首页 > 文献资料
-
百日咳的免疫及预防
自然感染百日咳和百日咳菌体疫苗(WPV)免疫后,都主要诱生抗凝集原(AGG)的抗体,而百日咳无细胞疫苗(APV)免疫后主要诱生抗百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)、69kD蛋白(PRN)、菌毛蛋白(FIM)2/3的抗体,但其保护机制及免疫持久性仍是疑问.近年来国外对自然感染和百日咳疫苗免疫后体液免疫和细胞免疫的免疫保护作用进行了广泛研究.
-
2型猪链球菌菌毛蛋白编码基因SSU0474生物学特性分析
目的 构建2型猪链球菌中国强毒株05ZYH33菌毛蛋白编码基因SSU0474缺失突变株,并对其生物学特性进行分析.方法 利用同源重组原理构建SSU0474缺失突变株,PCR及RT-PCR对筛选的突变株进行验证,革兰染色和电镜比较突变株SSU0474与野毒株之间的差异,小鼠实验进一步比较突变株的毒力变化.结果 引物特异性PCR证实SSU0474基因缺失突变株构建成功；革兰染色结果显示突变株和野毒株染色特性差异无统计学意义,SSU0474基因的缺失未明显影响细菌的生长速率；电镜结果表明突变株SSU0474细胞壁明显变薄,细菌菌毛样附属结构缺失；小鼠毒力实验结果提示突变株SSU0474的毒力明显下降.结论 本研究成功获得菌毛蛋白编码基因SSU0474缺失突变株,并对该基因的生物学特性进行了初步探讨,为系统研究2型猪链球菌中国强毒株05ZYH33菌毛的生物学功能提供依据.
关键词： 2型猪链球菌 菌毛蛋白 SSU0474基因敲除 生物学特性 -
产肠毒素大肠杆菌(ETEC)的两种抗原制品对蛋鸡免疫原性的对比研究
目的:采用产肠毒素大肠杆菌(ETEC)K88标准菌株,研究其不同浓度的菌毛及全菌两种抗原对蛋鸡的免疫原性,并确定佳的抗原浓度.方法:用SDS-PAGE鉴定菌毛蛋白的纯度,通过间接ELISA法检测特异性卵黄抗体(IgY)的效价.结果:菌毛蛋白对蛋鸡的免疫原性优于全菌;纯化的菌毛蛋白对蛋鸡的免疫原性优于粗菌毛蛋白,其诱导的抗体效价高可达1:480 000,初免84天后未见有明显的下降趋势;菌毛蛋白佳浓度为2 mg/ml,全菌佳浓度为1010 cfu/ml.结论:本研究为制备高效价特异性IgY抗体奠定了基础.
-
人产肠毒素大肠杆菌基因工程疫苗的研究进展
产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是引起腹泻的主要致病菌之一,在世界范围内,每年可导致数亿人发生腹泻,尤其是发展中国家的婴幼儿和儿童.目前,世界各国通过构建新型的ETEC基因工程疫苗预防ETEC引起的腹泻.将ETEC的肠毒索基因和菌毛蛋白基因转化至无毒的受体菌中,构建出基因工程疫苗,免疫人体后可有效预防ETEC引起的腹泻.本文就ETEC的致病机理及国内外ETEC基因工程疫苗的新研究进展作一综述.
-
百日咳鲍特菌黏附分子的研究进展
随着生物技术的发展,研究人员对百日咳鲍特菌致病机理进行了大量研究并取得一定的突破,尤其是黏附分子在细菌致病过程中所起的作用.本文就近年来在百日咳鲍特菌黏附分子的研究进展作一简要综述.
-
牙龈卟啉单胞菌菌毛融合抗原基因果实特异表达载体的构建及意义
目的 构建含牙龈卟啉单胞菌菌毛融合抗原基因的番茄果实特异表达载体,并提高抗原基因的表达量和免疫原性,为其在番茄果实内表达和研制有效的转基因植物牙周炎疫苗奠定基础.方法 通过PCR获得番茄果实特异表达启动子E8的核心序列片段(约1.11 kb),同时合成通过柔性接头连接的霍乱毒素B亚基(Cholera Toxin B Subunit,CTB)和牙龈卟啉单胞菌菌毛FimA(266-337)(约600 bp)序列的基因片段,利用重叠区扩增基因拼接法将两基因片段连接,得到重组片段E8-CTB-FimA (266-337),双酶切E8 -CTB-FimA( 266-337)片段和植物表达载体pBI121,酶切产物连接后,获得重组载体pBI E8-CTB-FimA (266-337),利用酶切方法和测序方法对pBIE8 -CTB-FimA(266-337)进行鉴定.结果 基因测序及酶切结果表明特异表达载体已成功构建.结论 本研究成功构建了含牙龈卟啉单胞菌菌毛融合抗原基因的番茄果实特异表达载体；该载体可用于转基因植物牙周炎疫苗的研制.
关键词： 牙龈卟啉单胞菌 番茄果实特异启动子E8 菌毛蛋白 霍乱毒素B亚基 -
神经菌毛蛋白-1在移植肾组织中的表达及意义
神经菌毛蛋白-1(Neuropilin-1;NRP-1)是一种位于神经纤维轴突上的跨膜糖蛋白,其长度为130～140 kd,1995年首次被Fujisawa等[1]发现.初多是关于NRP-1作为信号素Ⅲ(semaphorinⅢ)和血管内皮生长因子(VEGF)受体的研究.2002年Tordjman等[2]发现NRP-1是引发初次免疫应答的一种基本物质.2004年Bueder等[3]又发现NRP-1组成性表达于调节性T淋巴细胞表面,在经抗原刺激活化的效应性T淋巴细胞上表达下降.本实验旨在检测NRP-1在移植肾组织中淋巴细胞上的表达,探讨NRP-1在淋巴细胞上的表达意义,为进一步研究NRP-1在免疫系统方面的生物学作用提供基础依据.
-
靶向牙周炎DNA疫苗免疫原性及免疫效能的实验研究
目的：检测树突状细胞靶向牙周炎DNA疫苗pCTLA4-FimA的免疫反应性，并评价其免疫保护能力。方法：BALB/c小鼠随机分为3组：pCTLA4-FimA鼻黏膜免疫组，非靶向牙周炎DNA疫苗pFimA鼻黏膜免疫组，pCI载体鼻黏膜免疫组。酶联免疫吸附实验检测血清及唾液中特异性抗FimA抗体水平。小鼠鼻黏膜途径免疫pCTLA4-Fi-mA、pFImA或pCI质粒，口腔接种Porphyromonas gingivalis，建立小鼠牙周炎模型，检测牙槽骨水平吸收程度。结果：与pFimA免疫组相比，pCTLA4-FimA免疫组诱导了显著增强的血清特异性IgG抗体和唾液特异性IgA抗体水平(P＜001)。与免疫前相比，三组小鼠牙槽骨均有吸收，其中pCTLA4-FimA免疫组牙槽骨水平吸收程度低。结论：靶向牙周炎DNA疫苗pCTLA4-FimA能有效诱导机体产生特异性抗体免疫反应，并抑制牙周炎的发展，效果优于非靶向牙周炎DNA疫苗pFimA。
-
靶向牙周炎DNA疫苗的构建及体外表达研究
目的:构建以人细胞毒性T淋巴细胞抗原4(Cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4,CTLA4)为引导的抗牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白FimA的靶向牙周炎DNA疫苗,并检测其在体外真核细胞中的表达.方法:采用基因重组技术构建携带CTLA4一Ig基因和牙龈卟啉单胞菌fimA基因的重组质粒pCTLA4-FimA,转染COS7细胞,蛋白免疫印记和间接免疫荧光法检测重组质粒的蛋白表达.结果:重组质粒pCTLA4-FimA携带CTLA4-Ig和fimA基因片断.pCTLA4-FimA表达的抗原可与特异性抗FimA抗体发生免疫反应.pCTLA4-FimA转染的COS7细胞中可检测到目的蛋白的表达.结论:成功构建了靶向牙周炎DNA疫苗pCTLA4-FimA,并可在真核细胞中正确表达.
-
牙周炎疫苗
国外学者[1、2、3]将各牙周炎疫苗研究深入到分子水平.以悉生大鼠(gnotobioticrat)作牙周炎模型,证明了分子量为43000的牙龈卟啉菌(Porphyromonas gingivilis,Pg)菌毛蛋白免疫动物能够防止牙槽骨吸收;用福尔马林处理后的Pg全细胞亦能防止由结扎诱导的猴牙槽骨吸收[1].口腔中少数微生物毒性较强,与牙周炎发生,发展密切相关,使牙周免疫防治成为可能.文章就牙周炎疫苗的相关研究现状作一简单综述.
-
伴放线放线杆菌菌毛融合蛋白基因的克隆
目的探讨克隆伴放线放线杆菌菌毛融合蛋白基因ltb-fap的方法.方法采用PCR方法扩增伴放线放线杆菌菌毛相关蛋白(Fap)和大肠杆菌不耐热性肠毒素B亚单位(Ltb)的融合蛋白基因ltb-fap,NcoⅠ/EcoRⅠ双酶切载体pET28a(+)及ltb-fap基因,连接形成重组质粒pETltb-fap,转化至大肠杆菌DH5α,扩增后提取质粒pETltb-fap进行PCR鉴定、酶切鉴定和序列分析.结果本实验扩增的ltb基因约为303 bp,fap基因约为228 bp,融合基因约为531 bp.重组质粒含外源基因片段约为531 bp,酶切鉴定可得到一条约531 bp带,DNA测序结果表明与GenBank中的fap基因序列有97.4%的同源性.结论成功克隆出融合蛋白基因ltb-fap,为进一步进行蛋白表达、制备抗体奠定基础.
