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几种新式免疫组织化学技术在肾病理应用中的比较
近年免疫组织化学技术取得了很大进展,在传统的ABC、LSAB的基础上,EnVision、CSA又逐渐出现并得以应用,使得该技术的敏感性、特异性进一步提高.由于肾组织在显微镜下呈腔囊状结构,肾小管上皮细胞又含有内源性过氧化物酶及抗生物素蛋白结合活性,切片要求薄,故免疫组化染色难度较大.为此,我们对比了传统及新一代的几种染色方法,力求遴选出其中何种较适合肾组织.材料与方法
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血清γ-谷氨酰基转肽酶ELISA检测方法的建立及其在原发性肝癌诊断中的临床应用研究
目的 建立可用于血清蔓陀罗凝集素(DSA)-γ-谷氨酰基转肽酶(GGT)检测的酶联免疫吸附法(ELISA),并探讨其在原发性肝癌(PHC)诊断中应用价值.方法 制备抗DSA-GGT 单克隆抗体(McAb),经蛋白G亲和层析柱色谱纯化后进行生物素标记,构建血清DSA-GGT生物素-链霉亲和素ELISA检测方法.用建立的方法对健康者、PHC患者和非PHC患者进行DSA-GGT检测,并进行方法学评价;采用受试者工作曲线(ROC曲线)确定DSA -GGT诊断PHC的临界值.结果 所构建ELISA检测方法的低检测限为2 μg/L,平均批内、批间变异分别为8.9%和11.5%.健康者血清DSA-GGT水平呈正态分布,参考范围为(1.50±0.51)μg/L;经ROC曲线分析,确定其诊断PHC的临界值为3.25 μg/L;其诊断PHC灵敏度为66.7%(28/40)、特异度为91.8%(112/122).结论 所建立的血清DSA-GGT生物素-链霉亲和素ELISA检测方法具有良好方法学性能,其诊断PHC的灵敏度、特异度良好,为PHC实验室诊断提供了新的方法.
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利用工程树突细胞定向的纳米颗粒增强免疫应答的简单策略
在这项研究中,作者证实了一种简单的能够增强免疫应答的策略,这种策略是使用两组分树突细胞定向抗原投递系统。一种组分是由用于树突细胞导向的双功能性融合蛋白所构成,另一组分是由生物素化的PLGA纳米颗粒( NPs)制备而成,用来包裹抗原。由截短的与抗-DEC-205单链抗体( scFv )相融合的核心链霉抗生物素蛋白构成的融合蛋白与荷载卵白蛋白的生物素化的NP s相混合(这种生物素化的NPs是使用生物素-PEG (2000)-PLGA配制而成)。融合蛋白功能化NP s被用于树突细胞定向性抗原投递。在体外树突细胞摄取研究中结果表明,当与非定向的NP s进行比较时,显示出高2倍的受体介导性融合蛋白功能化 NPs 的摄取结果。用融合蛋白功能化NPs 免疫并受树突细胞成熟刺激(抗CD40单抗)的小鼠增强了卵白蛋白特异性IgG和IgG亚类应答。这些小鼠的脾细胞当在体内用卵白蛋白再行刺激时则产生了更高水平的Th1型(γ干扰素和IL-2)细胞因子应答。融合蛋白功能化树突细胞定向系统的这种令人振奋的结果支持了可以将其作为一种通用的疫苗投递系统加以应用,以期用来设计单价或多价疫苗。