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IL-12基因转导EL-4细胞对C57BL/6小鼠的肿瘤疫苗作用
应用逆转录病毒构建了IL-12表达载体,以研究IL-12基因修饰的肿瘤细胞的肿瘤疫苗作用,将其转染EL-4胸腺瘤细胞并研究了该基因导入细胞的抗肿瘤免疫效果.当接种了EL-4/IL-12转染细胞后,在C57BL/6同系鼠中其基因导入细胞的致瘤性比EL-4/Wt和EL-4/Neo组明显减少(P＜0.01),在EL-4/IL-12被排斥后,体内试验中实验动物诱发了抗EL-4/Wt的系统性、保护性免疫,51Cr释放测定中,获得一个较强的抗EL-4/Wt和一个较弱的抗同系Lewis肿瘤细胞的CTL活性,体内淋巴细胞消除分析的结果提示减少的致瘤性主要依赖于CD4+,CD8+和NK细胞.这一研究结果提示应用IL-12进行血液肿瘤的治疗是有效的,在未来人类癌症的治疗中IL-12亦可有一定的应用前景.
关键词： IL-12基因 EL-4胸腺瘤细胞株 肿瘤疫苗 基因转导 -
IL-12、IL-18基因对HIV-1外膜蛋白基因疫苗诱导的免疫应答的影响
目的研究IL-12、IL-18基因对HIV-1外膜蛋白基因疫苗诱导免疫应答的影响,以探求HIV-1核酸疫苗的新策略.方法 pVAX1GP120联合IL-12、IL-18基因或者pVAX1GP120单独免疫BALB/c小鼠,采用ELISA检测免疫小鼠的特异性抗体和IFN-γ水平,以MTT比色法检测免疫小鼠脾淋巴细胞的增殖,用乳酸脱氢酶(LDH)试验检测小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的应答.结果与pVAX1GP120免疫组比较,pVAX1GP120联合IL-12、IL-18基因免疫组小鼠血清的抗HIV-1 gp120抗体滴度升高,IFN-γ升高,小鼠的脾淋巴细胞增殖实验刺激指数(SI)以及特异性CTL活性均高,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 IL-12、IL-18基因联合HIV-1核酸疫苗免疫小鼠,有可能增强特异性TH1细胞和CTL反应,IL-12、IL-18基因对体液免疫可能有抑制作用.因此,IL-12、IL-18基因对于治疗性HIV-1核酸疫苗可能是具有较好应用前景的免疫佐剂.
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siRNA靶向干扰IL-12基因对脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响
目的：观察siRNA干扰白细胞介素（ IL）-12基因表达对脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响。方法将含有 IL-12 siRNA 的表达质粒稳定转染人脑胶质瘤细胞，应用western 印迹杂交检测IL-12的表达变化，噻唑蓝（MTT）法及吖啶橙/溴化乙啶（AO/EB）染色观察脑胶质瘤细胞的增殖与凋亡情况。结果转染后，western 印迹检测显示IL-12 siRNA组的IL-12表达较阴性对照组及空载体组显著降低（P＜0.01），MTT法显示 IL-12 siRNA组中的细胞生长受抑明显，AO/EB染色显示IL-12 siRNA组的凋亡率较阴性对照组及空载体组高。结论 IL-12 siRNA靶向干扰了IL-12蛋白的表达，并对脑胶质瘤细胞具有抑制增殖和促进凋亡的作用。
