首页 > 文献资料
-
人肺腺癌耐顺铂细胞A549/CDDP获得侵袭转移能力的分子机制
目的:研究人肺腺癌耐顺铂细胞A549/CDDP获得侵袭转移能力的分子机制.方法:细胞划痕实验和Transwell侵袭实验比较A549和A549/CDDP的转移侵袭能力的差别,以及LY294002对A549/CDDP侵袭转移能力的影响.蛋白质免疫印迹技术检测AKT,NF-κB,STAT3信号通路的激活情况,MTr法检测A549和A549/CDDP对顺铂的敏感性,以及PI3 K/AKT通路抑制剂LY294002对A549/CDDP细胞对顺铂的敏感性的影响.结果:A549/CDDP对顺铂的耐药性以及侵袭转移能力相对于A549有明显增强.Westem blot结果表明:A549/CDDP细胞AKT通路被激活,NF-κB,STAT3通路没有明显变化.LY294002能够明显抑制A549/CDDP的侵袭转移能力并且能够提高A549/CDDP对于顺铂的敏感性.结论:A549/CDDP细胞相对于A549细胞的侵袭转移能力明显增强,其机制与PI3K/AKT信号通路的激活有关.
-
PI3K特异性抑制剂LY294002对人牙髓干细胞增殖和成骨向分化能力的影响
目的：体外实验研究磷脂酰肌醇3－激酶（PI3K）信号通路特异性抑制剂 LY294002对人牙髓干细胞（hDPSCs）增殖和成骨向分化能力的影响。方法：将第3代 hDPSCs 以含有不同浓度 LY294002的普通培养液刺激不同时间，CCK－8方法检测细胞的增殖能力；以含不同浓度 LY294002的矿化液诱导 hDPSCs，2周后用茜素红染色检测 hDPSCs 成骨向分化能力；用 RT－PCR 检测 hDPSCs 的成骨相关基因碱性磷酸酶（ALP）、骨唾液酸蛋白（BSP）和骨钙素（OCN）的表达水平。结果：随着刺激时间延长，不同浓度的 LY294002均能促进hDPSCs 的增殖。LY294002不同浓度组均抑制了 hDPSCs 的矿化结节的形成，且该抑制效果具有剂量依赖性。不同浓度的 LY294002均抑制了 ALP、BSP 和 OCN mRNA 的相对表达量。结论：LY294002能促进 hDPSCs 增殖，并抑制 hDPSCs 成骨向分化能力，PI3K 信号通路可能参与并调控了 hDPSCs 的增殖与成骨向分化。
-
磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂LY294002联合紫杉醇对卵巢癌裸鼠移植瘤的治疗作用
目的:观察磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂LY294002联合紫杉醇对裸鼠卵巢癌的抗肿瘤作用,为临床治疗中晚期卵巢癌提供实验资料. 方法: 将动物随机分为4组,即正常组、卵巢癌模型组、紫杉醇组及LY294002与紫杉醇联合给药组,用HO-8910PM细胞皮下接种建立卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,定期测量动物体质量及肿瘤直径;应用全自动血球分析仪进行血液学分析;荧光法测定动物肝脏丙二醛(MDA) 和超氧化物岐化酶 (SOD)含量. 结果: LY294002与紫杉醇联合应用对卵巢癌裸鼠全血WBC,Hb的降低有促进恢复作用(P<0.05),对肝脏MDA的升高有一定的抑制作用,可升高因患肿瘤而降低的SOD(P<0.05). 结论: LY294002可增强紫杉醇对卵巢癌的治疗作用.
-
PI3K抑制剂LY294002对人膀胱尿路上皮癌细胞增殖与凋亡的影响
目的 探讨不同浓度磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002对人膀胱尿路上皮癌细胞BC-6增殖及凋亡的影响.方法 临床采集30例膀胱尿路上皮癌患者的癌组织和癌旁组织,用RT-PCR方法检测其PI3K、Akt、mTOR的表达情况;以终浓度为5、10、20、40 μmol/L的LY294002作用于人膀胱尿路上皮癌细胞48 h,以MTT法检测细胞增殖情况,DAPI染色法比较细胞凋亡率,Western blot方法检测Akt和p-Akt的表达变化.结果 RT-PCR法发现膀胱尿路上皮癌组织中PI3K、Akt、mTOR的表达显著高于癌旁组织.不同浓度的LY294002对人膀胱尿路上皮癌细胞均有抑制增殖作用与促进凋亡作用,并呈一定时间和浓度的依赖性.此外,经LY294002处理的BC-6细胞Akt和p-Akt表达量下降且呈一定的剂量依赖性.结论 LY294002通过抑制PI3K-Akt通路对人膀胱尿路上皮癌细胞起抑制增殖和促进凋亡作用.
-
RNA干扰细胞黏附分子L1表达逆转胶质瘤U251细胞多药耐药
背景与目的:细胞黏附分子L1 (cell adhesion molecule L1,L1CAM)是一种跨膜黏附蛋白,在神经系统发育及肿瘤发生中发挥重要作用.本研究运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制L1CAM表达,并探讨其对胶质瘤U251细胞多药耐药的逆转作用及相关分子机制.方法:将针对L1CAM的小干扰RNA (siL1)和阴性对照siRNA (siCon)转染人胶质瘤U251细胞.实验分3组:空白对照组(胶质瘤U251细胞)、阴性对照组(转染siCon的胶质瘤U251细胞)、实验组(转染siL1的胶质瘤U251细胞).蛋白质印迹法(Western blotting)检测U251细胞中L1CAM、MRP1、pAKT及pERK1/2等蛋白表达.细胞增殖实验检测L1CAM对顺铂(cisplatin)和PI3K/AKT抑制剂LY294002抑制U251细胞增殖的影响.免疫荧光染色法检测抑制L1CAM表达对U251细胞系中AKT磷酸化情况的影响.结果:实验组L1CAM、pAKT、pERK1/2蛋白表达量明显低于阴性对照组和空白对照组(P＜0.01),但实验组多药耐药蛋白MRP1表达量以及Bcl-2α/Bax与阴性对照组和空白对照组相比无明显变化.实验组顺铂和LY294002对U251细胞增殖的抑制率高于阴性对照组和空白对照组,提示抑制L1CAM表达后细胞对顺铂和LY294002的敏感性增加.免疫荧光结果显示,与阴性对照组和空白对照组相比,实验组细胞内AKT磷酸化信号明显降低.结论:RNAi抑制L1CAM表达能增强顺铂和LY294002对U251细胞增殖的抑制作用,并可抑制PI3K/AKT和MAPK信号激活,一定程度上可逆转胶质瘤细胞的多药耐药性.
-
抑制PI3K/Akt信号转导通路对胶质瘤迁移能力的影响
目的 观察抑制PI3K/Akt信号转导通路对脑胶质瘤迁移能力的影响.方法 制备处于对数生长期的人脑胶质瘤细胞悬液,分为空白对照组和实验组,空白对照组细胞不进行药物处理,实验组细胞经过PI3K抑制剂LY294002(浓度调整为10umol/L、20umol/L)进行处理.伤口愈合实验法显微镜下记录16h、24h、32h宽度(μm)改变情况.结果 空白对照组16h、24h、32h宽度较实验组(10umol/L)明显减小(T12=5.07,P12＜0.001;T24=5.58,P24＜0.001;T32=6.11,P32＜0.001),差异具有统计学意义;实验组(10umol/L)16h、24h、32h宽度较实验组(20umol/L)减小(T16=1.15,P16=0.27;T24=1.41,P24=0.18;T32=1.00,P32=0.33),差异无统计学意义.结论 抑制PI3K/Akt信号转导通路可以明显的减弱胶质瘤细胞的迁移力,且表现为剂量和时间依赖性,可为治疗胶质瘤提供广阔的应用空间.
