宫颈癌细胞HeLa229中核因子(NF)-kB信号通路,观察其单独或与顺铂(DDP)联合对HeLa229增殖、耐药性和侵袭力的影响.方法 利用RNAi技术,将HeLa229分为未转染组(A组)和转染p65小干扰RNA(siRNA)组(B组),用MTT法检测转染p65 siRNA 24、48、72 h时HeLa229的增殖情况;加入不同浓度DDP,观察其对HeLa229细胞增殖的影响.用Boyden chamber体外侵袭实验检测A、B组及p65siRNA与DDP(8.6 mg/L)联合组(C组)细胞侵袭力的变化.结果 B组细胞存活率较A组明显下降;加入DDP后,A、B组细胞的存活率均随DDP浓度的增加而下降.siRNA与DDP联合应用可明显提高HeLa229对DDP的敏感性.与A组相比,B、C组穿越Matrigel胶的细胞数明显减少(P<0.05).结论 应用RNAi技术可有效阻断HeLz229内NF-KB信号通路,抑制其增殖和体外侵袭力,增强其对DDP的敏感性.
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RUNX2在宫颈鳞癌组织中的表达及其siRNA对Hela229细胞RUNX2表达及细胞增殖与凋亡的影响
目的:探讨RUNX2蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达情况及RUNX2 siRNA对宫颈鳞癌Hela229细胞RUNX2基因表达、细胞增殖及凋亡的影响.方法:应用免疫组化技术检测50例宫颈鳞癌、30例宫颈高级别鳞状上皮内病变(HSIL)及30例正常宫颈黏膜组织中RUNX2蛋白的表达情况,并分析宫颈鳞癌组织中RUNX2蛋白表达与临床病理特征的关系.设计合成RUNX2 siRNA,通过脂质体将其转染至Hela229细胞,同时设立空白对照(不转染)和阴性对照(转染非特异性siRNA)细胞组.转染24、48、72 h后,采用MTT法检测各组细胞增殖,计算增殖抑制率;转染72 h后,采用RT-PCR及Western blot技术检测细胞中RUNX2 mRNA及蛋白的表达,采用流式细胞术检测细胞凋亡.结果:宫颈鳞癌组织中RUNX2阳性表达率高于HSIL及正常宫颈组织(P<0.001);宫颈鳞癌组织中RUNX2蛋白的表达与肿瘤的临床分期有关(P=0.004).与空白对照组和阴性对照组比较,RUNX2 siRNA组Hela 229细胞增殖抑制率、RUNX2 mRNA及蛋白的表达均降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05).结论:RUNX2基因的高表达与宫颈鳞癌细胞的增殖关系密切.
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沙眼衣原体抑制宿主细胞凋亡的研究
目的 探讨沙眼衣原体D血清型感染对宿主细胞凋亡的影响.方法 沙眼衣原体(D血清型)感染的和未感染的Hela229细胞经凋亡诱导剂依托泊苷(etoposide)作用后, Hoechst33258染色、荧光显微镜观察核浓缩和凋亡小体,流式细胞仪检测凋亡率.结果 经依托泊苷作用后,Hela229细胞有凋亡形态学特征,沙眼衣原体感染的Hela229细胞则无明显凋亡形态学改变,两者的凋亡率比较有统计学意义(P<0.05 ).结论 沙眼衣原体感染后能抑制诱导剂诱导的宿主细胞凋亡.
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沙眼衣原体抑制etoposide诱导的HeLa229细胞凋亡的研究
目的 探讨沙眼衣原体D血清型感染对宿主细胞凋亡的影响.方法 用凋亡诱导剂依托泊苷(e-toposide)作用于沙眼衣原体(D血清型)感染的和未感染的Hela229细胞,Hoechst33258染色后荧光显微镜观察核浓缩和凋亡小体,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率.结果 未感染CT的Hela229细胞经etoposide作用后,用荧光显微镜观察到明显的核浓缩和凋亡小体;流式细胞仪检测的凋亡率为90.64%,与未经诱导剂作用的Hela229细胞比较差异有显著性(P<0.05).而CT感染24 h的Hela229细胞,经etoposide作用后未观察到核浓缩和凋亡小体;流式细胞仪检测的凋亡率为11.50%,与未感染CT的Hela229细胞诱导后的凋亡率比较差异有显著性(P<0.05);而与未经诱导的CT感染Hela229细胞比差异较无显著性(P>0.05).结论 沙眼衣原体感染Hela229细胞后能抑制etoposide诱导的细胞凋亡.
关键词： 沙眼衣原体(D血清型) Hela229细胞 凋亡
