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双黄升白颗粒对荷瘤鼠化疗骨髓抑制期Wnt信号通路的调控作用
目的 探讨双黄升白颗粒对荷瘤鼠化疗骨髓抑制期Wnt信号通路的调控作用.方法 采用Lewis肺癌荷瘤鼠腹腔注射环磷酰(cyclophosphamide,CTX)胺造成化疗骨髓抑制模型,用双黄升白颗粒干预治疗,常规计数白细胞、红细胞、血小板数量和肿瘤质量,流式细胞法检测骨髓造血干细胞比例(Sca、CD34双阳性细胞),实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测Wnt信号通路主要基因(Wnt、β-catenin、Frizz-ted、DSH、GSK3)mRNA的表达.结果 治疗组白细胞数量、造血干细胞比例均高于模型组(P＜0.05),Wnt、β-catenin、Frizzted、DSH、GSK3 mRNA在骨髓中的表达高于模型组(P＜0.05),Wnt、β-catenin、Frizzted、DSH mRNA在肿瘤中的表达则低于模型组(P＜0.05);各组红细胞、血小板、肿瘤质量、GSK3mRNA在肿瘤中的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 双黄升白颗粒治疗骨髓抑制的作用机制与调控Wnt信号通路有关,且该调控作用具有双重特性,即在上调骨髓Wnt信号通路主要基因表达同时抑制肿瘤中部分基因表达.
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双黄升白颗粒在慢性丙型病毒性肝炎抗病毒治疗中升白细胞作用的临床研究
目的：探讨双黄升白颗粒预防性治疗慢性丙型病毒性肝炎干扰素抗病毒治疗所致白细胞计数减少的临床疗效。方法选取2011年6月—2013年6月河南省中医院收治的慢性丙型病毒性肝炎患者62例，采用随机数字表法分为治疗组32例，对照组30例，分别于干扰素治疗开始同时服用双黄升白颗粒（15 g/次，3次/ d）和利血生（20 mg/次，3次/ d），然后检测每组患者治疗前，治疗后2、4、8周外周血白细胞计数、中性粒细胞计数及骨髓抑制情况。结果两组治疗前后白细胞计数和中性粒细胞计数比较，差异均有统计学意义（P ﹤0.05）；治疗方法与治疗时间存在交互作用（P ﹤0.05）；组间比较，差异有统计学意义（P ﹤0.05）；时间间比较，差异有统计学意义（ P ﹤0.05）。对照组22例（73.3％）患者发生骨髓抑制，其中轻度14例、中度6例、重度2例；治疗组12例（37.5％）患者发生骨髓抑制，其中轻度9例、中度2例、重度1例。对照组骨髓抑制发生率高于治疗组（χ2＝10.980，P ＝0.011）。结论双黄升白颗粒预防性用药对于治疗干扰素所致白细胞计数减少较利血生效果好，同时所致骨髓抑制发生率更低，双黄升白颗粒是一种安全有效的预防干扰素所致白细胞计数减少的有效药物。
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双黄升白颗粒双向调控细胞周期CyclinD-CDK4/6信号途径的进一步研究
目的:探讨双黄升白颗粒对化疗所致骨髓抑制荷瘤小鼠细胞周期CyclinD-CDK4/6信号途径的双向调控作用及其机制.方法:该研究采用Lewis肺癌荷瘤小鼠,30只小鼠随机分为空白组、模型组和治疗组.除空白组外,腹腔注射环磷酰胺制作骨髓抑制模型.治疗组用40g/( kg?d)双黄升白颗粒治疗6天后,流式细胞仪检测细胞周期情况,并计算增殖指数(proliferation index,PI),以实时荧光定量PCR法(reverse transcription quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测CyclinD-CDK4/6(cyclin D-cyclin dependent kinase 4/6,CyclinD-CDK4/6)上游激活信号CDC25A、上游抑制信号p16INK4a、p15INK4b,以及CyclinD-CDK4/6所激活的下游信号Rb、pRb、E2F的表达,并以western-blot法进行验证.结果:模型组骨髓组织的G0/G1期细胞比例均低于空白组(P＜0.05),PI和CDC25A、Rb、pRb、E2F的表达均高于空白组(P＜0.05).肿瘤组织G0/G1期细胞比例均低于空白组(P＜0.05),PI和CDC25A的表达均高于空白组(P＜0.05).治疗组骨髓G0/G1期细胞比例低于模型组及空白组(P＜0.05),PI及CDC25A、Rb、pRb、E2F的表达均高于模型组及空白组(P＜0.05).肿瘤组织G0/G1期细胞比例高于空白组及模型组(P＜0.05),PI及CDC25A的表达均低于模型组及空白组(P＜0.05).各组骨髓及肿瘤组织中p16INK4a、p15INK4b的表达经比较无统计学差异.各组肿瘤组织中Rb、pRb、E2F的表达经比较无统计学差异.结论:双黄升白颗粒对骨髓抑制Lewis肺癌荷瘤鼠的骨髓及肿瘤细胞周期具有双向调控作用,其机制可能与调控细胞周期CyclinD -CDK4/6上游激活信号CDC25A及其所激活的下游信号Rb、pRb、E2F的表达有关.
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双黄升白颗粒治疗肺癌化疗后骨髓抑制的临床研究
目的 观察中药双黄升白颗粒治疗肺癌化疗后骨髓抑制的临床疗效.方法 采用前瞻性随机对照的临床研究方法,将155例肺癌化疗后白细胞降低的患者分为治疗组(80例)和对照组(75例)；对照组采用利血生治疗,治疗组采用双黄升白颗粒治疗；两组均服药2周或至外周血白细胞计数≥4.0×109/L,观察中医证候疗效及外周血白细胞计数、免疫功能变化情况.结果 治疗组、对照组总有效率分别为83.75％、70.67％；组间中医证候疗效比较,差异有统计学意义(P＜0.05).两组治疗前后组内比较,外周血白细胞计数差异均有统计学意义(P＜0.05)；组间治疗后比较,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗前后组内比较,治疗组NK、CD3+、CD8+、CD4 +/CD8+差异有统计学意义(P＜0.05),对照组各指标差异均无统计学意义(P＞0.05)；组间治疗后比较,CD3+、CD8+、CD4 +/CD8+差异有统计学意义(P＜0.05).结论 双黄升白颗粒是一种安全有效的中药升白制剂,可有效用于治疗肺癌化疗后骨髓抑制导致的外周血白细胞计数减少.
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双黄升白颗粒对小鼠化疗骨髓抑制期骨髓EGFR信号通路的调控作用
目的 观察双黄升白颗粒对化疗后骨髓抑制小鼠骨髓组织EGFR信号通路主要成员表皮生长因子(EGF)、表皮生长因子受体(EGFR)、K-ras蛋白及基因表达的影响,并探讨其作用机制.方法 Balb/C裸鼠80只,随机分为10组,即空白组(6d、8d)、模型组(6d、8d)、厄洛替尼组(6d、8d)、厄+双组(6d、8d)、双黄组(6d、8 d).除空白组外,其余各组以腹腔注射环磷酰胺(CTX)建立化疗骨髓抑制模型.观察各组小鼠给药6d、8d的外周血白细胞计数,以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清EGF表达,以蛋白质印迹法(Western Blot)检测骨髓组织中EGFR信号通路主要成员EGF、EGFR、K-ras的变化,以实时荧光定量PCR(RTFQ PCR)检测骨髓组织中EGF mRNA、EGFR mRNA、K-ras mRNA的表达.结果 给药第8d时,除空白组外,其余各组小鼠外周血白细胞均有一定回升(P＜0.01),双黄组化疗骨髓抑制小鼠外周血白细胞数量明显高于除空白组外的其余各组(P＜0.01);除厄洛替尼组血清EGF表达稍高外(P＜0.05,P＜0.01),其余各组别间血清EGF表达差异不显著(P＞0.05);双黄组小鼠骨髓组织EGF、EGFR及K-ras蛋白及其mRNA表达明显高于模型组、厄洛替尼组及厄+双组(P＜0.01),而厄+双组表达明显低于双黄组,高于厄洛替尼组(P＜0.01).给药6d和给药8d比较,各指标差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 双黄升白颗粒可明显缓解小鼠化疗后骨髓抑制,其作用机制与EGFR信号通路有相关性.
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双黄升白颗粒对Lewis肺癌荷瘤鼠细胞周期双重调控的研究
目的 探讨双黄升白颗粒对肿瘤化疗骨髓抑制期的细胞周期的双重调控作用及其机制.方法 采用Lewis肺癌荷瘤鼠腹腔注射环磷酰胺造成化疗骨髓抑制模型,用双黄升白颗粒干预治疗.常规计数白细胞、红细胞、血小板数量和肿瘤大小,流式细胞术检测骨髓和肿瘤细胞周期分布,计算其增殖指数(PI),原位杂交法检测各细胞周期相应CDKs/Cyclins mRNA的表达.结果 双黄升白颗粒治疗组白细胞、骨髓细胞PI、骨髓中CDK4、CDK6与CyclinD mRNA表达均高于模型对照组,肿瘤细胞PI、CDK4、CDK6与CyclinDmRNA表达则均低于模型对照组.结论 双黄升白颗粒对化疗骨髓抑制期的Lewis肺癌荷瘤鼠的细胞周期具有双重调控作用,其作用机制与对CDK4、CDK6与CyclinD mRNA的表达的调控有关.
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双黄升白颗粒絮凝沉淀与醇沉工艺的比较研究
目的 比较双黄升白颗粒絮凝沉淀与醇沉工艺的优劣,为双黄升白颗粒的生产提供一定的依据.方法 采用高效液相法与紫外吸收光谱法测定提取液中黄芪总苷、淫羊藿苷含量,通过计算转移率和得膏率,比较两种澄清工艺.结果和结论 通过比较得出,两种工艺虽然在有效成分的保留上基本无显著性差异,但絮凝沉淀法在成本、工艺周期等方面具有明显优势.
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双黄升白颗粒对化疗所致骨髓抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠细胞周期的双重调控作用及其机制
目的:探讨双黄升白颗粒对化疗所致骨髓抑制荷瘤小鼠骨髓和肿瘤细胞周期双重调控的作用机制.方法:本研究采用Lewis肺癌荷瘤小鼠,30只小鼠随机分为空白组、模型组和治疗组.除空白组外,腹腔注射环磷酰胺制作骨髓抑制模型.治疗组用40 g/(kg·d)双黄升白颗粒治疗6 d后,流式细胞仪检测细胞周期情况,并计算增殖指数(proliferation index,PI);蛋白印迹法和免疫组织化学法检测骨髓及肿瘤组织中细胞周期蛋白依赖激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)、细胞周期蛋白依赖激酶6(cyclin-dependent kinase 6,CDK6)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达.结果:模型组骨髓及肿瘤的G0/G1期细胞比例均低于空白组(P＜0.05),PI和CDK4、CDK6、cyclin D1表达高于空白组(P＜0.05).治疗组骨髓G0/G1期细胞比例低于模型组及空白组,PI及CDK4、CDK6、cyclinD1表达均高于模型组及空白组;肿瘤组织G0/G1期细胞比例高于模型组及空白组,PI及CDK4、CDK6、cyclin D1表达均低于模型组及空白组.结论:双黄升白颗粒对骨髓抑制Lewis肺癌荷瘤鼠的细胞周期具有双重调控作用,其机制可能与双重调节cyclin D1、CDK4和CDK6表达有关.
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双黄升白颗粒对化疗所致骨髓抑制Lewis肺癌荷瘤鼠Notch信号通路的双重调控作用
目的:探讨双黄升白颗粒对荷瘤鼠化疗骨髓抑制期Notch信号通路的调控作用.方法:采用Lewis肺癌荷瘤鼠腹腔注射环磷酰胺300 mg/kg制成化疗骨髓抑制模型.荷瘤鼠随机分为空白组、模型组、治疗组,另设模拟接种的正常组,每组8只.治疗组在造模同时灌服双黄升白颗粒溶液0.4 ml/d,连续6d;其他组均灌服生理盐水0.4ml/d,连续6d.常规计数白细胞、红细胞、血小板数和骨髓有核细胞数,称取瘤重,荧光定量PCR法检测Notch信号通路中Notch1、Notch2、Notch3、Jagged、CSL的mRNA表达.结果:治疗组白细胞数、骨髓有核细胞数均高于模型组(P＜0.05),Notch1、Notch2、Notch3、CSL在骨髓中的mRNA表达高于模型组(P＜0.05),在肿瘤中的表达则低于模型组(P＜0.05);各组红细胞、血小板、瘤重、Jagged mRNA表达未发现明显差异(P＞0.05).结论:双黄升白颗粒治疗骨髓抑制的作用机制可能与调控Notch信号通路有关,且该调控作用具有双重特性,即在上调骨髓Notch信号通路主要基因表达的同时抑制肿瘤中部分基因表达.
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双黄升白颗粒对化疗所致骨髓抑制荷瘤小鼠细胞增殖的调控
目的:探讨双黄升白颗粒对化疗所致骨髓抑制荷瘤小鼠骨髓及肿瘤细胞增殖的调控作用.方法:本研究采用Lewis肺癌荷瘤小鼠,30只小鼠随机分为空白组、模型组和治疗组.除空白组外,腹腔注射环磷酰胺制作骨髓抑制模型.治疗组用40g/(kg·d)双黄升白颗粒治疗6d后,常规检测血常规、有核细胞数、肿瘤大小、骨髓及肿瘤细胞周期,以RT-qPCR(reverse transcription quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测增殖相关因子C-myc、N -myc、L-myc,并以免疫组化法进行验证.结果:模型组骨髓组织的G0/G1期细胞比例均低于空白组(P＜0.05),PI和C-myc、N-myc、L-myc的表达均高于空白组(P＜0.05).肿瘤组织G0/G1期细胞比例均低于空白组(P＜0.05),PI和C-myc、N-myc、L-myc表达均高于空白组(P＜0.05).治疗组骨髓G0/G1期细胞比例低于模型组及空白组(P＜0.05),PI及C-myc、N-myc、L-myc的表达均高于模型组及空白组(P＜0.05).肿瘤组织G0/G1期细胞比例高于空白组及模型组(P＜0.05),PI及C-myc、N-myc、L-myc的表达均低于模型组及空白组(P＜0.05).结论:双黄升白颗粒对骨髓抑制Lewis肺癌荷瘤鼠的骨髓及肿瘤细胞增殖具有双向调控作用,其机制可能与调控增殖相关因子C-myc、N-myc、L-myc的表达有关.
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双黄升白颗粒预防肺腺癌化疗后白细胞减少症临床观察
目的:观察双黄升白颗粒预防肺腺癌化疗后白细胞减少症的临床疗效.方法:将118例肺腺癌化疗患者随机分为治疗组60例与对照组58例,2组均作常规化疗治疗,自化疗第1天开始,治疗组口服双黄升白颗粒;对照组口服利可君片,连续服用14天.观察白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEUT)、临床症状、免疫功能(CD3+、CD4+、CD8+、NK细胞)等的变化情况,并对其安全性进行评价.结果:2组均有不同程度的WBC、NEUT绝对值下降,治疗组WBC、NEUT绝对值下降例数均少于对照组(P＜0.05).按照0级、Ⅰ～Ⅳ级进行区组,治疗组发生WBC、NEUT毒性反应例数少于对照组(P＜0.05);按照0级、Ⅰ～Ⅱ、Ⅲ～Ⅳ级进行区组,治疗组Ⅲ～Ⅳ级的WBC、NEUT毒性反应少于对照组(P＜0.05).2组rh-G-CSF平均使用量比较,差异无统计学意义(P＞0.05).总有效率治疗组为85.00％,对照组为55.17％,2组比较,差异有统计学意义(P＜0.05) 治疗后,治疗组CD3+、CD4+、NK细胞水平较治疗前提高(P＜0.05);对照组NK细胞水平较治疗前下降(P＜0.05);治疗组CD3+、NK水平改善较对照组更显著(P＜0.05).结论:双黄升白颗粒具有良好的预防肺腺癌化疗后白细胞减少的作用,且能改善临床症状,提高免疫功能,安全性良好.
