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应用液氮改良冷冻切片的体会
冷冻切片一般多用于新鲜组织、甲醛固定组织和冰箱冷藏组织等,组织块不经任何包埋剂包埋而直接放置在冷台上冷却后进行切片.然而,富于脂肪组织的新鲜标本或固定后的标本却难以冷冻,或不能切片.
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α-纤维蛋白原基因多态性与肺动脉栓塞相关性初探
目的 探讨α-纤维蛋白原Thr312Ala基因的多态性分布与肺动脉栓塞的相关性.方法 选取尸检已确诊的肺动脉栓塞病例的甲醛固定心肌组织14例和正常健康人群外周血56例,采用改良酚-氯仿法和Chelex100法分别提取心肌组织和外周静脉血基因组DNA,用PCR-RFLP法检测α-纤维蛋白原基因Thr312 Ala多态性,并分析其与肺动脉栓塞的关联性.结果 α-纤维蛋白原Thr312Ala基因的各基因型在肺动脉栓塞组与对照组比较差异具有显著性意义(P＜0.05);各等位基因在两组间比较差异具有显著性意义(P＜0.05);A等位基因与PE呈负相关(RR=0.475,P＜0.05);G等位基因与PE呈正相关(RR =5.818,P＜0.05).结论 α-纤维蛋白原基因Thr312Ala位点G等位基因与肺动脉栓塞有正关联,肺动脉栓塞死亡者中GA、GG基因型分布频率较高,本文数据可为相关研究提供参考.
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3种甲醛固定组织DNA提取方法的比较
目的 对不同方法提取甲醛固定组织中DNA的效果进行比较,寻找一种操作简便、经济实用、质量较高的DNA提取方法.方法 取甲醛固定的心肌组织14份,分别以改良酚-氯仿法,改良Trizol法,试剂盒法提取DNA,进行紫外分光光度计测定OD260/OD280值后,经PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳分析确定提取的DNA质量.结果 改良酚-氯仿法,改良Trizol法,试剂盒法OD260/OD280比值分别为1.841 5 ±0.380 4、1.370 5±0.336 7、0.831 6 ±0.175 0.两两比较均有显著性差异(P＜0.05).3种不同方法提取DNA含量分别为0.943 8±0.530 1、0.707 5 ±0.423 6、0.342 8±0.182 5.PCR扩增后琼脂糖凝胶电泳显示以改良酚-氯仿法所提DNA的谱带清晰度好于其它两种方法.结论 改良酚-氯仿法简便有效,所用试剂价格低廉,是一种经济实用的甲醛固定组织DNA提取方法.
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甲醛固定标本DNA提取及荧光标记STRs复合扩增
甲醛固定标本和石蜡包埋组织的病理切片是医院病理科和法医鉴定机构档案中重要的个人实物档案,是可靠的分子生物学研究材料的来源,同时也是医疗纠纷和一些刑事案件的重要证据.
关键词： 法医物证学 甲醛固定组织 DNA提取 荧光标记STRs位点 PCR复合扩增
