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特发性主动脉夹层25例病理学特征及相关因素探讨
目的 初步探讨特发性主动脉夹层的病理变化和发病机制.方法 收集特发性主动脉夹层病例(除外遗传性结缔组织病、高血压、炎症反应、主动脉瓣二叶化畸形)25例,在常规组织形态学观察的基础上,运用弹力纤维和Masson三色染色法及免疫组化结合图像分析,检测动脉中膜弹力纤维、胶原纤维和平滑肌细胞的变化及与弹力纤维合成相关的因子Fibulin-5的变化.结果 特发性主动脉夹层的病理变化主要表现于中膜层,为中膜弹力纤维灶性破坏,黏液样基质增多.弹力纤维含量明显低于对照组(P＜0.01);胶原纤维含量高于对照组(P＜0.05);平滑肌细胞量较对照组明显少(P＜0.05);Fibulin-5阳性细胞的阳性表面积率显著低于正常对照组(P＜0.05).Fibulin-5含量与弹力纤维含量呈正相关(P＜0.05).结论 特发性主动脉夹层的病理变化主要是中膜层变化.Fibulin-5蛋白减少引起的弹力纤维合成减少是导致特发性主动脉夹层的发病因素之一,Fibulin-5蛋白对检测特发性主动脉夹层具有诊断意义.
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Fibulin-5表达对膀胱癌细胞迁移和侵袭能力的影响
目的 探讨fibulin-5表达在膀胱尿路上皮癌中的影响作用. 方法 经尿道切除获取膀胱尿路上皮癌标本20例,其中低级别(G_1和G_2)13例、高级别(G_3)7例.蛋白质印迹法检测fibulin-5在膀胱尿路上皮癌和正常膀胱黏膜组织中的表达.将PCR扩增的fibulin-5 cDNA克隆到pMD-19T载体中,构建p-EGFP-fibulin-5质粒.脂质体介导法将p-EGFP-fibulin-5质粒转染到人膀胱癌5637细胞株内,流式细胞仪分选,经G418筛选形成稳定的表达克隆.Boyden小室法检测未转染、转染空载体和转染fibulin-5的膀胱癌细胞迁移和侵袭能力. 结果 正常膀胱黏膜、低级别和高级别膀胱尿路上皮癌组织中fibulin-5蛋白相对表达量分别为1.16±0.28、0.57±0.32和0.44±0.42.与正常膀胱黏膜相比,膀胱癌组织中fibulin-5蛋白表达显著下调(P<0.01),低级别和高级别癌之间差异无统计学意义(P>0.05).转染成功的膀胱癌5637细胞显示绿色荧光.未转染、转染空载体和转染fibulin-5的膀胱癌细胞的迁移细胞数分别为136.9±5.7、139.3±7.7和127.6±3.1,侵袭细胞数分别为31.7±4.7、31.5±4.8和8.05±3.1.转染fibulin-5后膀胱癌细胞侵袭力明显降低(P<0.01),其迁移力虽低于对照组但差异无统计学意义(P>0.05). 结论 Fibulin-5蛋白表达减少可能是膀胱癌发生和发展的机制之一,过表达fibulin-5可以抑制膀胱癌细胞侵袭力.
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胃癌组织中Fibulin-5的表达及其与患者预后的关系
目的 研究Fibulin-5在胃癌组织中的表达及其与患者预后的关系.方法 选择武汉大学中南医院胃腺癌90例,采用免疫组织化学方法检测胃癌和癌旁组织中Fibulin-5蛋白的表达情况,并分析其与患者临床病理指标的关系. 结果 Fibulin-5在胃癌组织中的表达高于癌旁组织[细胞质:(6.2±4.2)比(5.1±3.7);细胞核:(7.2±3.8)比(4.9±2.5),均P＜0.05].细胞质中Fibulin-5的表达与胃癌患者的年龄正相关(r=0.213,P=0.044),与胃癌患者的总生存率负相关(25％比56％,P=0.027),并且是独立预后因子(P=0.037).结论 Fibulin-5是胃癌的一个独立预后因子,其在胃癌组织中的表达与患者生存期的缩短有关.
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Fibulin-5在盆腔器官脱垂患者子宫骶韧带中的表达
目的 研究Fibulin-5在子宫骶韧带组织中的表达及与盆腔器官脱垂程度之间的关系.方法 应用实时定量RT-PCR和Western blotting测定子宫脱垂组(46例)和正常对照组(28例)子宫骶韧带组织中Fibulin-5 mRNA及蛋白的相对表达量.结果 Fibulin-5在两组中均有表达,子宫脱垂组骶韧带中Fibulin-5mRNA表达水平(0.33±0.22)低于对照组(0.84±0.32)的表达水平(P＜0.001);子宫脱垂组Fibulin-5蛋白表达水平(0.59±0.31)低于对照组(1.09±0.46),P=0.02,且随子宫脱垂程度的增加Fibulin表达降低(P＜0.05).结论 Fibulin-5表达的降低可能促进了盆腔器官脱垂的发生.
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类赖氨酰氧化酶1和Fibulin-5与盆底功能障碍疾病
盆底功能障碍疾病是由于支持盆底的肌肉、筋膜、神经纤维等组织发生病变,导致盆底支持结构薄弱所致.随着健康意识的提高,对其关注也越来越多.盆底功能障碍疾病的发生与分娩损伤、子宫支持组织的疏松薄弱及长期腹压增加有关,但其发病机制迄今尚未完全明确.动物实验研究表明,类赖氨酰氧化酶1(LOXL-1)是弹性纤维发育成熟和保持内环境稳定的关键酶,Fibulin-5与LOXL-1协同以原纤维的形式分布于富含弹性蛋白的组织,能直接与原弹性蛋白结合,并将原弹性蛋白以特定的序列锚定于细胞表面,对弹性纤维的合成有促进作用.
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妊娠期发生盆底功能障碍的影响因素分析
目的：探讨阴道壁组织中弹力纤维、胶原纤维、fibulin-5和转化生长因子β（TGF-β）与初产妇妊娠晚期盆底功能障碍的关系。方法：选取阴道分娩并行会阴侧切的初产妇40例，无妊娠期高血压、妊娠期糖尿病、胎儿生长受限（FGR）和巨大儿。将既无阴道前壁脱垂也无压力性尿失禁（SUI）初产妇设为对照组（20例），将阴道前壁脱垂（包括Ⅰ度和Ⅱ度脱垂的）合并SUI初产妇设为病例组（20例）。所有研究对象阴道分娩行会阴侧切时取少许阴道壁组织行Masson染色检测弹力纤维和胶原纤维的差异，免疫组织化学检测fibulin-5和TGF-β的表达情况，免疫组化结果使用Image-Pro Plus软件分析。结果：2组患者TGF-β蛋白表达量差异无统计学意义（t=1.670，P=0.098），对照组fibulin-5蛋白表达量高于病例组（t=3.062，P=0.005）。病例组胶原纤维和弹力纤维排列稀疏、紊乱，且纤维之间出现断裂，对照组纤维排列致密，形态完整。结论：妊娠期盆底弹力纤维和胶原纤维的异常以及fibulin-5表达减少可能与妊娠期盆底功能障碍发病有关。
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Fibulin-5在盆腔器官脱垂患者主韧带组织中的表达及意义
目的：研究Fibulin‐5在盆腔器官脱垂患者主韧带组织中的表达，分析其与盆腔器官脱垂程度之间的相关性。方法：选取我院妇科行子宫全切术的患者100例作为研究对象，根据手术病因不同分为观察组和对照组，其中观察组患者病因为盆腔器官脱垂，对照组病因为无盆底功能障碍性疾病的妇科疾病，收集所选患者的主韧带组织，采用实时定量PCR以及酶联免疫吸附法测定Fibulin‐5的表达，比较两组患者Fibulin‐5的表达情况并分析。结果：经过统计学分析，显示观察组患者的主韧带组织中Fibulin‐5 mRNA的表达明显低于对照组，血清Fibulin‐5水平亦明显低于对照组，差异均有统计学意义（ P＜0．05）。结论：患者主韧带组织中Fibulin‐5表达的降低，可导致弹性蛋白合成障碍，无法形成稳定的弹性纤维或弹性纤维合成减少，盆底支持组织中细胞外基质弹性能力下降，与盆腔脏器脱垂发病有关。
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急性期脑梗死患者血清fibulin-5水平及其与病情的关系
目的 探讨急性期脑梗死患者血清fibulin-5水平变化及其与病情的关系.方法 选取2012年4-11月我科收治的急性期脑梗死患者156例(观察组),发病时间均<72 h.另选取50例性别、年龄与观察组相匹配的体检健康者作为对照组.应用酶联免疫吸附双抗体夹心法检测所有受检者血清fibulin-5水平,同时采用美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)对观察组患者进行神经功能缺损评分,然后分析观察组不同英国牛津郡社区脑卒中项目(OCSP)分型、梗死面积、梗死部位者血清fibulin-5水平间的差异,并探讨血清fibulin-5水平与NIHSS评分的关系.结果 观察组患者血清fibulin-5水平高于对照组[(118.7±51.6)μg/L与(40.1±12.2)μg/L,t=-11.56,P＜0.01].不同OCSP分型、梗死面积组患者血清fibulin-5水平间差异有统计学意义(F值分别为23.48和208.32;P＜0.01);其中完全前循环梗死[(182.1±53.1)μg/L]＞后循环梗死[(135.4±48.7)μg/L]＞部分前循环梗死[(104.9±21.6)μg/L]＞脑腔隙性梗死[(69.3±7.9)μg/L,均P＜0.01];大面积梗死[(198.7±26.0)μg/L]>小面积梗死[(104.0±55.8)μg/L]>腔隙性梗死[(68.0±7.8)μg/L,均P＜0.01];而不同梗死部位的患者血清fibulin-5水平间差异无统计学意义(P＞0.05).急性期脑梗死患者血清fibulin-5水平与NIHSS评分呈正相关(r=0.792,P＜0.01).结论 急性期脑梗死患者血清fibulin-5水平较健康者升高,且随着脑梗死病灶的增大而升高,但与脑梗死病变部位无相关性.故血清fibulin-5水平检测可能对评估患者的病情有一定的指导意义.
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fibulin-5在缺血再灌注大鼠脑组织中的表达
目的 探讨缺血再灌注大鼠缺血脑组织fibulin-5的表达规律.方法 96只雄性SD大鼠分为正常组、假手术组、中脑动脉闭塞(MCAO)模型6、24、48和72 h组.线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型,激光共聚焦定位fibulin-5在脑组织内的表达,Western印迹检测缺血后fibu-lin-5蛋白表达变化,实时定量PCR测定fibulin-5 mRNA表达规律.结果 ①fibulin-5主要在内皮细胞间表达,偶可在实质细胞或内皮细胞胞质内表达；②大鼠缺血侧脑组织fibulin-5蛋白表达从再灌注6h开始升高(1.26 ±0.46,P＜0.05),再灌注24 h达到高峰(1.78±0.48),72 h(0.89±0.27)时有所降低,但仍高于假手术组(0.30±0.14,P＜0.05),fibulin-5 mRNA表达规律与蛋白表达有同样的趋势.结论 缺血再灌注大鼠缺血脑组织内fibulin-5表达水平明显升高,有可能对脑损伤后血管稳定起到保护作用.
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银丹心脑通软胶囊佐治老年急性脑梗死患者的疗效及对血清中脑源性神经营养因子、Fibulin-5和P-selectin的影响
目的：观察银丹心脑通软胶囊佐治急性脑梗死（ AMI）老年患者的疗效及其对血清中脑源性神经营养因子（ BDNF）、Fibulin-5和 P-selectin的影响。方法 AMI老年患者160例随机分为观察组和对照组各80例，对照组应用常规治疗，观察组在常规治疗基础上加用银丹心脑通软胶囊。治疗前、后抽取静脉血，应用ELISA法检测血清中BDNF、Fibulin-5和P-selectin的表达。结果治疗1 w后，观察组总有效率明显高于对照组，观察组治疗后美国国立卫生研究院脑卒中量表（ NIHSS）评分的变化值明显高于对照组。两组治疗1 w 后血清中 BDNF表达上升，Fibulin-5和 P-se-lectin的表达均下降，但是观察组BDNF的升高值、Fibulin-5和P-selectin的下降值均明显高于对照组。结论银丹心脑通软胶囊辅助治疗AMI老年患者的疗效明显，且能更有效地上调血清中BDNF的表达，下调血清中Fibulin-5和P-selectin的表达，有效调节机体的内环境。
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丹参酮ⅡA磺酸钠注射液治疗脑梗死的疗效及对血清中Fibulin-5、vWF和P-选择素的影响
目的：探讨丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对脑梗死患者的临床疗效及其对血清中扣针蛋白（ Fibulin）-5、血浆血管性血友病因子（ vWF）和P-选择素（ P-selectin）的影响。方法128例脑梗死患者随机分为两组，对照组64例应用常规方法治疗，观察组64例在常规治疗基础上加用丹参酮ⅡA磺酸钠注射液。于治疗前、后应用酶联免疫吸附实验对血清中Fibulin-5、vWF和P-selectin的表达进行检测。结果治疗14 d后，观察组梗死灶和美国国立卫生研究院脑卒中量表（ NIHSS）评分的变化值明显高于对照组。观察组治疗后血清中 Fibulin-5、vWF和 P-selectin 的下降值明显高于对照组。结论丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对脑梗死的疗效明显，且能有效下调血清中Fibulin-5、vWF和 P-selectin的含量，减少其诱导的相关级联反应，优化内环境。
关键词： 丹参酮ⅡA磺酸钠注射液 脑梗死 Fibulin-5 vWF P-selectin -
Fibulin-5在三阴型乳腺癌细胞侵袭中的功能研究
目的:研究Fibulin-5蛋白在三阴性乳腺癌(TNBC)细胞转移中的作用.方法:以三阴性乳腺癌细胞系(MDA-MB-231)分化而来的三株高中低不同转移能力的子细胞系为模型,高表达和抑制Fibulin-5在其中的表达,研究其对细胞侵袭能力的影响.结果:三阴性乳腺癌细胞内本底的Fibulin-5与其转移能力正相关,另外上调和抑制Fibulin-5可以改变其原有的侵袭能力.结论:Fibulin-5在三阴性乳腺癌细胞转移中发挥重要作用,抑制Fibulin-5可以降低三阴性乳腺癌细胞的侵袭能力.
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HMGB1/TLR4通路参与Fibulin-5对肺癌细胞增殖和转移的抑制作用
背景与目的:Fibulin-5在肺癌组织中低表达,具有抑癌作用.高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)在肺癌中高表达,能够促进肿瘤的侵袭转移.该研究旨在探讨Fibulin-5抑制肺癌细胞增殖和转移的分子机制.方法:该研究首先检测了肺上皮细胞和肺癌细胞中Fibulin-5和HMGB1的表达,然后利用转染试剂将Fibulin-5过表达质粒和HMGB1的siRNA转染人A549细胞.实现Fibulin-5过表达和HMGB1低表达后,采用MTT实验检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力.本研究采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测A549细胞中HMGB1 mRNA表达变化,采用酶联免疫吸附剂测定实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELisa)检测HMGB1蛋白的分泌;采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测HMGB1、cyclin?D1、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)和TLR4/NF-κB通路相关蛋白的表达变化.结果:在肺癌细胞A549中, Fibulin-5低表达,HMGB1高表达.过表达Fibulin-5和低表达HMGB1后,HMGB1、cyclin?D1、MMP2、MMP7和MMP9的表达均明显降低,A549细胞的增殖、侵袭和迁移能力明显减弱(P<0.05);此外,过表达Fibulin-5下调了TLR4、MyD88、p-p65的表达,上调了IκBα的表达(P<0.05).结论:Fibulin-5可能是通过抑制HMGB1的表达以及其下游的TLR4/NF-κB通路,抑制肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移的过程.
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Fibulin-5在卵巢癌组织中表达的临床意义及其功能
目的 探讨Fibulin-5在卵巢癌组织中表达的临床意义及其对卵巢癌细胞增殖和侵袭能力的影响.方法 采用定量反转录(qRT)-PCR和免疫组织化学染色技术检测56例卵巢癌和38例正常卵巢组织中Fibulin-5表达,应用Fibulin-5 shRNA干扰卵巢癌EFO-21细胞中Fibulin-5表达,细胞增殖溴脱氧尿苷(BrdU)细胞增殖分析和Transwell侵袭小室实验检测肿瘤细胞增殖和侵袭能力.结果 卵巢癌组织中Fibulin-5mRNA的表达水平显著高于正常卵巢组织(P＜0.001),Fibulin-5蛋白的阳性表达率为64.3％00(36/56),显著高于正常卵巢组织的21.1％(8/38,P＜0.001).Fibulin-5蛋白表达与肿瘤临床分期、病理分级和淋巴结转移相关(P值均＜0.05).卵巢癌EFO-21细胞转染Fibulin-5 shRNA质粒组的Fibulin-5蛋白表达量显著低于转染NT shRNA质粒组(P＜0.001);转染48 h后,卵巢癌细胞增殖能力、侵袭细胞数均显著低于转染NT shRNA质粒组(P=0.007、0.004).结论 Fibulin-5蛋白在卵巢癌组织中表达水平升高且与恶性临床病理特征相关,下调Fibulin-5可抑制肿瘤细胞增殖和侵袭能力,提示Fibulin-5蛋白在卵巢癌进展中可能发挥重要作用.
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基质蛋白Fibulin-5在眼眶IgG4相关性疾病中的表达
目的 探讨基质蛋白Fibulin-5与眼眶IgG4相关性疾病(IgG4-related ocular disease,IgG4-ROD)纤维化、炎症、硬化的关系.方法 收集20例(20眼)眼眶开放性粉碎性骨折清创术中采集的正常泪腺组织标本作为对照组,20例(20眼)眼眶IgG4-ROD患者的泪腺肿物作为IgG4-ROD组,采用免疫组织化学染色结合图像分析法对基质蛋白Fibulin-5进行半定量分析,采用实时荧光定量PCR和Western-blotting法检测Fibulin-5 mRNA及蛋白的相对表达量.结果 IgG4-ROD组中Fibulin-5 mRNA的表达水平为3.69±1.72,显著高于对照组(1.69±0.45),两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).Fibulin-5蛋白与Fib-ulin-5 mRNA表达变化趋势较为一致.IgG4-ROD组中Fibulin-5蛋白的表达水平为0.55±0.12,对照组中Fibulin-5蛋白表达水平为0.19±0.11,两组比较差异有统计学意义(P＜0.01).免疫组织化学结果显示,IgG4-ROD组中泪腺细胞排列不规则,染色为黄色、棕黄色的纤维化细胞排列紊乱,对照组中泪腺腺管规则,细胞规则排列,核染蓝色.IgG4-ROD组Fibulin-5蛋白的阳性表达显著高于对照组.结论 IgG4-ROD组中Fibulin-5 mRNA和蛋白表达较对照组显著升高,Fibulin-5可能促进眼眶IgG4-ROD的纤维化及硬化.
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Fibulin-5基因慢病毒表达载体的构建与鉴定
目的 构建Fibulin-5基因的慢病毒表达载体.方法 从pBluescript-Fibulin5质粒中克隆出Fibulin-5基因,将其连同慢病毒载体质粒pCDH-CMV-MCS-EF1双酶切,使目的 基因连接到载体质粒中,构建成重组慢病毒载体质粒pCDH-F5.对重组慢病毒载体质粒pCDH-F5进行酶切鉴定和测序鉴定后,制备包装病毒并感染膀胱癌细胞系5637,检测细胞中Fibulin-5基因的表达水平.结果 构建的重组慢病毒载体质粒pCDH-F5进行PCR及酶切鉴定,获得的克隆和酶切产物与预计的基因片段大小一致.所获得的Fibulin-5基因经测序后与报道序列对比仅有1处突变,且属同义突变,说明pCDH-F5中携带正确的Fibulin-5基因.通过感染5637细胞,发现构建的慢病毒转染效率达95%以上,且能有效表达Fibulin-5基因.结论 实验成功构建了Fibulin-5基因的慢病毒表达载体.
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Fibulin-5真核表达载体的构建及稳定转染人膀胱癌细胞的研究
目的 构建Fibulin-5真核表达载体并转染人膀胱癌5637细胞.方法 经聚合酶链反应(PCR)扩增Fibulin-5 cDNA,然后将其与pMD-19T载体连接.pMD-19T-Fibulin-5重组体经过限制性内切酶Xho Ⅰ和EcoR Ⅰ的消化后产生Xho Ⅰ-Fibulin5-EcoR Ⅰ片段.将该片段插入增强型绿色荧光蛋白载体(p-EGFP N1)质粒的相似位点并终合成p-EGFP-F5质粒重组体,并通过BgⅢ单酶切鉴定.通过脂质体介导法将p-EGFP-F5质粒转染至人膀胱癌5637细胞株内.结果 PCR扩增片段长度为1429 bp.Xho Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切的片段经DNA测序显示Fibulin-5 cDNA插入正确.p-EG-FP-F5质粒重组体经BgⅢ单酶切出一约450 bp的条带.转染48 h后,pEGFP-Fibulin-5和pEGFP-N1转染成功的细胞均有不同程度的绿色荧光表达.结论 成功构建Fibulin-5绿色荧光蛋白真核表达载体并转染至人膀胱癌细胞内.
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Fibulin-5在醛固酮腺瘤模型大鼠主动脉中的表达
目的 观察醛固酮对主动脉Fibulin-5表达的影响.方法 将32只SD大鼠随机分为4组,每组8只:(1)空白溶剂设为对照(60%丙二醇+10%乙醇+30%双蒸水);(2)醛固酮腺瘤:泵入醛固酮(1 μg/h);(3)醛固酮腺瘤+特异性盐皮质激素受体阻断剂:依普利酮[100 mg/(kg·d)];(4)醛固酮腺瘤+血管扩张剂:肼苯哒嗪[25 mg/(kg·d)].渗透泵内分别注入醛固酮或空白溶剂,然后将其埋植于大鼠背部皮下.8周后,免疫组织化学和免疫印迹法检测主动脉Fibulin-5的表达.结果 与对照组大鼠比较,腺瘤组大鼠主动脉Fibulin-5的表达显著增加(P＜0.05);与肼苯哒嗪不同,依普利酮可以抑制醛固酮的上述作用(P＜0.05).结论 醛固酮可以直接诱导主动脉Fibulin-5 表达增加,后者在醛固酮增多引起的主动脉重构过程中可能发挥重要作用.
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Fibulin-5过表达对膀胱癌细胞增殖的影响
目的 观察Fibulin-5对膀胱癌细胞增殖的影响.方法 采用脂质体介导法将构建好的p-EGFP-N1-Fibulin-5表达载体转染到膀胱癌5637细胞中.通过噻唑蓝(MTT)比色法和细胞计数法检测Fibulin-5表达上调后膀胱癌细胞生长率的变化.结果 酶切鉴定及DNA测序结果显示Fibulin-5 cDNA插入正确;转染48 h后,观测到p-EGFP-N1-F5表达载体转染成功的细胞均有不同程度的绿色荧光表达.培养第7天,MTT法测得转染Fibulin-5、转染空载体和未转染的膀胱癌细胞的吸光值分别为0.330±0.025、0.640 ±0.030和0.72±0.060.绘制生长曲线发现转染Fibulin-5的膀胱癌细胞的生长率明显低于转染空载体(P＜0.05)和未转染的细胞(P＜0.05).细胞计数结果和MTT一致.结论 Fibulin-5可能通过抑制膀胱癌细胞的增殖而在膀胱癌中起抑癌基因的作用.
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补中益气汤对Ⅲ度脱垂性内痔组织中Fibulin-5表达影响的研究
目的:探讨补中益气汤对Ⅲ度脱垂性内痔组织中Fibulin-5蛋白及其mRNA表达的影响.方法:将59例证型为脾虚气陷的Ⅲ度脱垂性内痔患者依门诊号顺序,按随机数字表法分为3组,其中治疗组(A组)20例,对照组(B组)20例,空白组(C组)19例;A组病人口服草木犀流浸液片,同时服用补中益气汤;B组病人口服草木犀流浸液片;C组仅做空白对照,不服用任何药物,均治疗1周.疗程停止后第2天,分别于A、B、C组患者中收取肛垫组织标本各10例,重新对应分组为A1、B1、C1组,采用PCR、Western-blot技术从基因-蛋白层次系统研究比较各组患者内痔组织中Fibulin-5 mRNA与蛋白的表达分布差异.结果:Fibulin-5溶解曲线、β-Actin溶解曲线提示引物具有特异,且无杂带、无杂信号.3组间Fibulin-5 mRNA表达水平比较,差异有统计学意义(P＜0.05).组间的两两比较:A1组Fibulin-5 mRNA表达水平高于B1组(P＜0.05);A1组Fibulin-5 mRNA表达水平高于C1组(P＜0.05);B1组Fibulin-5 mRNA表达水平高于C1组(P＜0.05).从Fibulin-5蛋白条带发现,A1组中Fibulin-5蛋白表达强且集中.3组间Fibulin-5蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(F=12.581,P＜0.05).组间的两两比较:A1组Fibulin-5蛋白表达水平高于B1组(P＜0.05);A1组Fibulin-5蛋白表达水平高于C1组(P＜0.05);B1组与C1组Fibulin-5蛋白表达水平相当,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:补中益气汤可促进Ⅲ度脱垂性内痔组织中Fibulin-5蛋白及Fibulin-5mRNA的表达;Fibulin-5蛋白及Fibulin-5mRNA的表达水平的降低,可能是脱垂性内痔形成的病理学机制之一.
